常用的灭菌方法的原理是什么

（1）加热灭菌法

利用高温来杀死微生物（超过最高生长温度）的方法。加热灭菌的原理：当高温作用于微生物时，首先引起细胞内生理生化反应速率加快，机体内对温度敏感的物质如蛋白质、核酸等，随着温度的增高而遭受不可逆的破坏，尽而导致细胞内原生质体的变化、酶结构的破坏，从而使细胞失去了生活机能上的协调，停止了生长发育。随着高温的继续作用，细胞内原生质便发生凝固，酶结构完全破坏，活动消失，生化反应停止，渗透交换等新陈代谢活动消失，细胞死亡。加热灭菌可分干热灭菌和湿热灭菌两大类。

1）干热灭菌 利用灼烧或干热空气灭菌而没有饱和水蒸气参加的灭菌法称为干热灭菌法。由于干热灭菌使用方便，方法简单，故在生产上广泛应用。如火焰灭菌法：直接利用火焰把微生物烧死，故又称焚烧灭菌法。采用此法灭菌既彻底又迅速，但只适用于金属制的接种工具、试管口及污染物品等的处理。热空气灭菌法：即在电热恒温干燥箱中利用干热空气来灭菌。

2）湿热灭菌 即利用蒸汽进行灭菌的方法。湿热灭菌又分为高压、常压、间歇灭菌和巴氏灭菌4种。

①高压蒸汽灭菌 由于高压蒸汽具有较强的穿透力和较常压高的温度，能大大缩短灭菌时间，提高工作效率，加之蛋白质在湿热条件下容易变性，在热蒸汽条件下，细菌的芽孢在120℃，经20～30分钟可全部被杀死。如灭菌材料体积较大，不易被穿透时，可将压力增加到0152兆帕，延长至1～2小时。在高压蒸汽灭菌中，灭菌温度随蒸汽压力的增加而升高（图2-6）。

图2-6 高压蒸汽灭菌锅

在使用高压灭菌锅时，要完全排出锅内的空气而以饱和蒸汽代之。如果空气不排除干净，则锅内温度将低于同样压力下由纯饱和蒸汽产生的温度，影响灭菌效果。

此法适用于各种耐热物品的灭菌，如一般培养基、生理盐水等各种溶液、玻璃器皿、工作服等。所采用的蒸汽压力与时间，应根据待灭菌物品的性质、体积与容器类型等决定。

②常压蒸汽灭菌 这是采用自然压力、100℃蒸汽进行灭菌的方法。它设备简单、成本低，当前使用最广泛。只要砌一个炉灶，买1～2只大锅，上面用砖和水泥砌成，也可用大铁桶、木桶等，体积大小可自行决定，但不宜过大，以装800～1500瓶为好。设计常压灶时应注意的问题：大小根据生产规模来定，灶顶部最好制成拱圆形，这样冷凝水可沿灶的内壁下流而不会打湿棉塞；灶仓内要有层架结构，以便分层装入灭菌物；灶上应安装温度计，可随时观察灶内温度的变化；因灭菌时间长，锅内水不够蒸发，故容量大的灶要安装加水装置；灶仓的密闭程度要尽可能高，这样既提高灭菌效果，又节省燃料。菇农在生产中还常用一种小型蒸汽发生装置，引出蒸汽后直接通到下边用木条堑起、四周用多层塑料布密封的菌袋堆中进行常压灭菌。这种方法不用建灶，简便省工（图2-7）。常压灭菌一般水烧开后保持8～10小时，闷一夜即可。

图2-7 简易常压灭菌法

③常压间歇蒸汽灭菌法 这是利用常压蒸汽反复几次灭菌的方法。具体做法是将待灭菌物品放在锅内，100℃处理1小时左右，杀死微生物的营养细胞，让其冷却至30℃左右，此时芽胞会萌发，再以同样方法加热处理，反复3次，可达到灭菌目的。该方法可用于不耐高温的药品、营养物、特殊培养基的灭菌。

