步骤2的受体细胞是小鼠es细胞，es细胞一般从囊胚的什么分离得到

小鼠ES细胞　　小鼠ES细胞的分离方法基本成熟，且已广泛应用于生命科学研究的各个领域。1981年Evans首次分离得到小鼠ES细胞，他以手术切除受精后25d小鼠卵巢并结合激素注射干扰子宫环境，从而使胚胎延迟着床，再回收胚胎，将其体外培养于STO细胞饲养层上，结果得到了小鼠ES细胞系。MartinGR以免疫外科法剥离小鼠囊胚滋养层细胞，得到内细胞团(ICM)并将其置于STO细胞饲养层上，培养基为小鼠PSA-1ES细胞条件培养基，结果也得到小鼠ES细胞。此后，Axelord等用微滴法得到小鼠ES细胞系；Kaufman等用单倍体延迟着床小鼠囊胚建立同源二倍体ES细胞系；Wobus等首次用原代小鼠成纤维细胞作饲养层建立了小鼠ES细胞系；Smith等首次使用大鼠肝细胞条件培养基作为分化抑制物建立了小鼠ES细胞系。BrookFA等进一步完善了小鼠ES细胞的分离方法，以致从许多品系小鼠包括近交系和突变系，都可获得ES细胞。体细胞核移植分离小鼠ES细胞并非只能从囊胚，也并非必须依赖饲养层细胞。Dhhaise等将52枚8-细胞小鼠胚胎消化成单个分裂球并培养于小鼠原代成纤维细胞饲养层上，所用培养基为DMEM/F12，并添加100mL/L的胎牛血清、100mL/L的新生犊牛血清和01mmol/L的2-巯基乙醇，5天后，出现多个干细胞集落，消化传代后建立了一个ES细胞系MSB1。将MSB1注入SCID(severecombinedimmunodeficientmice)小鼠，能产生包含三胚层分化物的畸胎瘤，注入52枚囊胚产生了2个活的个体(1雄，1雌)，但雄性个体无生殖能力。Tojo等用同样方法从杂交小鼠(C57BL/6×DBA/2)8-细胞胚也得到了ES细胞。小鼠ES细胞具有无限增殖的自我更新能力。SudaY等将小鼠ES细胞传250代以上没有出现转化的迹象，它们仍具有正常的二倍体核型；在生殖系嵌合体中能产生正常的配子；作为核供体能重组克隆胚胎。上述结果表明小鼠ES细胞是永生性的。大鼠ES细胞　　IannacconePM等从大鼠PVG近交系分离克隆大鼠ES细胞系-RESC-01，该细胞系对SSEA-1和AKP呈阳性，在大鼠胎儿成纤维细胞饲养层上能很好的增殖，在体内环境能分化形成多种细胞类型。RESC-01细胞系在体外悬浮培养时形成的胚体出现有节律的收缩运动，将其注入囊胚并移植假孕母鼠能生成嵌合体。Kawase等也利用大鼠胎儿成纤维细胞做饲养层，从DA大鼠品系分离建立了RES-DA1ES细胞系，它与小鼠ES细胞形态相似，表达AKP和4C9抗原。Brenin等也用不同的方法分离得到了ES细胞。Sun等以大鼠ES细胞为核供体，得到了核移植后代。Vassilieva等发现大鼠ES细胞表达SSEA-1、Oct-4和IL-6等细胞标记。猪ES细胞　　PiedrahitaJA等采用STO、猪成纤维细胞和猪子宫上皮细胞作为饲养层，以DMEM为基础培养液，从猪囊胚ICM分离ES细胞，发现猪囊胚ICM在STO或PMEF饲养层上可以附着增殖，而在猪胎儿成纤维细胞饲养层上虽可附着但增殖甚微，传不过4代即发生死亡。Evans等将6天～7天猪囊胚直接培养于STO饲养层上，挑出ICM细胞经增殖传代培养建立了猪ES细胞系。StrojekRM等认为分离猪ES细胞的最适胚胎为第10天囊胚。研究表明，6日龄～7日龄胚胎在培养过程中极易发生死亡，IC胚胎干细胞研究(16张)M克隆获得率极低，而第10天的胚胎容易培养，ICM克隆获得率较高，但细胞易于分化。Vasil’evIM等研究了胚胎发育阶段、培养基种类、饲养层细胞等影响猪ES细胞分离的因素，结果表明不同发育阶段的附植前囊胚是影响猪ES细胞分离的限制性因素。WheelerMB等报道猪ES细胞能形成正常的嵌合体和包含三胚层分化物的囊状胚体，在维甲酸和DMSO的作用下，猪ES细胞能分化形成上皮细胞、肌肉细胞、脂肪细胞、成纤维细胞等，Miyoshi等从体外授精囊胚分离得到猪ES细胞，并以类ES细胞为核供体，获得了核移植囊胚。国内关于猪ES细胞分离克隆的研究相对较少，李松等分离得到猪ES细胞并传至第2代，在此基础上，徐军等将猪ES细胞传至3代，冯秀亮等将猪ES细胞传至5代，冯书堂等也分离得到猪ES细胞，同时对所分离的细胞进行了初步检测和鉴定，证明其具有多能性。牛ES细胞　　Saito等在加有LIF的培养基中对牛ICM进行培养，分离得到牛ES细胞并进行传代。Sims等使用与一般ES细胞分离完全不同的低密度培养法，使用BRL(buffaloratliver)条件培养基并添加亚硒酸钠、胰岛素、运铁蛋白和50mL/L胎牛血清，培养6d～10d，得到15个ES细胞系，将其作为核供体进行核移植得到659枚重构胚，卵裂率70%，囊胚率24%，将其中34枚胚胎移植27头假孕母体，13头妊娠，最后生出4头犊牛。而SticeSL等报道，以牛ES细胞为核供体建立的重组胚在移植受体后虽然会出现妊娠现象，但妊娠时间不超过60天，主要是因为胎盘畸形发育，包括缺乏子叶以及子宫阜出血反应。若将重组胚与正常8-细胞胚嵌合，则该嵌合胚可发育至85天，胎儿同样缺乏子叶，DNA分析证实50%的嵌合体胎儿组织来源于ES细胞。Ito等分析比较了牛体内和体外培养的桑椹胚分裂球和囊胚ICM分离ES细胞的效果，结果仅在囊胚组获得了类ES细胞。Cibelli等由49枚7日龄牛胚胎ICM分离到27个ES细胞系，用注射法将β-半乳糖苷酶基因导入ES细胞，选择转染的ES细胞注入8-细胞～16-细胞牛胚，其中18枚胚胎移植7头受体，妊娠5周后，得到12个胎儿。对胎儿进行检测，6个胎儿分别在生殖腺或原始生殖细胞(PGCs)中检测到标记基因，表明ES细胞参与生殖系嵌合。Cibelli等建立应用牛胎儿成纤维细胞核移植生产转基因牛类ES细胞的方法，得到6头嵌合体。Mitalipova等自致密桑椹胚分离牛ES细胞，最高一株ES细胞传至150代，且表达SSEA-1、SSEA-3、SSEA-4和c-kit受体。羊ES细胞　　Handyside等以绵羊皮肤成纤维细胞和胎儿成纤维细胞作饲养层，从7日龄～8日龄绵羊囊胚分离类ES细胞，结果得到内胚层样细胞而无ES细胞出现。Tsuchiya用免疫外科法分离8d～9d绵羊囊胚ICM，培养于STO细胞饲养层上，得到2个类ES细胞系，传至4代。Tillmann等用胎牛肝成纤维细胞作饲养层分离得到传至20代的绵羊类ES细胞和40代的山羊类ES细胞。Modinski等将绵羊ES细胞与囊胚嵌合得到2只嵌合体绵羊。Campbell等用第1代～第3代的类ES细胞作核供体进行核移植，得到了4只绵羊。兔ES细胞　　GravesKH等从兔子附植前囊胚分离得到ES细胞，并进行了初步鉴定，证明它们具有在饲养层上保持未分化状态的增殖能力，体外传代培养1年以上，仍具有正常的核型，且能形成包含三胚层分化物的胚体。之后，Niemann等以PMEF为饲养层，建立了9个兔ES细胞系。SchoonjansL等将兔ES细胞注入囊胚获得了包括生殖系在内的嵌合体兔子。陈颖等以PMEF为饲养层培养兔分割囊胚，结果得到传至7代的兔ES细胞，将第2代的兔ES细胞与囊胚进行嵌合，得到1只皮毛嵌合体仔兔，但未证实ES细胞是否参与了生殖系嵌合。

