sod酶活性测定方法

sod酶活性测定方法,第1张

1、测定方法很多,常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法。其中化学法应用最普遍,化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和O2 -,利用SOD分解而间接推算酶活力。

2、在化学方法中,最常用的有黄嘌呤氧化酶法,邻苯三酚法,化学发光法,肾上腺素法,NBT-还原法,光化学扩增法,Cyte还原法等。

(1)改良的邻苯三酚自氧化法简单易行较为实用。

(2)化学发光法和光化学扩增法不适用于测定Mn-SOD,但对于Cu/Zn-SOD反应极灵敏。(3)Cyte还原法用于Mn-SOD活力测定结果稳定,重复性好。但专一性和灵敏度不够理想,而且需要特殊仪器,实际应用受到限制。

(4)亚硝酸盐形成法与CN—抑制剂或SDS处理相结合,应用于Mn-SOD测定,灵敏度比Cyte还原法提高数倍,而且专一性强,重复性好,操作方便,不需要特殊仪器和设备,易于实际应用和推广,是目前较好的测定方法之一。

(1)分析表格可知,第二组实验与第一组和后面的几组实验形成对照,所以①是蒸馏水浇灌,②是5℃.实验设计时每组取50株水稻幼苗,而不是1株,这样做的目的是避免偶然性,减少误差,使实验结果更准确.

(2)本实验的自变量是水杨酸的浓度,其余均为无关变量,如蒸馏水和水杨酸的浇灌量、光照强度、培养时间、刚开始幼苗的发育情况等.

(3)组别1和2的自变量是温度,根据实验结果可以得出结论:环境温度降低时,水稻幼苗自身可增强抗冷性.第6组与第2组相比,SOD活性降低,说明在5℃的冷胁迫下,20mmol/L的水杨酸对水稻幼苗抗冷性影响是减弱.

故答案为:

(1)蒸馏水浇灌        5℃避免偶然性,减少误差,使实验结果更准确

(2)蒸馏水和水杨酸的浇灌量、光照强度、培养时间、刚开始幼苗的发育情况等

(3)环境温度降低时         减弱

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