一抗稀释液常温放了一个小时还能用,一抗稀释液(BondTM Primary Antibody Diluent)是一种化学溶液,产自英国一抗具有个体差异性,有的可以低温保存重复使用很久,有的择很容易变质。一抗稀释液(Western Blot)公司正在热销的产品:胞核微型RNA(Pre-RNA)电泳法分离试剂盒20次小鼠硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA试剂盒,胞核微型RNA(Pre-RNA)超滤法分离试剂盒10次小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒,$r
感觉你说的这个问题应该是抗体稀释倍数吧?
是希望用封闭液稀释抗体吗?最主要的参考指标来自于抗体的说明书,使用说明书中建议的一抗稀释比例:
例如如果建议做Western时,一抗稀释比例是1:1000,那也就是说,1ul的抗体要加999uL的封闭液。这样得到就是1:1000的抗体稀释液了,可以用于实验。
western blot 一抗一般都是以原液的形式保存的,不需要用溶剂溶解
western blot 一抗使用的时候一般只需要稀释,购买时厂家应该会提供一抗稀释液。如果没有一抗稀释液可以用TBST或者PBST稀释,这个要看具体使用的情况了
稀释液的主要成分是渗透压、PH值都和血液一样的缓冲溶液,它使红血球可以保持原来的形状,不会产生凝集和溶血现象,从而使反应的速度更快,;检测更顺利的出结果;在通常情况下,;不用稀释液也能出结果,不过反应的速度会降低;但是在血球浓度太大(血液太粘稠)或室温较低的情况下,检测可能会出不了结果,导致检测失败,这就应加入稀释液了。
用法:;正确的使用方法应该是先将血液滴入试纸,等5-10秒以后再加上稀释液,促进反应。不应该直接用稀释液来稀释血液,这样如果稀释液量少还没关系,如果太多了,会大大降低试纸的灵敏度。因为从反应过程看,应该是血清中的抗原或者抗体,先与标记在试纸上的胶体金反应,反应的复合物在层析作用下向上移动,这时候加入稀释液,会产生一个比较大的液体压力、就可以使复合物向上移动的速度增加,减少反应的时间。如果直接用来稀释血液,会让开始反应的浓度下降,影响灵敏度。
注意:HIV试纸稀释液不能用别的液体来代替,如自来水、矿泉水等,也不能用其他种类的试纸的稀释液代替。
标准操作是;加两滴血液以后,加入1-2滴稀释液后确保检查的成功进行。
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