黄芩苷如何提取分离

黄芩苷的提取分离方法（沸水提取法） （1）称取黄芩粗粉50g，置于1000ml烧杯中，加8倍量水 （500ml）,加热煮沸1小时，如此2次，合并提取液。(水提) （2）将提取液加浓盐酸至pH1-2,加热至80度左右保温半小时 后，放冷析出结晶，抽滤。（酸沉） （3）收集粗品，加入8倍量水，搅匀，用浓氢氧化钠(40%)调 至pH7，溶解，过滤取滤液，加等量乙醇，使黄芩苷成钠盐溶解， 滤除杂质。（成盐除杂） （4）往滤液中滴加浓盐酸至pH1-2,充分搅拌，50度下保温半 小时使黄芩苷析出，滤取沉淀，以10ml乙醇洗涤，干燥，得黄芩 苷。再以7倍量95%乙醇洗涤，干燥，得较纯的黄芩苷。

1)CO2超临界萃取及分子蒸馏的高科技提纯技术

2)缩液亦采用正丁醇萃取

下面是2种方法的介绍

一超临界流体萃取（Supercritical Fluid Extraction， SFE）技术是20世纪60年代兴起的一种新型分离技术。20世纪80年代中期以来，由于其选择分离效果好、提取率高、产物没有有机溶剂残留、有利于热敏性物质和易氧化物质的萃取等特点SFE技术逐渐被运用到天然产物有效成分的提取分离上，并且与GC、IR、GC-MS、HPLC等联用形成有效的分离技术。

超临界流体（Supercritical Fluid，SF）是指在临界温度（Tc）和临界压力（Pc）以上，以流体形式存在的物质，目前研究较多、最常用的超临界流体是二氧化碳。在超临界状态下将SF与待分离的物质接触，使其有选择性地溶解其中的某些组分。SF的密度和介电常数随着密闭体系压力的增加而增加，因此利用程序升压可将不同极性的成分进行分步提取。然后通过减压、升温或吸附的方法使超临界流体变成普通气体，让被萃取物质分离析出，从而达到分离提纯的目的，这就是超临界流体萃取的基本原理。

目前，超临界萃取技术的分离主要用于挥发油、生物碱类、香豆素和木脂素类、黄酮类、萜类、苷类、醌类等天然产物活性成分提取。

二,,,,,苷类溶于各种醇、丙酮、乙酸乙酚 ,氯仿等、氨基酸常用甲醇或乙醇来结晶等。

如果在文献中找不到合适的溶剂，可根据要结晶化合物的极性大小，利用相似相溶的溶解度规则，通过实验选择溶剂。其方法是:取01g的产物放人一支试管中，滴人1ml溶剂，震荡下观察产物是否溶解，若不加热很快溶解。说明产物在此溶剂中溶解度太大，不适合作此产物重结晶的溶剂;若加热至沸腾还不溶解，可补加溶剂，当溶剂量大于4ml一产物仍不溶解，则说明此溶剂也不适宜。如所选择的溶剂能在1~4ml溶剂沸腾的情况下使产物全部溶解，并在冷却后能析出较多晶体，说明此溶剂适合作为此产物重结晶的溶剂。实验中应同时选用几种溶剂进行比较有时很难选择到一种较为理想的单一溶剂，这时应考虑使用混合溶剂。

所谓混合溶剂，就是把对此物质溶解度很大的和很小的而又能互溶的两种溶剂(例如水和乙醇)混合起来，这样常可获得新的良好的溶解性能口用混合溶剂重结晶时，可先将待纯化物质在接近良溶剂的沸点时溶于良溶剂中〔在此溶剂中极易溶解)。若有不溶物，趁热过滤:若有色，则用活性炭煮沸脱色后趁热过滤。于此热溶液中小心地加人热的不良溶剂(物质在此溶液中溶解度很小)，直至所呈现的混浊不再消失为止。再加人少量良溶剂或稍稍加热使恰好透明。然后将混合物冷却至室温，使结晶自溶液中析出。有时也可将两种溶剂先行混合，再进行结晶。如1:1的乙醇和水，其操作和使用单一溶剂时相同。常用的混合溶剂

如表3--1所示。

表3-1结晶和重结晶常用的混合溶剂

水一乙醇 甲醇一水 石油醚一苯 氯仿一醇 苯一无水乙醇

水一丙醇 甲醇一乙醚 石油醚一丙酮 乙醇乙醚一乙酸乙醋

苯一环己烷 水-乙酸 甲醇一二氯乙烷 氯仿一醚 乙醚一丙酮

甙类： （glycosides） 甙，又称配糖体或苷，是由糖或糖的衍生物（如糖醛酸）的半缩醛羟基与另一非糖物质中的羟基以缩醛键（甙键）脱水缩合而 成的环状缩醛衍生物。水解后能生成糖与非糖化合物，非糖部分称为甙元（ag1ycone），通常有酚类、蒽醌类、黄酮类等化合物。

　（一）通性

　1大多数甙无色，无臭，具苦味。少数甙有色如黄酮甙、蒽甙、花色甙等。少数具甜味，如甘草皂甙。

　2多数甙呈中性或酸性，少数呈碱性。

　3多数甙可溶于水、乙醇，有些甙可溶于乙酸乙酯与氯仿，难溶于乙醚、石油醚、苯等极性小的有机溶剂。甙类在水或其他极性较大的溶剂中的溶解度，一般随 结合的糖分子数的增加而加大。甙元的性质亦可影响甙的溶解度。如氰醇甙在水中易溶而黄酮甙就较难溶。甙元不溶于水，能溶于有机溶剂。