④低温巴氏灭菌法 即在60～70℃下，经一定时间，杀死有害微生物的方法。适应于不耐高温的物品消毒。有些培养基，在高温下遭到破坏，用此法既可杀死致病微生物的营养体，又能使培养基的成分不致受到严重破坏。食用菌生产中培养料堆积发酵工艺，就是利用这个原理杀死其中的病虫、杂菌。

（2）过滤除菌法

又分液体过滤和空气过滤两种，就是采用机械的方法，设计一种滤孔比细菌还小的筛子，做成各种过滤器，通过机械过滤，只让液体培养基或空气从筛孔流出，各种微生物菌体则留在筛子上，从而达到除菌的目的。这种方法适用于对热不稳定的体积小的液体培养基（如动物血清、蛋白质、酶、维生素等）及气体的灭菌。超净工作台的工作原理就是将带菌空气通过过滤灭菌形成无菌空气，从风洞中吹出，来造成工作台范围的无菌状态。过滤灭菌的最大优点是不破坏培养基中各种物质的化学成分。常用的过滤器有用硅藻土制的、石棉制的、陶瓷土制的，也有用火棉胶、硝化纤维素滤膜制成的。

（3）辐射灭菌法

利用辐射产生的能量进行杀菌的方法称辐射灭菌。辐射可分电离辐射和非电离辐射两种，α-射线、β-射线、γ-射线、X-射线、中子和质子、微波等属电离辐射，紫外线、臭氧、日光为非电离辐射。

1）紫外线灭菌 紫外线杀菌的原理是利用紫外线的辐射作用。用灯管直接照射细菌使其发生光化学反应，将细菌细胞质诱导形成胸腺嘧啶双聚体，从而抑制DNA的复制而发生变性、致死。另一方面，空气在紫外线照射下产生的臭氧（O3），也具有一定的杀菌作用。紫外线的有效作用距离为12～20米。紫外灯一般悬吊在接种室或培养室的上方，个数依房间大小而定，容1～2个人操作的接种室，安装一个30瓦的紫外灯就可以了。在每次接种前，应将所需的器具一起放入接种室（箱）内，然后打开紫外灯照射。如果接种室体积较大，开灯照射2小时才能达到灭菌效果；如果较小，只需开灯半小时左右既可达到灭菌效果。由于紫外线穿透力弱，即使是普通玻璃也不能滤过，因此，只适于空气或物体表面的灭菌。紫外线对人体皮肤，尤其是眼睛有杀伤作用，应避免直视，工作时应将紫外灯关闭。紫外线消毒时工作场所如果处在稍暗无光的情况下，能提高杀菌效果。细菌接受致死量紫外线照射后，随即给予可见光照射，部分细菌有复活的可能。干细胞比湿细胞对紫外线的抗性强，孢子比其营养细胞对紫外线更具抗性。

2）微波灭菌 由于微生物的细胞中都含有70%～90%的水分，水分子在微波电场中被极化，并随着电场方向的改变而转动，在转动过程中分子之间高速度摩擦产生热能，这种热能不同于外部加热，可在短时间里使细胞爆破而物体本身的温度却只有极微增加，从而达到灭菌效果。用YM7601型微波炉只需60秒钟就能杀死食品中192万个大肠杆菌。

3）臭氧发生器消毒 臭氧（O3）具有强烈的氧化作用，能破坏微生物的细胞膜与核酸。O3也是一种暂态物质，常温下能自然分解，还原成氧。其灭菌原理实际上和紫外线消毒极相似。

蓝月亮衣领净有消毒的成分。蓝月亮衣领净有杀菌作用，蓝月亮衣领净中含有广谱杀菌物质PCMX，破坏细菌的酶系统，使细菌失活，导致代谢过程的破坏，杀死细菌，杀菌率达到99．999％，可以消毒。