《论语•为政》有言，“吾十有五而志于学，三十而立，四十而不惑，五十而知天命……”历经50年，本应该心态淡然，谋事在人，成事在天，而普乐之声的50载早已成就满满，仍然不竭余力地研究新技术，开拓新市场，从马里兰州巴尔的摩一间旧式公寓的车库开始起步到如今的世界工厂，从三位热爱摇滚乐的约翰霍普金斯大学毕业生到如今的高水平科研团队，取得的专利就超过65项，每一项专利技术都为音箱带来了很大的改善。

普乐之声是一家美国音响产品制造公司，拥有完整的生产链，从原材料的筛选开发，到喇叭单元的设计生产，再到音箱的设计生产组装，普乐之声能完成一条龙的服务，拥有着丰富的经验和完整的体系，定位中高端音频市场。同时，普乐之声在业界荣获无数大奖比如Hi-Fi Choice杂志颁发的HiFi Choice编辑推荐奖等众多行业内高度认可的奖项。如今归属成立于2012年Sound United集团门下，Sound United是全球最大的音响投资公司之一，该集团除了Polk Audio普乐之声外还拥有多个传奇音响品牌，如Bowers & Wilkins宝华韦健、Denon天龙、Marantz马兰士、Definitive Technology狄分尼提、还有HEOS和Boston Acoustics波士顿声学，每个品牌都提供了独特的解决方案，强强联手，让Hi-Fi和家庭 娱乐 真正的“声”临其境，Sound United不断地诠释着“将音乐的欢乐带给全世界”的企业使命。

纵观普乐之声发展历程，1972年Monitor 10、1981年SDA CRS、1988年SDA CRS、1999年LSi、2007年RTiA、2011年LSiM、2019年legend、2021年全新系列Reserve/Monitor XT/Signature Elite，2021年三大系列发布，众多新产品亮相，是普乐之声井喷式的一年，其中全新普乐之声Signature Elite系列音箱的音质更清晰透明，高动态，低失真，是音乐、 游戏 、影视再现的理想音响设备，正如普乐之声总裁Frank Sterns所言，“Signature Elite以最大限度地提升高保真音频功能，为音乐和**爱好者们打造影院级的震撼体验”。Signature Elite系列包含三款落地式扬声器、两个中置声道扬声器(全尺寸纤薄型)、两款书架式扬声器以及壁挂式环绕声扬声器系列包括了ES 60、ES 55、ES 50、ES 30、ES 20等不同型号。