　4 甙类易被稀酸或酶水解生成糖与甙元。但是有些植物体内原存在的甙中有数个糖分子，称为一级甙，水解时可先脱去部分糖分子生成含糖分子较少的次级甙，次级甙 进一步水解得糖与甙元。甙水解成甙元后，在水中的溶解度与疗效往往都大为降低，因此在采集、加工、贮藏与制造含甙类成分的中草药时，必须注意防止水解。例 如在采集时尽量减少植物体的破碎，采集后尽快干燥，贮藏中保持干燥，提取时不要在水溶液或酸性溶液中长时间放置等。

　5天然产的甙类一般具有一定的光学活性（大多为左旋性）而无还原往。水解后由于生成还原糖，往往变为右旋性并具还原性。这一性质可用于中草药中甙类成分的检识。水解前后的还原性通常用fehling试验来检查。

　6某些甙类如皂甙、黄酮甙等可与醋酸铅或碱式醋酸铅试剂生成沉淀，此沉淀脱铅后又可恢复成原来的甙。此性质可用于甙类成分的提取。

　（二）各类甙的性质与定性反应：

　由于甙元的化学结构种类很多，甙类一般分为下面几类：

　1含硫甙（thioglycosides）又称芥子油甙，水解后生成异硫氰酸酯类（芥子油）与葡萄糖。这些酯类为有一定挥发性的油状液体，一般具有特 殊气味，本类甙在十字花科植物中广泛分布，并有芥子酶共存，当含此类甙的中草药加水研磨时即因酶解生成异硫氰酸酯类而具刺激或其它生 物性。如芥子中的芥子甙（sinigrin）酶解后生成的黑芥子油即异硫氰酸丙烯酯，外用为皮肤发赤剂，有局部止痛、消炎作用。白芥子中的白芥子甙 （sinalbin）酶解后生成白芥子油即异硫氰酸对羟基苄酯，有相似作用。萝卜根中的特殊气味，即由其含有的萝卜甙（glucoraphenln）酶解 后生成的萝卜芥子油所致。

　定性反应： 取药材打碎，于30℃放置2小时后进行蒸馏，收集馏出液，取馏出液1滴，加苯肼滴即生成氨基脲（semicarbazlde）衍生物结晶，可于显微镜下检视，可因熔点不同而区别各种异硫氰酸酯类化合物。

　2氰醇甙（含氰甙，cyanogNetic glycosides）甙元为含氰基（一c=n）的氰醇衍生物。氰甙在水中溶解度较大，不稳定，易被同存于植物体中的酶水解。甙元水解后可产生有毒的氢氰酸。如以苦杏仁中的苦杏仁甙为例：

　苦杏仁具有镇咳作用即由于苦杏仁甙水解后产生的氢氰酸的镇咳作用所致。由于氢氰酸有毒用时必须控制服用剂量。枇杷仁、木薯根以及其他一些蔷薇科植物的种子、叶与树皮中常有大量氰醇甙存在。在忍冬科、豆科、亚麻科等植物中亦有分布。

　定性反应： 取药材粉未02～059，置于小试管中，加少量水润湿，管口用软木塞塞住，上悬挂一条用水润湿的苦味酸钠试纸，将试管置40～50℃水浴中加热，如有氰醇甙存在，会因水解产生的氢氰酸而使试纸由橙**变为砖红色。

　3酚和芳香醇衍生的甙类（pheno1 g1ycosides）此类成分在中草药中普这存在。有不少具有一定的生物活性。如柳属（salix）、杨属（popu1us）、芍药属（paeonia）、松属（pinus）等多种植物。

　本类甙多为结晶体，无色，味苦。一般易溶于热水，能溶于冷水、乙醇，不溶于乙醚、氯仿等有机溶剂。游离甙元分子量小的常有挥发性，分子量较大者或结合成甙者均无挥发性。易水解生成甙元与糖。

　柳树皮和杨树皮中的水杨甙（salicin）有解热镇痛作用；牡丹皮和徐长卿中的牡丹酚（paeonol）有镇痛镇静作用。杜鹃花科植物中所含的熊果甙（arbutim）有抗菌作用。

　本类甙或其水解产物一般可与三氯化铁试剂反应显色。如牡丹酚甙水解所生牡丹遇三氯化铁显红棕色。

　4羟基蒽醌衍生物有蒽甙（anthraglycosides）、蒽醌（anthrapuinone）是具有下列结构的化合物，由它可产生一系列衍生 物，并可与糖结合成甙。中草药内存在的多为羟基蒽醌衍生物及其甙类，部分为羟基蒽酚衍生物及其甙类和二蒽酮衍生物及其甙类。

　本类成分在蓼科植物中广泛分布。豆科、茜草科、百合科等科植物中亦有存在，含这类成分的常用中草药有大黄、何首乌、虎杖、决明子、番泻叶、茜草、芦荟等。

　（1）通性： 常见的羟基蒽醌类衍生物有大黄中的大黄素（emodin）、大黄酸（rhein）、大黄酚（chrysophanol）、芦荟大黄素（aloe-emodin）、大黄素甲醚（physcion）、茜草中的茜草（alizarin）等。

　蒽甙与其甙元多呈**或桔红色，蒽甙易溶于水，在稀醇中的溶解度比在高浓度醇中大，难溶于乙醚、氯仿或其他与水不相混溶的有机溶剂。蒽甙元大多具结晶 形，不溶或难溶于水，可溶于乙醇、氯仿、乙醚等有机溶剂中。蒽醌类衍生物多有荧光与升华性，遇碱显红色，遇醋酸镁的甲醇溶液显红色至紫色。蒽醌类成分大多 具有致泻作用，有些有抑菌作用，如大黄酚与大黄素。

　（2）定性反应：

　1）药材断面加1％氢氧化钠（钾）或氢氧化铵溶液，显红色。此红色加酸则色褪而复现**。此反应亦可用中草药浸出液于滤纸上进行。

　2）borntrger反应： 取药材粉末约01g置试管中，加碱液数ml浸出，过滤，滤液呈红色，加盐酸酸化，可见红色又转为**，加数ml苯或乙醚振摇，可见有机溶剂层显**，分取苯或乙醚溶液，加碱液振摇，如碱液显红色示有羟基蒽醌衍生物。