车内可用84消毒液消毒，但必须按1:200的比例稀释。必须注意的是，汽车内饰可以稀释后擦拭，使用84消毒液时，车主最好戴上橡胶手套，以免被84消毒液腐蚀。也可以在擦拭车内时打开车门，擦拭后通风一段时间，消除异味。

消毒剂84是我们日常生活中常见的消毒剂。其主要成分是次氯酸钠，消毒作用强，漂白作用明显。对于84消毒液，车主如果要擦拭车内，首先要按照84消毒液包装上的稀释比例，用水混合稀释。84消毒液如果稀释不正确，用清水混合的溶液会有一定的腐蚀性，对汽车内饰造成损伤。用未稀释的84消毒液擦拭汽车内饰时，内饰会出现白色斑驳，对于一些金属内饰的车辆，内饰会褪色或氧化。

汽车消毒介绍

1汽车臭氧消毒：利用车内空调循环系统完成臭氧消毒。使用专用消毒剂进入循环系统，可以去除车内异味，对胺类、尼古丁、细菌等有一定的消毒作用。2化学消毒：化学消毒是指使用消毒剂，如过氧乙酸、来苏儿、84消毒液等，对车内经常见到的部位，如门把手、方向盘等进行擦拭和清洁。也能起到一定的消毒作用。

3光触媒消毒：所谓光触媒消毒，就是光触媒涂层与阳光发生反应，快速分解车内有害物质。这种方法也可以净化空气。

百万购车补贴

氯精灵消毒卡主要成分是“灭菌剂”二氧化氯，（区别于传统包裹杀毒）二氧化氯分子进入致病菌体内破坏蛋白组织，破坏致病菌并转化为水，二氧化氯是国际上公认的高效、安全、环保的消毒灭菌剂。在空气净化类产品中，应用率、普遍率都非常高！

目前常用的消毒药有以下几种：

（1）生石灰又称氧化钙，是淡水养殖中最经济易得、操作方便且效果好的环境消毒药。

作用与药理生石灰在鳖病防治中有两种作用：

①直接作用：生石灰在鳖池中遇水变成氢氧化钙。首先是增加温度，使一些病原菌在突然上升的高温中死亡；其次是生石灰分解后能迅速提高池中的pH，当pH提高到11以上时，能破坏病原菌的酶系统，使病原菌的蛋白质凝固，起到直接杀死病原体的作用。通过试验表明，当鳖池pH值提高到11以上时，2小时后检测，除鳖以外，几乎所有的生物都被杀死。

②间接作用。生石灰有改善水质，为养殖水体提供营养元素的作用。使水体变肥，促进水中增氧的浮游植物生长。此外，它还有缓冲pH作用，使水体的pH保持稳定，给鳖创造一个适宜生长的良好环境。所以，生石灰在鳖病防治中，既是清塘消毒又是改善生态环境的良药。

应用方法应用生石灰清塘可采取干法。即用生石灰每平方米05～1千克的量打成小细块遍撒，然后放水10～15厘米任其分解，第二天再用铁耙耙一遍，使其充分分解，就可起到消毒的作用。调节水质时，可把生石灰化成石灰水泼洒。用量要视当时鳖池pH情况酌用，应注意的是应用时应做好身体的防护，以免化石灰时灼伤身体。

（2）三氯异氰尿酸为白色结晶粉，有很强的氯臭，含有效氯在85%，遇酸或碱易分解，是一种极强的氯化剂和氧化剂。

作用与药理三氯异氢尿酸对细菌、病毒、真菌、芽孢和一些虫卵有杀灭作用，是一种高效、广谱、较安全的消毒药物，多应用于养殖场的环境、用具和池塘消毒。

应用方法用市售制品4/10000浓度溶液泼洒，用于环境和用具消毒。水体呈5～10毫克/升的浓度，进行带水清塘。用呈池水03～04毫克/升浓度全池泼洒，预防室外养殖池塘养殖期的龟鳖疾病。