单从外观看，普乐之声Signature Elite ES 20算得上是大尺寸无源书架箱，高宽深尺寸达3759 mm 2159 mm 3505 mm，重量达到77 Kg之重，箱体采用坚固的Medite MDF板制造，历经反复打磨抛光并通过多种激光测振仪测试，小心加固确保最佳支撑力和临界阻尼，能有效控制箱体谐振，抑制箱体内部有害驻波，减轻听觉干扰，更能还原现场。在颜色上，ES 20音箱有尊贵，稳重，大气的黑色及高贵，典雅，大方的棕色两种胡桃木饰面可供选择，曲边设计圆润而厚重，造型精美现代，完美融入各种家装风格，令人沉迷。同时ES 20已获得Hi-Res Audio认证，除了适合搭配功放或接收器，黑胶唱机、CD机或具有杜比全景声或DTS:X环绕声的AVR播放外，也适用于播放Apple music、Tidal、Amazon music HD、Qobuz和Spotify HiFi等高保真流媒体音乐和超高清**的原声。在技术上，普乐之声有能解决单元共振引起失真的动态平衡声阵列（Dynamic Balance Array）与相位优化的精密分频器、有通过增大表面积，消除湍流和失真并将音箱倒相孔的气流顺畅地引入聆听区域的Power Port “水滴导流”技术、有能消除内部声道有害串音干扰增强三维声场的SDA技术、有采用计算机建模实现高精度，声波干扰最小化，沉浸音乐忘乎箱体的可拆卸式抗衍射磁栅等等，自身的本事自身强，这就是普乐之声经久不衰的真正砝码。

杂志社试音室最近可参考的设备还真不少，就功放而言，论价格个个都是ES 20的好几倍，甚至十几倍，但是价格亲民的器材就不是好器材了吗？没有这个说法，恰恰是和高端的前端器材搭配才能更好展现ES 20的真正实力。音源采用马兰士Marantz SA-KI Ruby SACD红宝石签名版和艾美数字播放器，搭配韩国奥立ALLNIC T-1800 MK2电子管合并功放，而搭配的脚架是比ES20还贵的悦牌特别定制四柱通用版脚架，好脚架是书架箱的半条命。中国著名小号演奏家欧翠峰的《中国第一小号》专辑中的《叶塞尼亚主题音乐》，这是笔者非常喜欢的一首曲子，ES 20在杂志社已经煲过一段时间，之前我们也在不同前端系统上听过，没想到只隔了七八天没听，这次特意为ES 20搭配的系统上一开声就带给了我不小的震撼，经过精心摆位调整后的舞台感活灵活现，委婉动人又清脆明亮的小号在我前方响起，那缓慢的节奏带有一丝丝忧郁的同时，不是消沉沮丧，而好像行走在漆黑的路前始终有一束光在闪烁，时时刻刻带动着自己的情绪，带领内心走向深处。ES 20做到了，我甚至忘记了它的存在，一个好的器材不是刻意地去评判它的某某指标，而是一发声就直接能判断出这是对的声音，听一首由Torsten Nilsson指挥The Stockholm Cathedral Choir合唱团的《Now the Green Blade Riseth》（《麦田之歌（黄教堂）》），这是一张新圣咏形式合唱的宗教音乐，在教堂录音，有着宽阔深远的声场，丰富的残响也是一大特点，在ES 20的加持下，听第二首《When He Comes》，前奏的长笛增加了轻快的气氛，干净明亮的声音在管风琴下展开，单纯声线加上极具感染力的旋律，就能让整个人放松下来，仿佛涓涓细流在山间流淌，声场宽大，声音清脆，辨识度分离度都很好，没有大起大落的动态，也没有过多的技巧，但整个试音间却安静祥和，听音乐本就是轻松的，不需要有神圣的使命，音乐可以调节自己的情绪，是一味良药。

《2020/21原音精选》UPM版是由雨果唱片易有伍老师母带制作的一张非常不错的CD试音碟，第六首是由滚石唱片提供版权的陈淑桦《梦醒时分》，这是一首台湾唱片工业史上首张销量破百万专辑《跟你说听你说》的主打歌曲，也是李宗盛为陈淑桦量身定制的精彩作品，在ES 20的播放下，结像定位准确，陈淑桦的声音清澈动人，唱功扎实感人，与乐器的配合有层次感，温暖慰藉的声音充满整个试音间，瞬间回到童年时听到这曲的感动。而第十三首《初次尝到寂寞》是易有伍老师第一次与黄红英合作的录音，录制于二十年前，易有伍老师对钢琴的素质要求很高，当时特别选择拥有一台状态极佳的Concert Grand Model D大三角琴的上音录音棚来录音，武亦文精彩的即兴钢琴与黄红英张口即来的“邓丽君”风范，两人初次磨合即巅峰状态，虽然后面又录了几次这个初次磨合的版本最佳，这首《初次尝到寂寞》几乎是人手一张的测试碟了，在ES 20上能将斯坦威大D三角钢琴的能量感和形体质感、清朗铿锵的中高音区、黄红英的人声音色、透明度、都表现得非常优美。而由龙源音乐出品李小沛老师经典录音的《鼓王》中的《夜深沉》，是经典之作，对ES 20这么一对亲民价的书架箱测试鼓声是有点苛刻，但既然是音箱，高中低频和谐平衡是最起码的要求，笔者对ES 20是充满信心的，放了《夜深沉》果然没有失望，前面一段鼓声动态十足，低音很有弹性，扎实厚重下潜很好，随后愈来愈快的节奏调动着我身上的每一个细胞，京胡、京二胡声音清亮透明而不刺激，大录音棚现场的空间感的还原ES 20可圈可点，对于一套售价仅有千元的书架箱而言，值！