　3）微量升华： 取少量药材粉未进行微量升华，可见多种形状的**升华结晶，加碱液结晶消失并显红色。

　4）醋酸镁反应：取药材粉末用甲醇加热浸出，取1ml浸出液加05％醋酸镁甲醇溶液数滴，如有蒽甙存在可显橙、红、紫等颜色，所显色泽与分子中羟基的 数目与取代位置有关，如果分子中至少有两个酚性羟基位于不同苯环的α位上，如大黄素、大黄酸等显红色，两个酚性羟基位于同一苯环的α位如羟基茜草素显紫红 色；两个酚性羟基分别位于同一苯环的α位与β位如茜素显蓝紫色。所显色泽为羟基蒽醌与镁成络合物而致。

　5）定量方法： 一般有重量法、容量法、萤光法、比色法等。以比色法应用最广泛。主要原理是利用羟基蒽醌衍生物与碱液生成红色进行比色。且因游离的羟基蒽醌类一般生物活性较其甙类小、故要测定结合蒽醌的含量。兹简介比色法如下：

　a）标准曲线的制备： 精密称取50mg左右的1，8一二羟基蒽醌，于250ml容量并中用乙醚溶解并稀释至刻度。精密量取上述标准液050、 100、200、300、 400、500m1，分别放人25ml容量瓶中，在水溶上蒸去乙醚，加5％氢氧化钠及2％氢氧化铵混合碱液至刻度， 摇匀，30分钟后比色，以试剂为空白对照，绘出光密度——浓度的曲线。

　b）测定方法：

　（1）游离蒽醌的测定： 药材粉末 （40目）01～29，在索氏提取器中以氯仿提取至无色，氯仿液以5％氢氧化钠及2％氢氧化铵混合碱液萃取至无色。碱液用少量氯仿洗涤，过滤，沸水浴中 加热4分钟，冷至室温，调整至一定体积，30分钟后同上法比色，由标准曲线计算含量。

　（2）结合蒽醌的测定： 药材粉末（40目）0 1～1g于三角烧瓶中加30m1 5n硫酸液回流水解2小时，稍冷后加30ml氯仿继续回流1小时，用吸管吸出氯仿液，加入20ml氯仿继续回流1小时， 吸出氯仿液后再加10ml氯仿，重复操作至提取液无色。合并氯仿液，用少量蒸馏水洗涤，用同上混合碱液同法进行比色测定，测得之总蒽醌含量减去游离蒽醌含 量，即得结合蒽醌含量。

　5黄酮类及黄酮甙（flavonoid g1ycosdes）又称黄碱素类，是广泛存在于植物界的一类天然色 素。在许多中草药内是有效成分，具有c6-c3-c6的基本碳架。从这个基本碳架可以衍生出许多不同的结构。目前已知的约有18种类型，其中主要的有下列 几种，在柏科、银杏科、杉科等子植物中尚有双黄酮（biflayones）存在。大多数黄酮类化合物与葡萄糖或鼠李糖结合成甙，部分为游离状态或与鞣质 结合存在。

　（1）通性：黄酮类大多为**结晶物，也有的是无定形粉末如白花色甙元和其甙类。异黄酮几无色或浅**。双氢黄酮与双氢黄酮醇 均无色。黄酮甙一般易溶于热水、甲醇、乙醇、吡啶、乙酸乙酯与稀碱液，难溶于冷水及苯、乙醚、氯仿中。游离的黄酮类一般难溶于，较易溶于有机溶剂（在乙酸 乙酯中溶解度较大）与稀碱液。一些黄酮类在紫外光下可显萤光，如以氨蒸汽或碳酸钠水溶液处理后萤光更明显。多数黄酮类可与镁盐、铝盐、铅盐等反应生成颜色 较深的络合物。

　（2）分布与作用：黄酮类及黄酮甙在植物界分布广泛，许多中草药均含本类成分如槐花米、黄芩、陈皮、葛根、野菊花、水飞 蓟、银杏叶等。以豆科、芸香科、菊科、唇形科的植物中较多。一般具降压、抗菌以及调节血营渗透压的作用，目前还发现有抑制肿瘤细胞与防护紫外线损伤的作 用。

　（3）定性反应

　①药材粉末少量置试管中，加95％乙醇数ml，温热浸出，过滤，滤液加镁粉与数滴浓盐酸，溶液变橙或红色。这是由于黄酮类被还原生成花色甙元与其二聚物而致。分子中羟基或申氧基数目多时，色较深，c3位上无羟基的黄酮类反应不明显。

　②药材粉末的乙醇溶液加1％三氯化铝乙醇溶液，凡3位或5位有羟基的黄酮会因与al产生络合物而显鲜**。

　（4）定量方法： 一般有重量法、萤光法、比色法等，通常多用比色法。主要原理是根据黄酮类成分结构中有碱性氧原子，一般又多有酚羟基，可以与许多试剂产生颜色而制定。下面简介比色法。

　①标准曲线的制备： 精密称取标准芸香甙一定量，以乙醇溶解并稀释至每ml约含60μg，精密量取05～500 ml不同量的此溶液，分别用乙醇稀 释至500 m1，准确加入3ml 01m三氯化铝溶液及5mi1m醋酸钾溶液，放置40分钟，在分光光度计415nm测定光密度，绘制光密度一浓度 标准曲线。

　②测定方法： 精密称取样品粉末（60目）05～109于100ml锥形瓶中，精密加入一定量稀醇，将锥形瓶与内容物共称 重（准确到01g），水浴回流一定时间，冷后再称重，补充溶剂至原重，过滤，取一定量滤液稀释到适当浓度，取此液一定量，准确加入3ml 01m氯化 铝溶液及5mi 1m醋酸钾溶液，另补充蒸馏水使总量为13m1， 40分钟后同上比色，以同一滤液同样量加水至13 ml为空白对照，以标准曲线计算含 量。