（3）二氧化氯合剂无色、无臭、无味，是一种强消毒剂。

作用与药理二氧化氯的作用机理是，药物释放出新生态氧及亚氯酸根离子，渗透至病原微生物内部，使蛋白质中氨基酸氧化分解，破坏病原微生物的酶系统，从而达到迅速杀灭细菌和病毒的作用。二氧化氯主要用来环境消毒和池塘池水消毒。应用方法由于目前二氧化氯的制品较多，且各种制品的特性有很大差异，所以用时要严格按所购产品的说明应用。

（4）氯化钠也叫食盐，是鱼类常用的体表消毒药。用盐消毒不但成本低，操作方便，易购买，也无太大的副作用。

作用与药理盐的杀菌机理是利用高渗透作用，破坏病原体细胞而致病原体死亡。

应用方法一般对鳖体表消毒一定要严格控制浓度与时间。通常规格3～5克的鳖苗消毒浓度为1%，200克左右的鳖种为2%的浓度，亲鳖为3%的浓度，消毒时间为5分钟。

（5）碘伏碘与表面活性剂的不定型结合物叫碘伏。

作用与药理表面活性剂起载体与助溶的作用。碘伏的杀菌作用是，包括表面活性剂和碘的作用。碘与表面活性剂结合成碘伏后，改变了溶液的湿润性，并能协助碘伏穿透有机物的能力，乳化脂肪沉淀物，所以碘伏能在有效浓度的时间内杀死细菌、真菌和病毒。

应用方法碘伏的应用可在室内环境、水体、用具等进行消毒。碘伏的应用优点是无异味，刺激性小，稳定性好。即使在室温下（25℃）贮存几个月，有效碘的降低也不会太明显，对人和养殖对象的毒性较低，且不会过敏。碘伏的应用一般在室内环境为1／40000浓度的消毒水喷洒，如用于水体消毒，一般每立方米水体8～10克，作用10分钟就可达到消毒目的。

（6）高锰酸钾一种强氧化剂外用消毒药物。其具有抗细菌和真菌的作用，这种药物不但易购买，使用也方便，副作用也较小。

应用与药理高锰酸钾主要应用于皮肤或黏膜的消毒，也可用于一些鲜活青饲料的消毒。高锰酸钾外观是暗紫色，具有金属光泽，菱形片状晶体，在干燥不暴露空气时，稳定性能良好，故可在室温下长期保存，但它的水溶液如果暴露在空气中则不稳定。因此，应用水溶液时要现配现用。高锰酸钾的杀菌机理和杀菌力是，因它能氧化微生物体内的活性基而致微生物死亡。此外，高锰酸钾还能有效地杀死各种病毒。一般以1∶10000的比例溶液经过半小时接触，即能破坏病毒的传染性。影响高锰酸钾消毒效果的主要因素为有机物、碘化物和还原剂，后两者可使高锰酸钾失去杀菌能力。所以，在消毒环境中如有机物浓度越高，则效果越差。此外，温度对高锰酸钾的影响也较明显。一般温度越高，作用越强，反之亦然。

应用方法在鳖病防治中，高锰酸钾可作为鳖种、亲鳖体消毒药。应用浓度为001%，使用时间视温度情况约1～2分钟之间。

高锰酸钾也可治疗50克以上鳖种的水霉病，应用方法是，先把原池水换成10厘米深的干净水，然后用每立方米20克药化好后泼洒，10分钟后在把水注到标准水位。也可把病鳖捞出，用同样浓度的药水浸泡10分钟后放回池中。

值得注意的是，高锰酸钾溶液即使是低浓度也不可用来给3～5克规格的鳖苗消毒。因高锰酸钾易氧化破坏鳖苗体表的一层保护膜，从而使鳖苗易染真菌病而引发死亡。