普乐之声Signature Elite ES 20是一款性价比极高的无源书架箱，区区数千元就能听到这样的声音实属难得，同时适用Hi-Fi和家庭影院，一举两得，不用来回切换选择自由方便，播放声音均衡、还原度高、声场宽广，人声和乐器有立体感并有一定的层次，没有压迫感很耐听，假如对于音乐细节不是过于苛刻，亦或是对大编制古典乐不是过于情有独钟的话，ES 20对民乐、人声、爵士、古典的播放来说都可以满足，尤其是对于一些预算不是很足或是刚入门发烧圈的朋友来说，ES 20是一款可遇而不可求的好产品，不仅有大厂风范，整体声音表现来说，市面同价位的箱子难有出其右者。

——END——

elasticsearchyml 服务配置文件

参数：

配置es的集群名称，默认是elasticsearch，es会自动发现在同一网段下的es，如果在同一网段下有多个集群，就可以用这个属性来区分不同的集群。

设置默认索引分片个数，默认为5片。Since elasticsearch 5x index level settings can NOT be set on the nodes configuration like the elasticsearchyaml, in system properties or command line argumentsIn order to upgrade all indices the settings must be updated via the /${index}/_settings API Unless all settings are dynamic all indices must be closed

in order to apply the upgradeIndices created in the future should use index templates

to set default values

Please ensure all required values are updated on all indices by executing:

curl -XPUT ' http://localhost:9200/_all/_settingspreserve_existing=true ' -d '{

"indexnumber_of_replicas" : "1",

"indexnumber_of_shards" : "7"

}'

设置默认索引副本个数，默认为1个副本。 5X版本以上不支持在配置文件里面配置。

节点名，默认随机指定一个name列表中名字，该列表在es的jar包中config文件夹里nametxt文件中，其中有很多作者添加的有趣名字。

指定该节点是否有资格被选举成为node，默认是true，es是默认集群中的第一台机器为master，如果这台机挂了就会重新选举master。

指定该节点是否存储索引数据，默认为trues

禁止自动创建索引

这个设置使删除只限于特定名称指向的数据，而不允许通过指定_all 或通配符来删除指定索引库。

设置配置文件的存储路径，默认是es根目录下的config文件夹。

设置索引数据的存储路径，默认是es根目录下的data文件夹，可以设置多个存储路径，用逗号隔开，例：

pathdata:/path/to/data1,/path/to/data2

设置临时文件的存储路径，默认是es根目录下的work文件夹。

设置日志文件的存储路径，默认是es根目录下的logs文件夹

设置插件的存放路径，默认是es根目录下的plugins文件夹

设置为true来锁住内存。因为当jvm开始swapping时es的效率会降低，所以要保证它不swap，可以把ES_MIN_MEM和ES_MAX_MEM两个环境变量设置成同一个值，并且保证机器有足够的内存分配给es。同时也要允许elasticsearch的进程可以锁住内存，Linux下可以通过 ulimit-l unlimited 命令。

设置绑定的ip地址，可以是ipv4或ipv6的，默认为0000。

设置其它节点和该节点交互的ip地址，如果不设置它会自动判断，值必须是个真实的ip地址。

这个参数是用来同时设置bind_host和publish_host上面两个参数。

设置节点间交互的tcp端口，默认是9300。

设置是否压缩tcp传输时的数据，默认为false，不压缩。

设置对外服务的http端口，默认为9200。

设置内容的最大容量，默认100mb

是否使用http协议对外提供服务，默认为true，开启。

gateway的类型，默认为local即为本地文件系统，可以设置为本地文件系统，分布式文件系统，Hadoop的HDFS，和amazon的s3服务器，其它文件系统的设置方法下次再详细说。