　6香豆精及香豆精甙（coumarin g1ycosides）香豆精又名香豆素，在植物中分布广泛，尤以伞形科、豆科、芸香科、 菊科等植物中为多，原多数用为香料，后因发现其有扩张冠状动脉、抑制肿瘤与防御紫外线烧伤作用而受到重视。香豆精的基本结构如下所示，此外尚有呋喃骈香豆 精类、异呋喃骈香豆精类衍生物。秦皮中的七叶树甙（aesculin）、补骨脂中的补骨脂内酯（psora1en）、亮菌中的假蜜环菌素甲 （armillarisina）等均属香豆精类及其衍生物。香豆精甙能溶于水、甲醇、乙醇、碱液，难溶于亲脂性有机溶剂，其甙元能溶于沸水、乙醇、甲醇、 氯仿、乙醚及碱液，难溶千冷水。香豆精类成分多具有芳香性，能随水蒸汽挥发或升华，多有萤光，紫外光下或在碱往溶液中更为明显。医学教 育网 整理

　定性反应 异羟肟酸铁试验：药材粉末05g，加5ml甲醇，在热水浴中加热数分钟，过滤，滤液加7％盐酸羟胺甲醇溶液2～3滴， 10％氢氧化钠溶浓2～3滴，水 浴微热，冷后用稀盐酸调节ph为3～4，加1％三氯化铁乙醇溶液1～2滴，如显红色或紫色反应，示有香豆精类成分。

　7强心甙（cardiac g1ycosides）本甙类为存在于自然界的一类对心肌有显著兴奋作用的甙类，在医药上多用为强心药。

　（1）通性： 强心甙元为带有不饱和内酯环的甾体衍生物。此不饱和内酯环多数为五元环（甲型），少数为六元环（乙型），都连接在甾核的c17位上。

　按照现代对甾体化合物的化学命名法，属于甲型强心甙元的基本结构称为强心甾（cardenclide），属于乙型甙元的基本结构称为海葱甾 （scillanolide）或蟾酥甾（bufanolide）。强心甙中的糖大多连接在c3羟基上，糖的分子为单糖、双糖或多个， α一羟基糖外，尚有 一类特殊的糖——α去氧糖，如d-洋地黄毒糖（digitoxose） d夹竹桃糖等。

　强心甙在植物体内存在形式常为一级甙。含强心甙的植物中通常同时有能水解该类甙的酶存在，能水解一级甙的糖链的α-羟基糖（一般为末位的葡萄糖）部位而生成次级甙。无机酸可使强心甙完全水解成甙元与糖。

　强心甙一般能溶于水、乙醇、甲醇等，可溶于乙酸乙酯、氯仿，难溶于乙醚、苯。 强心甙易被酶、酸或碱水解。强心甙的生物活性与其化学结构有很大关系，如果被水解成甙元或内酯环被破坏，强心作用就减弱或消失。放在采集、贮藏、制造含强 心甙的中草药过程中更应注意防止水解的问题。

　（2）分布： 含强心甙的中草药有洋地黄、毛花洋地黄、黄花夹竹桃、毒毛旋花子，万年青、夹竹桃等。以玄参科、夹竹桃科、萝摩科、百合科、十字花科、桑科等植物中分布较多。

　（3）定性反应

　① keller一kiliani （k一k）反应： 药材粉末1g置锥形瓶冲，加70％乙醇10m1，水浴回流30分钟后过滤，滤液盛于小蒸发皿中， 加热蒸干。残渣溶于1ml 05％三氯化铁一冰醋酸溶液，将溶液倾于小试管中，沿管壁徐徐加浓硫酸1m1，二液面接触处显棕色环示有强心甙的存在；冰醋 酸层显蓝绿色示有a-去氧糖的存在，如样品含色素、树脂较多会影响颜色的观察，可先将样品用乙醚提去色素等，过滤，滤渣再同上法进行试验。

　② 3，5二硝基苯甲酸试验（kedde试验）同上法制备药材的氯仿浸液，点样于滤纸上，再滴3，5一二硝基苯甲酸试剂，显红色。本试验对六元不饱和内酯环型的强心甙呈阴性反应。此反应的原理是由于不饱和内酯环中c21活性次甲基的存在所致。

　8皂甙（saponins）又称皂素。因其水溶液经振摇后易起持久的肥皂样泡沫而得名。

　（1）通性： 大多数皂甙为白色或乳自色无定形粉末，富吸湿性，能溶于水、稀乙醇、甲醇、不溶于乙醚、氯仿、苯等有机溶剂。皂甙的水溶液遇醋酸铅或碱式 醋酸铅试剂可产生沉淀。皂甙有去污作用，味辛辣，能刺激粘膜，尤其对鼻粘膜为甚，吸入鼻内可打喷嚏，口服后能促进呼吸道和消化道的分泌，所以常用为祛痰 药。皂甙与血液接触后能破坏红血球，产生溶血现象，因此含皂甙的中草药不能用于注射，特别是静脉注射。皂甙溶血作用的大小随其种类不同而异，其溶血的最低 浓度称为该皂甙的溶血指数（haemo1ytic index），利用溶血指数可以测定中草药中皂甙的含量，但结果较粗略，口服皂甙不会产生溶血现象，可 能因皂甙在胃、肠中被水解所致。皂试多能与一些大分子醇或酚类如胆甾醇等结合生成分子化合物，此类分子化合物经过一定方法处理后可使其结合状态破坏而将皂 甙重新析出，故此性质可用于皂甙的提取分离。

　（2）分类： 根据皂甙元结构的不同可分为两类：

　①三萜式皂甙 （triterpenoid saponins）皂甙元为三萜类衍生物，具30个碳原字。大多数在甙元上带有羧基，故又称酸性皂甙。在酸性溶液中形成较稳 定的泡沫，能被醋酸铅试剂沉淀。本类皂甙在植物界分布较广，尤以石竹科、桔梗科、五加科、豆科等为多。桔梗、南沙参、党参、人参、三七、瞿麦、甘草、远 志、紫菀、地榆等许多中草药都含有本类皂甙。其甙元有五环三萜与四环三萜二种，五环三萜又可分为β-爱留米脂醇型（β-amyrin）、a一爱留米脂醇型 等多种类型。四环三萜又可分为羊毛脂醇型（lanostero1）等多种类型。

　②甾式皂甙（steroid saponins）皂甙元为 甾体衍生物，具27个碳原子。不具羧基，故又称中性皂甙。在碱性溶液中形成较稳定的泡沫，能被碱式醋酸铅试剂沉淀。本类皂甙主要存在于薯蓣科、百合科植物 中，如各种薯蓣、七叶一枝花、土茯苓、知母、麦冬等。甾式皂甙因可作为合成甾体激素的原料而有重要意义。其甙元基本骨架为螺旋甾烷 （spirostane）。

　（3）定性反应：

　①取059药材粉末，加水5m1，煮沸浸出，过滤，浸出液放试管中激烈振摇，能产生持久（15分钟以上不消失）蜂窝状泡沫。

　②取药材粉末1g加水数ml煮沸，过滤得水浸液，取1m1，加2％血球悬浮液5ml及生理食盐5ml摇匀，如放置5分钟后溶液变透明（溶血），示可能有皂甙存在。

　③libermann一buehard反应： 药材粉末1g，加5～10ml 70％乙醇热浸、浸出液蒸干，浓硫酸一醋酐试剂1～2滴，颜色由黄-红-紫一蓝示可能有三萜皂甙，如继续变为绿色示可能有甾式皂甙存在。

　（4）定量方法： 可用重量法、比色法或溶血指数法测定。溶血指数法较方便，但其结果受条件（如试管大小、溶液ph、温度。血液种类等）影响较大，故不够精确。简述方法如下：

　①05％药材浸出液的配制：药材粉末以等渗磷酸盐缓冲液（或生理食盐水）精确配制成05％浓度。

　②溶血指数的测定： 取直径、长短一致的9支小试管，分别精确吸入01、02、03、……09m1中草药浸出液，精密加缓冲液补足体积为1m1，各试管中再各精密加1ml 2％血球悬浮液，各管摇匀后由可以产生完全溶血的中草药最低浓度来计算溶血指数。

　③皂甙含量的测定： 用标准皂甙（是同一药中提出的纯皂甙）配成适当浓度的溶液，同上法测定溶血指数，从标准皂甙与中草药浸出液的溶血指数计算中草药中皂甙的百分含量。

　9其他甙类

　（1）环烯醚萜甙类（iridoid g1ycosides）和裂环烯醚萜甙类（secoiridoid glycosides）是由环烯醚单萜 （iridoids）衍生物与糖所成的甙类。广泛分布于植物界，尤以茜草科、玄参科、龙胆科、鹿蹄草科等为多，如地黄、栀子、玄参、龙胆、鹿蹄草等。目前 已发现的在80种以上，因其具有多种生物活性而被日趋重视。

　本类成分大多为结晶性或无定形固体，具吸湿住，易熔于水、醇、稀丙酮等极性度较大的溶剂。遇酸易水解。且常使植物组织变黑，常有特殊的显色反应。

　（2）木脂素（lignans）及其甙类木脂素又称木脂体，是由二分子苯丙烯衍生物聚合而成的化合物。多数为游离状态，或与糖结合成甙。五味子中的五味 子素有降谷丙转氨酶的作用；鬼臼属（podophy11um）多种植物的木脂素及其甙类有抗癌作用，但毒性大，芝麻中的芝麻素只杀虫剂的增效作用等。木脂 素类多为白色晶体，具光学活性，游离者多难溶于水，能溶于有机溶剂。遇浓硫酸显色。

苷类，又称配糖体，甙类，是由糖或糖衍生物的端基碳原子与另一类非糖物质（称为苷元、配基或甙元）连线形成的化合物。大多数苷类无色，无臭（xiù），具苦味。少数苷类有色如黄酮苷、蒽苷、花色苷 等。少数具甜味，如甘草皂苷。