设置这个集群中节点的数量，默认为2，一旦这N个节点启动，就会立即进行数据恢复。

预期在群集中的主节点数。一旦预期的主节点数加入集群，就会开始恢复本地分片。默认为0

预期在群集中的数据节点数。一旦预期数量的节点已加入群集，就会启动本地分片的恢复。默认为0

如果未达到预期的节点数，则恢复过程将等待配置的时间量，然后再尝试恢复。

设置初始化数据恢复进程的超时时间，默认是5分钟。

如果recover_after_time 持续时间超时，只要满足以下条件，恢复就会开始：

设置集群中N个节点启动时进行数据恢复，默认为1。意味着至少有一个节点，该集群才可用。

只要此许多数据或主节点已加入群集，即可恢复。

只要这么多主节点已加入群集，就可以恢复。

只要这么多数据节点已加入群集，就可以恢复。

初始化数据恢复时，并发恢复线程的个数，默认为4。

添加删除节点或负载均衡时并发恢复线程的个数，默认为4。

设置数据恢复时限制的带宽，如入100mb，默认为0，即无限制。

设置这个参数来限制从其它分片恢复数据时最大同时打开并发流的个数，默认为5。

设置这个参数来保证集群中的节点可以知道其它N个有master资格的节点。默认为1，对于大的集群来说，可以设置大一点的值（2-4）

设置集群中自动发现其它节点时ping连接超时时间，默认为3秒，对于比较差的网络环境可以高点的值来防止自动发现时出错。

设置是否打开多播发现节点，默认是true。

设置集群中master节点的初始列表，可以通过这些节点来自动发现新加入集群的节点

项目管理中项目进度: WS=>ES=> CS=> MP

WS是Working Sample 产品功能性验证

ES是 Engineering Sample 制造质量验证评估

CS是Commercial Sample 依客户所议定之规格对产品进行检验评估，以提供是否承认产品release之依据

MP是mass product 量产

所以，可以理解为ES是工程样品，CS是出货样品。

时间过得不快也不慢，2014年11月提的es300h，已经默默陪伴我们快5年半了。当时提车也没交作业，老伙计刚过9w公里，发个心，拍点片子，一方面记录下用车感受，同时也留个美好纪念吧。[玫瑰] 记得es混动刚出来的时候有去试驾过，给我的印象是静谧性很好，媳妇那时候开的是c200wagon隔音也挺好的，雷不比它差，当然怠速的时候肯定是雷更好的啦。后来买车的时候也直奔这个车，只有两个配置，高配和低配差10w，性（没）价（钱）比就选了低配。[撇嘴]使用过程中其实挺后悔的，座椅加热通风/马克音响/大屏包括gbook/木内饰，特别是竹木方向盘太口水了。 遗憾一直心头，所以再换车，配置是选择重要项之一。[奋斗]

按键背光是白色的，我比较喜欢，路虎老款的绿相比较，时尚感、精致感，雷要好不少[嘻嘻]

平时上下班、送送孩子，每天都是短途，平均时速才20km，杭州郊区的路况不算太堵，然后加上我大脚和经常停车开空调，最近2w公里的平均油耗66升。和别的车主比油耗算差的。不过，我觉得已经很省油了，再少个半升1升，也差不了几个钱。

拍照前一天刚洗的车，洗干净还是挺亮的。不过凑近看，细划痕有不少，雷的车漆太软，很注意使用，时间长也是满身伤痕[流泪]。不过好在除了前后保险杠其他都是原漆，聊表安慰 哈哈

这张我最喜欢，尾翼是这代混动独有的，比250的屁股要好看一丢丢[偷笑]，轮毂样式也还过得去，清洁相对比较容易。轮胎215 17的，原胎没记错应该是韩泰的，噪音比较大，6w公里换成米其林，感觉要好一点点。

黑底白字，清清爽爽，中间不大的液晶显示表，跟现在很多新车比，就落伍不少，好在字体设计、显示都还不错，实用性够了。

夏天，停车开空调时间比较多，基本7～75多百公里油耗

所有的按键阻尼都是软软的，有点q弹，玻璃升降快到底的时候有个减速的过程，莫名的有种高级感（原谅我没开过什么豪车，孤陋寡闻了 [嘻嘻]哈哈）

内饰唯一破损的就是，驾驶位门板处，因为左腿经常靠着的缘故，包皮已经破了。[发呆]

细腻的按键触感，好评。与德系硬朗，各有千秋

车上加的东西不多，我连膜都不贴，家里车除了最早的那台，其他都不贴，透亮。 自己加的小玩意有：行车记录仪、点烟器充电器（小米的）、手机支架、儿童安全座椅、防倾杆。。。 优点：体积小、样子好看 不足：视频通过wifi导入手机，很慢～～很慢～～。50m要一分多钟的样子。然后内存卡只支持16g、wifi手动连接

每天看到最多就是这个屏幕，摸的最多的方向盘也要给个大大的赞[强]。皮质细腻，手感贼好。9w公里也不油腻。媳妇之前的c200wagon是7w公里卖掉的，她经常擦防晒霜/护手霜、方向盘油油的。现在每次两个人换车开，我都第一时间拿毛巾擦盘子，不习惯粘粘的感觉[撇嘴]

车上备了3个手机支架，这个是磁吸的，吸力挺大，也最方便

14款的没有单独的空调ac按钮，以前都要到菜单里选择。有次媳妇开我车，带朋友去母校玩，打电话来抱怨，你这车怎么空调不冷的呢？ 哈哈，电话里教了好一会儿，才弄懂，女神vs理工男[衰]，完败 哦耶 后来，我发现进分循环设置成auto或者内/外循环，也能够控制 ac。 所以现在上车循环设置成auto，下次熄火前设置成外/内循环就可以了，方便！ [得意][得意][得意]再再再表扬下这代车的冷空调太给力，温度、进风都设置成auto ，外界温度哪怕40度，没多久就感觉被风吹到的身体部位感觉冷了，没错就是冷，比我开过几个车给力多多多了

按下power 点燃的不是激情，而是佛系驾驶的开始。稍微暴力点开，发动机的噪音，地盘的侧倾（加了防倾杆改善不少）、刹车就是个软脚虾。 太low的刹车脚感，前段没有（动能回收）后段点头，精致感、豪华感、舒适度都差差差评。[再见]这个车我最不满意的就是刹车，刹车、刹车/。 听说新款有改善，我没试过，也不好评论，不过，厂家确实应该要调整下，太影响舒适度了