基本介绍 中文名 ：苷类 外文名 ：glycosides 拼音 ：gān leì 分布 ：生物体内 性质特征,分类,氧苷（O-苷）,硫苷（S-苷）,氮苷（N-苷）,碳苷(C-苷）,药学作用, 性质特征 1． 酸碱性 ：多数苷类呈中性或酸性，少数呈碱性。 2． 溶解性 ：多数苷类可溶于水、乙醇，有些苷类可溶於乙酸乙酯与氯仿，难溶於乙醚、石油醚、苯等极性小的有机溶剂。苷类在水或其他极性较大的溶剂中的溶解度，一般随结合的糖分子数的增加而加大。甙元的性质亦可影响甙的溶解度。如氰醇苷在水中易溶而黄酮甙就较难溶。苷元不溶于水，能溶于有机溶剂。 3． 苷键 的裂解 ：苷类易被稀酸或酶水解生成糖与甙元。但是有些植物体内原存在的甙中有数个糖分子，称为一级苷，水解时可先脱去部分糖分子生成含糖分子较少的次级苷，次级苷进一步水解得糖与甙元。苷类水解成甙元后，在水中的溶解度与疗效往往都大为降低，因此在采集、加工、贮藏与制造含甙类成分的中草药时，必须注意防止水解。例如在采集时尽量减少植物体的破碎,采集后尽快干燥，贮藏中保持干燥，提取时不要在水溶液或酸性溶液中长时间放置等。 4．天然产的苷类一般具有一定的光学活性，即 旋光性 ，大多为左旋性而无还原性。水解后由于生成还原糖，往往变为右旋性并具还原性。这一性质可用于中草药中甙类成分的检识。水解前后的还原性通常用Fehling试验来检查。 5． 检识 ：某些苷类如皂苷、黄酮苷等可与醋酸铅或碱式醋酸铅试剂生成沉淀，此沉淀脱铅后又可恢复成原来的苷类。此性质可用于苷类成分的提取。 分类 1、最常见是根据 苷元 的 结构类型 分为 氰苷 、酚苷、醇苷、蒽苷、 黄酮 苷、 皂苷 、 强心苷 、 香豆素 苷和 环烯醚萜 苷等； 2、根据糖的名称分葡萄糖苷、鼠李糖苷、三糖苷、芸香糖苷等； 3、根据糖的数目分为单糖苷、双糖苷、三糖苷等； 4、根据苷在生物体中是原存的还是次生的，分为原生苷与次生苷； 5、根据苷原子不同分为氧苷、硫苷、氮苷、碳苷，天然界中氧苷最为常见。 氧苷（O-苷） （1）醇苷（alcoholic glycosides）：苷元的醇羟基与糖端基羟基脱水而形成的苷。分布在藻类、毛茛科、杨柳科、景天科及豆科等植物中，如具有原样作用的红景天苷，抗菌杀虫作用的毛茛苷。龙胆苦苷，用于专门治疗黄疸型肝炎疾病。 （2）酚苷（phenolic glycosides）：苷元的酚羟基与糖结合的苷。主要存在于杜鹃花科、木犀科和芍药属、柳属、杨属、松属等植物中，如天麻中的镇静、镇痛有效成分天麻苷。其临床用于治疗肝阳上亢引起的头痛。 （3）氰苷（cyanogenic glycosides）：主要是指一类具有α-羟腈的苷。特点是易水解，尤其是有稀酸和酶催化时水解更快，生成的苷元α-羟腈很不稳定，立即分解成醛（或酮）和氢氰酸。主要分布于蔷薇科、毛茛科、忍冬科、豆科、亚麻科、大戟科和景天科等植物中。例如蔷薇科植物的成熟果实苦杏仁。小剂量有镇咳平喘的功效，但大剂量则会引起中毒的危险，应慎用。 （4）酯苷（ester glycosides）：苷元以羧基和糖的端基碳结合而成的苷，因具有酯键的性质，易为碱水解。例如山慈菇苷，具有抗真菌活性。 （5）吲哚苷 （indox-yl glycosides）：是由苷元吲哚醇中的羟基与糖缩合而成的苷。例如靛苷。 硫苷（S-苷） 糖端基羟基与苷元上的巯基缩合而成的苷，主要分布在十字花科植物中。例如萝卜苷、大蒜，有特殊气味。（含巯基化合物所特有的） 氮苷（N-苷） 糖端基碳与苷元上的氮原子相连的苷。如胞苷、巴豆苷。 碳苷(C-苷） 糖端基碳直接与苷元上碳原子相连的苷类。组成碳苷的苷元有黄酮类、蒽醌和没食子酸等。碳苷的形成是由苷元酚羟基所活化的邻位或对位的氢与糖的端基羟基脱水缩合而成。如牡荆素和异芒果苷。 药学作用 皂甙类成分能降低液体表面张力而产生泡沫，故可作为乳化剂。内服后能 消化道黏膜，反射地促进呼吸道和消化道粘液腺的分泌，故具祛痰止咳的功效，如桔梗、远志、紫菀常用作祛痰药。桑寄生、接骨木中的皂甙具祛风湿作用。人参皂甙具强壮、大补元气作用，并对某些病理状态的机体起双向调节作用或称适应原样作用。不少皂甙还有降胆固醇、抗炎、抑菌、免疫调节、兴奋或抑制中枢神经、抑制胃液分泌，杀 、杀软体动物等作用。有些甾体皂甙也有抗肿瘤、抗真菌、抑菌及降胆固醇作用，大量用作合成甾体激素的原料。

　　1 常用提取溶剂的分类与极性

　　1）分类：通常分三类：水类；亲水性有机溶剂；亲脂性有机溶剂。

　　2）极性大小：水(H2O)＞甲醇(MeOH)＞乙醇(EtOH)＞丙酮（Me2CO）＞正丁醇(n-BuOH)＞乙酸乙酯(EtOAc)＞乙醚(Et2O)＞氯仿(CHCl3 ) ＞苯（C6H6)＞四氯化碳(CCl4)＞正己烷≈石油醚(Petet)。

　　水类还包括酸水、碱水。

　　亲水性有机溶剂包括甲醇、乙醇、丙酮。

　　亲脂性有机溶剂为正丁醇后所有的。这三类溶剂间互溶情况：水和亲水性有机溶剂可互溶，水和亲脂性有机溶剂间不互溶，有机溶剂间除甲醇和石油醚不互溶外，其它均互溶。2提取溶剂的选择

　　1）提取溶剂的选择原则

　　（1）要对所提取成分溶解度大；对杂质溶解度小。

　　（2）要与所提取成分不起意外的化学变化。

　　（3）要廉价、易得、安全。其中（1）是最主要的。

　　2）提取溶剂的选择

　　（1）水：为极性最大的溶剂，也最常用。可溶解苷类、生物碱盐、糖类、蛋白质、氨基酸、鞣质、小分子有机酸、有机酸盐、亲水性色素、无机盐。其中蛋白质不溶于热水。

　　缺点：用水提取易酶解苷类成分，且易霉坏变质。某些含果胶、粘液质类成分的中草药，其水提取液常常很难过滤。沸水提取时，中草药中的淀粉可被糊化，而增加过滤的困难。故含淀粉量多的中草药，不宜磨成细粉后加水煎煮。