对了，忘记说了，还改了大屏，这个算80分好评，喇叭音质听酷狗开3d音效，我打85分吧。改了大屏，所有原来屏幕菜单都保留下来，音质也没区别。右侧能显示续航里程、脚刹、车外温度等信息。另外还有导航、空调信息也会在右边显示。3000大洋不褒不贬吧 还有倒车影像带轨迹，实用性配置也通过改大屏实现了

本来贴中控部位，有点挡按钮，改放这里

荔枝纹的塑料，温润的触感。廉价的用材通过设计营造成类似皮革的视觉效果。

有点偏绿的外后视镜，够大够清晰

ram的支架买了好几个，花了1000多块。这个主要装mini5 4g 够稳。还有种杯架的底座，没买，看卖家图，更适合这代es。我这个椅子缝隙固定的，好处就是换个车也能用。杯架底座那款就不一定所有都能通用，比如杯架在档位后面的，可能用起来不舒服[糗大了]

说好听的稳重、大气，说人话就是老气。哈哈哈，有没有？[嘻嘻]

能看，耐看，喜新不厌旧[憨笑]

9w对很多车来说，正值壮年，es300h也怕是如此。 1、混动除了省油，动力平顺+低扭电机辅助带来的加油顺畅感，没有普通车换挡的顿挫，巴适！ 2、6年保修保养，省心不少。6w公里的时候，换了变速箱油，然后买了一堆原厂空滤，1w一换。空调滤是车友厂里自己做的，一年两个 3、然后6w我换了4条胎，其他就没啥支出啦 4、总共索赔了两样：天窗异响换了胶条，扶手箱盖子里面有个螺丝也是异响，4s拆开的时候把卡子弄坏了，还说是我使用不当，理论后索赔扶手箱盖总成。 这两样其实异响都很轻，不换也问题不大。其他都还不错，没啥毛病 不过没毛病也不完全是好事情[流泪]，最近想换车了，媳妇说你车不是好好的嘛，坏了再换。哎，你说好事还是坏事[撇嘴] 最后，也感谢各位能看到这里，做个总结吧。 我比较在意品控、省心程度、舒适程度等等，这个车总体来看符合我的使用需要和使用场景，人无完人，车更是如此，瑕不掩瑜，给它一个个好评吧。辛苦啦，风里雨里伴我们一路～～～～[爱心]

中文：《死亡实验》

英文：《Experiment, Das》

剧情简介 · · · · · ·

本片以1971年美国的“斯坦福监狱实验”为基础，根据马里奥•乔丹努的小说《黑盒子》改编。出租司机塔瑞克•法德（莫里兹•布雷多Moritz Bleibtreu 饰）看到报纸上一个征招心理实验对象的广告前去应聘，与其他19名各行各业各年龄段的男性应聘者被分为两组，本别扮演十二名囚犯和八名狱警，实施为时2周的模拟监狱实验，并各获4000德国马克报酬。实验前夕，塔瑞克回到自己两年前曾供职的报社，决定将实验过程中发生的情形写成报道出售。塔瑞克在实验中是囚犯77号，他依仗着实验中不准使用暴力的规定，故意挑起事端制造新闻。狱警博鲁斯（贾斯特斯•冯•多纳伊Justus von Dohnanyi 饰）不满塔瑞克的嚣张，在对囚犯的制裁中一步步确立自己的权威。二人的针锋相对为实验带来了不可预计的后果……

还有，据我所知，2009年又出了一部，是美国翻拍的，这个应该就是你想要的吧

　　选修3复习提纲

　　一、  基因工程

　　1、（a）基因工程的诞生

　　（一）基因工程的概念

　　基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

　　2、（a）基因工程的原理及技术

　　原理：基因重组

　　技术：（一）基因工程的基本工具

　　1“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）

　　（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。

　　（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

　　（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

　　2“分子缝合针”——DNA连接酶

　　(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：

　　①相同点：都缝合磷酸二酯键。

　　②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

　　(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。

　　3“分子运输车”——载体

　　（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

　　（2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

　　（3）其它载体： 噬菌体的衍生物、动植物病毒

　　(二)基因工程的基本操作程序

　　第一步：目的基因的获取

　　1目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因 。

　　2原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。

　　3PCR技术扩增目的基因

　　（1）原理：DNA双链复制

　　（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。

　　第二步：基因表达载体的构建

　　1目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。

　　2组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因

　　（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。

　　（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段 ，位于基因的尾端。

　　（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。

　　第三步：将目的基因导入受体细胞_

　　1转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。

　　2常用的转化方法：

　　将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法，其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。

　　将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 显微注射技术。此方法的受体细胞多是 受精卵。

　　将目的基因导入微生物细胞：

　　3重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。

　　第四步：目的基因的检测和表达

　　1首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术。

　　2其次还要检测 目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用 用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。

　　3最后检测 目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取 蛋白质，用相应的 抗体进行 抗原－抗体杂交。

　　4有时还需进行 个体生物学水平的鉴定。如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。

　　（三）（b）基因工程的应用

　　1植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。

　　2动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。

　　3基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。

　　（四）（a）蛋白质工程的概念

　　蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）（1）蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质