　　（2）亲水性的有机溶剂：以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比较好。亲水性的成分除蛋白质、粘液质、果胶、淀粉和部分多糖等外，大多能在乙醇中溶解。

　　优点：应用范围广，易过滤，不霉变，易浓缩回收。

　　缺点：价高、不安全，需回流设备。

　　（3）亲脂性的有机溶剂：这些溶剂的选择性能强，用于亲脂性成分的提取，如游离生物碱、苷元、挥发油等。

　　优点：提取专属性强，易回收浓缩。

　　缺点：价高、易燃、有毒，穿透性差；对设备要求高。

　A型题

　1属于甲基五碳糖的是

　AL一阿拉伯糖

　BD一葡萄糖

　CD一半乳糖

　DD一甘露糖

　EL一鼠李糖

　E

　2龙胆二糖的结构为

　AD一葡萄糖(1→3)D一葡萄糖

　8D一葡萄糖(1→2)D一葡萄糖

　CD一葡萄糖(1→4)D一葡萄糖

　DD一葡萄糖(1→6)D一葡萄糖

　ED一葡萄糖(1→4)L一鼠李糖

　D

　3芸香糖的组成是

　A2分子葡萄糖

　B2分子鼠李糖

　C1分子葡萄糖，l分子鼠李糖

　D1分子葡萄糖，l分子果糖

　E3分子葡萄糖

　C

　6根据苷原子分类，属于硫苷的是

　A山慈菇苷A

　B萝卜苷

　C巴豆苷

　D芦荟苷

　E天麻苷

　B

　7属于次生苷的是

　A红景天苷

　B野樱苷

　C苦杏仁苷

　D芦荟苷

　E天麻苷

　B

　8水解后可产生氢氰酸的是

　A巴豆苷

　B异垂盆草苷

　C垂盆草苷

　D苦杏仁苷

　E芥子苷

　D

　9在水和其他溶剂中溶解度都很小的苷是

　A氧苷

　B氮苷

　C硫苷

　D碳苷

　E酯苷

　D

　10最难被酸水解的是

　A碳苷

　B氮苷

　C氧苷

　D硫苷

　E氰苷

　A

　11酸水解速度最快的是

　A葡萄糖苷

　B鼠李糖苷

　C2-去氧糖苷

　D葡萄糖醛酸苷

　E阿拉伯糖苷

　C

　12水解碳苷常用的方法是

　A缓和酸水解

　B强烈酸水解

　C酶水解

　D碱水解

　E氧化开裂法

　E

　13下列有关苷键酸水解的论述，错误的是

　A呋哺糖苷比吡哺糖苷易水解

　B醛糖苷比酮糖苷易水解

　C去氧糖苷比羟基糖苷易水解

　D氮苷比硫苷易水解

　E酚苷比甾苷易水解

　B

　14麦芽糖酶能水解

　Aα一果糖苷键

　Bα一葡萄糖苷键

　Cβ一果糖苷键

　Dβ一葡萄糖苷键

　Eα一麦芽糖苷键

　B

　15在pH7时，用芥子苷酶水解芥子苷，得到

　A异硫氰酸酯、硫酸氢钾、糖

　B腈、硫黄、硫酸氢钾、糖

　C腈、硫黄

　D硫黄、硫酸氢钾、糖

　E腈、硫酸氢钾、糖

　A

　16某苷经Smith裂解，得到丙三醇，提示其结构中含有

　A葡萄糖

　B鼠李糖

　C木糖

　D夫糖

　E阿拉伯糖

　A

　17Smith裂解属于

　A缓和酸水解法

　B强烈酸水解法

　C碱水解法

　D氧化开裂法

　E盐酸一丙酮水解法

　D

　18提取苷类成分时，为抑制或破坏酶常加入一定量的

　A硫酸

　B酒石酸

　C碳酸钙

　D氢氧化钠

　E碳酸钠

　C

　19若提取药材中的原生苷，除了采用沸水提取外，还可以选用

　A热乙醇

　B氯仿

　C乙醚

　D冷水

　E酸水

　A

　20欲从中药材中提取双糖苷，一般可用

　A冷水缦渍

　B70%醇回流

　C苯回流

　D酸性乙醇寝渍

　E酸性乙醇回流

　B

　21用纸层析检识糖时，常不用的展开剂是

　A正丁醇一乙醇一水

　B正丁醇一乙酸一水

　C水饱和的苯酚

　D氯仿一甲醇

　E正丁醇一吡啶一水

　D

　27不能利用氢谱中糖的端基质子的偶合常数判断苷键构型的糖是

　AD-葡萄糖

　BD-半乳糖

　CD-木糖

　DL-鼠李糖

　ED-葡萄糖醛酸

　D

　28中药苦杏仁引起中毒的成分是

　A挥发油

　B蛋白质

　C苦杏仁酶

　D苦杏仁苷

　E脂肪油

　D

　29苦杏仁苷酶水解的最终产物包括

　A葡萄糖、氢氰酸、苯甲醛

　B龙胆二糖、氢氰酸、苯甲醛

　C野樱苷、葡萄糖

　D苯羟乙腈、葡萄糖

　E苯羟乙腈、龙胆二糖

　A

　30下列有关苦杏仁苷的分类，错误的是

　A双糖苷

　B原生苷

　C氰苷

　D氧苷

　E双糖链苷

　E

　32苦杏仁镇咳有效成分为苦杏仁苷水解产生的

　A龙胆二糖

　B野樱苷

　C苯甲醛

　D氢氰酸

　Eα-羟基苯乙腈

　D

　33B一葡萄糖苷键不具有的性质是

　ANMR中C1-H和C2-H的偶合常数值为6～8Hz

　BNMR中C1-H和C2-H的偶合常数值为3～4Hz

　CNMR中端基C的化学位移为l03～106

　DNMR中C1和H1的偶合常数值为l60Hz

　E能被杏仁苷酶水解

　B

　34应用离子交换树脂法分析检测糖时，一般将糖制备成

　A甲基化物

　B乙酰化物

　C硼酸络合物

　D三氟乙酰化物

　E三甲基硅醚化物

　C

　35利用13C-NMR中的苷化位移，可确定单糖之间的连接位置。通常，如果糖上有烷基或吸电子基取代，则

　Aα-碳原子向低场位移，β-碳原子向高场位移

　Bα-碳原子向高场位移，β-碳原子向低场位移

　Cα-碳原子向低场位移，β-碳原子向低场位移

　Dα-碳原子向高场位移，β-碳原子向高场位移

　Eα-碳原子不发生位移，β-碳原子向低场位移

　A

　36用于确定糖链连接顺序的方法不包括

　AFAB-MS

　BEl-MS

　CHMBC

　DNOE

　E2DNMR

　B

　B型题

　[1～4]

　Aglu

　Brha

　Cara

　Dgal

　Exyl

　1葡萄糖的简写为

　A

　2鼠李糖的简写为

　B

　3阿拉伯糖的简写为

　C

　4半乳糖的简写为

　D

　[5～8]

　A葡萄糖(1→6)葡萄糖

　B葡萄糖(1→2)葡萄糖

　C葡萄糖(1→4)葡萄糖

　D鼠李糖(1→2)葡萄糖

　E鼠李糖(1→6)葡萄糖

　5龙胆二糖的结构为

　A

　6芸香糖的结构为

　E

　7新橙皮糖的结构为

　D

　8槐糖的结构为

　B

　[9～l3]

　A葡萄糖醛酸苷

　B酚苷

　C碳苷

　D氨苷

　E氰昔

　9天麻苷属于

　B

　10苦杏仁苷属于

　E

　11芦荟苷属于

　C

　12巴豆苷属于

　D

　13黄芩苷属于

　A

　[19～23]

　A糖和糖连接顺序

　B糖的种类

　C糖和糖连接位置

　D苷键构型

　E糖的定量

　19缓和酸水解可用于确定

　A

　20乙酰解可用于确定

　A

　21酸水解后纸层析可用于确定

　B

　22全甲基化甲醇解可用于确定

　C

　23Klyne经验公式可用于确定

　D

　[24～27]

　A油脂

　B苷元

　C单糖苷

　D多糖苷

　E糖

　从中药乙醇提取物中萃取分离上述成分时

　24用石油醚萃取得到

　A

　25用乙醚萃取得到

　B

　26用乙酸乙酯萃取得到

　C

　27用正丁醇萃取得到

　D

　[28～31]

　A硝酸银试剂

　B三苯四氮唑盐试剂

　C苯胺-邻苯二甲酸盐试剂

　D3，5-二羟基甲苯-盐酸试剂

　E过碘酸-联胺试剂

　在糖的纸色谱中，常用上述显色试剂，其中

　28使还原糖显棕黑色的是

　A

　29使单糖和还原性低聚糖呈红色的是

　B

　30使酮糖呈红色的是

　D

　31使糖中有邻二羟基结构者呈蓝底白斑的是

　E

　[32～36]

　A芦荟苷

　B山慈菇苷A

　C龙胆苦苷

　D黑芥子苷

　E天麻苷

　32属于醇苷的化合物是

　C

　33属于碳苷的化合物是

　A

　34属于硫苷的化合物是

　D

　35属于酯苷的化合物是

　B

　36属于酚苷的`化合物是

　E

　[37～41]

　A七叶苷

　B大黄酸葡萄糖苷

　C黄芩苷

　D连翘苷

　E苦杏仁苷

　37属氰苷的是

　E

　38属木脂素苷的是

　D

　39属香豆素苷的是

　A

　40属黄酮苷的是

　C

　41属蒽酮苷的是

　B

　[42～46]

　A酸水解法

　B碱水解法

　C酶水解法

　DSmith降解法

　E温和酸水解法

　42获得苷中糖与糖连接顺序的信息可用

　E

　43水解人参皂苷R0，使其酯苷键断裂而醇苷键不断裂可用

　B

　44水解苦杏仁苷生成野樱苷可用

　C

　45水解碳苷可用

　D

　46水解紫花洋地黄苷A生成原苷元无需用

　E

　[47～51]

　A芸香糖

　B葡萄糖

　C鼠李糖

　D果糖

　E阿拉伯糖

　47属于五碳醛糖的是

　E

　48属于六碳醛糖的是

　B

　49属于甲基五碳醛糖的是

　C

　50属于六碳酮糖的是

　D

　51属于二糖的是

　A

　[52～56]

　A芦荟苷

　B番泻苷

　C紫草素

　D二氢丹参醌

　E丹参素

　52难于水解的苷是

　A

　53具有萘醌结构的是

　C

　54具有邻酚醌结构的是

　D

　55属于二蒽酮苷的是

　B

　56水溶性最好的是

　E

进行苷类酸水解操作，分离得到苷元成分：在稀酸性溶液中加入与水不相混溶的有机溶剂（例如苯），使水解产生的苷元立即进入有机相，避免苷元与酸长时间接触而遭到破坏。

苷键具有缩醛结构，在稀叚或稀碱的作用下，苷键可以发生断裂，水解成为苷元和糖。苷键的裂解是研究苷类组成和结构的重要方法。通过苷键的裂解反应将有助于了解苷元的结构、糖的种类和组成，确定苷庄与糖、糖与糖之间的连接方式。

原理

大黄为蓼科植物，味苦，性寒，具有泻热通肠、凉血解毒、逐瘀通经等功效。其主要有效成分为大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚等蒽醌类化合物 ，其中大部分为结合的蒽醌，少量为游离的蒽醌。结合的蒽醌类化合物由于其苷元具有酚羟基，故呈弱酸性，能溶于水、乙醇、碳酸氢钠溶液，但在有机溶剂中的溶解度很小。