　　（2）蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。

　　基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行。（注意：目的基因只能用人工合成的方法）

　　设计中的困难：如何推测非编码区以及内含子的脱氧核苷酸序列

　　二、细胞工程

　　（一）植物细胞工程

　　1理论基础（原理）：细胞全能性

　　2植物组织培养技术（b）

　　（1）过程：离体的植物器官、组织或细胞 ―――→愈伤组织 ―――→试管苗 ――→植物体

　　（2）用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。

　　A 植物繁殖

　　微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖

　　作物脱毒：采用茎尖组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒极少或没有）

　　人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经人工薄膜包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，不受季节的限制；方便储藏和运输

　　B 作物新品种培育

　　单倍体育种：

　　a过程：植株（AaBb）通过减数分裂得到花粉（AB、Ab、aB、ab四种类型）；对花粉进行花药离体培养（技术是植物组织培养）；得到单倍体植株；对其幼苗时期进行秋水仙素处理；得到了正常的纯合二倍体植株（AABB、AAbb、aaBB、aabb四种类型）。

　　b 优点：明显缩短育种年限

　　C 突变体利用：在组织培养中会出现突变体，通过从有用的突变体中选育出新品种（如筛选抗病、抗盐、含高蛋白的突变体）

　　D 细胞产物的生产：通过能够产生对人们有利的产物的细胞进行组织培养，从而让它们能够产生大量的细胞产物。

　　（3）地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。

　　3植物体细胞杂交技术

　　（1）过程：

　　（2）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。

　　（3）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。

　　（二）动物细胞工程

　　1 动物细胞培养（a）

　　（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。

　　（2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。

　　（3）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。

　　（4）动物细胞培养需要满足以下条件

　　①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。

　　②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。

　　③温度：适宜温度：哺乳动物多是365℃＋05℃；pH：72～74。

　　④气体环境：95%空气＋5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。

　　（5）动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。

　　2动物体细胞核移植技术和克隆动物

　　（1）哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。

　　（2）选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞比较大，容易操作；卵(母)细胞细胞质多，营养丰富。

　　（3）体细胞核移植的大致过程是：

　　高产奶牛（提供体细胞）进行细胞培养；同时采集卵母细胞，在体外培养到减二分裂中期的卵母细胞，去核（显微操作）[注：为什么要用卵细胞？它可以提供充足的营养；操作简便；细胞质不会抑制细胞核全能性的表达]；将供体细胞注入去核卵母细胞；通过电刺激使两细胞融合，供体核进入受体卵母细胞，构建重组胚胎；将胚胎移入受体（**）母牛体内；生出与供体奶牛遗传基因相同的犊牛

　　（4）体细胞核移植技术的应用：

　　①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量；

　　③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。

　　（5）体细胞核移植技术存在的问题：

　　克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。

　　3动物细胞融合

　　（1）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。

　　（2）动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。

　　（3）动物细胞融合的意义：克服了远缘杂交的不亲和性，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。

　　（4）动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：

　　细胞工程 植物体细胞杂交 动物细胞融合

　　理论基础 细胞的全能性、细胞膜的流动性 细胞增殖、细胞膜的流动性

　　融合前处理 酶解法去除细胞壁（纤维素酶、果胶酶） 注射特定抗原，免疫处理正常小鼠

　　诱导手段 物理法:离心、振动、电激

　　化学法：聚乙二醇（PEG） 物理法:离心、振动、电激

　　化学法：聚乙二醇

　　生物法：灭活的病毒（灭活的仙台病毒）

　　诱导过程 第一步：原生质体的制备

　　（酶解法）

　　第二步：原生质体融合

　　（物、化法）

　　第三步：杂种细胞的筛选和培养

　　第四步：杂种植株的诱导与鉴定 正常小鼠免疫处理

　　动物细胞的融合

　　（物、化、生法）

　　杂交瘤细胞的筛选与培养

　　专一抗体检验阳性细胞培养

　　单克隆抗体的提纯

　　用途和意义 克服远缘杂交的不亲和障碍，大大扩展杂交的亲本组合范围

　　应用：白菜-甘蓝等杂种植株 制备单克隆抗体

　　诊断、治疗、预防疾病，例如“生物导弹”治疗癌症

　　4单克隆抗体

　　（1）抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。

　　（2）单克隆抗体的制备过程：

　　对免疫小鼠注射特定的抗原蛋白（目的使小鼠产生了效应B细胞）；提取B淋巴细胞；同时用动物细胞培养的方法培养骨髓瘤细胞并提取；促使它们细胞融合[注：融合的结果是有很多不符合要求的；如有2个B淋巴细胞融合的细胞等，所以要进行筛选]；在特定的选择培养基上筛选出融合的杂种细胞[特点是能迅速大量增殖，又能产生专一的抗体]；然后对它进行克隆化培养和抗体检测[筛选出能够分泌所需抗体的杂种细胞]；最后将杂交瘤细胞在体外做大规模培养或注射入小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中可得到大量的单克隆抗体。

　　（3）杂交瘤细胞的特点：既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。

　　（4）单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。

　　（5）单克隆抗体的作用：作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症治疗，可制成“生物导弹”，也有少量用于治疗其它疾病。

　　三、胚胎工程

　　（一）动物胚胎发育的基本过程

　　（1）精子的发生：补充，精原细胞先进行有丝分裂后进行减数分裂；变形过程中，细胞核为精子头的主要部分，高尔基体发育为顶体，中心体演变为精子的尾，线粒体在尾基部形成线粒体鞘膜，其他物质浓缩为原生质滴直至脱落。[线粒体为精子运动提供能量]

　　（2）卵子的发生：在胎儿时期，卵原细胞进行有丝分裂演变成初级卵母细胞[被卵泡细胞包围]，减一分裂在排卵前后完成，形成次级卵母细胞和第一极体进入输卵管准备受精；减二分裂是在受精过程中完成的。

　　（3）受精：精子获能（在雌性动物生殖道内）；卵子的准备（排出的卵子要在输卵管中进一步成熟到减二中期才具备受精能力）；受精阶段[卵子周围的结构由外到内：放射冠、透明带、卵黄膜]，a顶体反应：精子释放顶体酶溶解卵丘细胞之间的物质，穿越放射冠。

　　b透明带反应：顶体酶可将透明带溶出孔道，精子穿入，在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应[它是防止多精子入卵受精的第一道屏障]；c卵黄膜的封闭作用：精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程[它是防止多精子入卵受精的第二道屏障]；精子尾部脱落，原有核膜破裂形成雄原核，同时卵子完成减二分裂，形成雌原核[注意：受精标志是第二极体的形成；受精完成标志是雌雄原核融合成合子]。

　　（4）胚胎发育：a卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；b桑椹胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]；c囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]；d原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。[细胞分化在胚胎期达到最大限度]

　　9 胚胎工程的理论基础（识记）

　　（1）胚胎工程的概念及技术手段：对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。

　　（2）体外受精[属有性生殖过程]：a卵母细胞的采集和培养 对体型小的动物用促性腺激素处理，从输卵管冲取卵子（可直接受精）；对体型大的动物从卵巢中采集卵母细胞（要在体外培养成熟）b精子的采集 假阴道法、手握法和电刺激法；获能 对啮齿动物、兔、猪等的精子用培养法（放入人工配制的获能液中）；对牛、羊等精子用化学法（放在肝素或钙离子载体溶液中）

　　（3）胚胎的早期培养：a培养液成分：无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等[注意与动物细胞培养液成分的比较]；b当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。

　　（4）胚胎移植：a概念：将雌性动物的早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程，通过转基因、核移植、体外受精获得的胚胎必须移植给受体才能获得后代。

　　b优势：可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，缩短供体本身的繁殖周期。

　　c胚胎移植的生理学基础：同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的[对供体和受体进行同期发情处理]；早期胚胎形成后处于游离状态，为胚胎的收集提供可能；受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应；移入受体的供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。

　　d胚胎移植的程序：对供、受体母牛进行选择，用激素进行同期发情处理；对供体母牛用激素做超数排卵处理；选择同种优秀公牛配种[有性生殖过程]；对胚胎进行收集[此时胚胎处于游离状态]；对胚胎进行质量检查[此时胚胎应发育到桑椹胚或囊胚]；胚胎移植[或冷冻保存]；检查受体母牛是否受孕；产下胚胎移植的犊牛。

　　（5）胚胎分割：a概念：用机械方法将早期胚胎切割成2、4、8等分等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术[可看作是动物无性繁殖或克隆]

　　b基本过程：选择良好的桑椹胚或囊胚移入培养皿中，用分割针或分割刀片将其切开，吸出其中的半个胚胎注入透明带中或直接移植给受体。[注意：内细胞团要均等分割，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育]

　　10 胚胎干细胞的移植（识记）

　　（1）胚胎干细胞的含义：由早期胚胎[囊胚]或原始性腺[胎儿]中分离出来的一类细胞，又叫ES或EK细胞。

　　（2）特征：形态上体积小、细胞核大、核仁明显；功能上具有发育的全能性，即可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。[体外培养下，ES细胞可以只增殖不分化]

　　（3）应用：用于治疗人类疾病，如利用ES细胞诱导其分化成新的组织细胞特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复。

　　1、胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求。

　　2、动物胚胎发育的基本过程

　　（1）受精场所是母体的输卵管。

　　（2）卵裂期：特点：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积并不增加，或略有减小。

　　（3）桑椹胚：特点：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。是全能细胞。

　　（4）囊 胚：特点：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为囊胚腔。

　　（5）原肠胚：特点：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。

　　（二）胚胎干细胞

　　1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。

　　2、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

　　3、胚胎干细胞的主要用途是：①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料，在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段；③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、少年糖尿病等；④利用可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能；⑤随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，定向培育出人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。

　　（三）胚胎工程的应用

　　1体外受精和胚胎的早期培养

　　(1)卵母细胞的采集和培养：主要方法：用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。第二种方法：从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；第三种方法是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精。

　　(2) 精子的采集和获能：在体外受精前，要对精子进行获能处理。

　　(3) 受精：获能的精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。

　　(4)胚胎的早期培养：精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。不同动物胚胎移植的时间不同。(牛、羊一般要培育到桑椹胚或囊胚阶段才能进行移植，小鼠、家兔等实验动物可在更早的阶段移植，人的体外受精胚胎可在4个细胞阶段移植。)

　　2胚胎移植

　　(1)胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。（供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种。）

　　地位：如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

　　(2) 胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

　　(3) 生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。

　　②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。

　　③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。

　　④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。

　　(4) 基本程序主要包括：

　　①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。

　　②配种或人工授精。

　　③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来(也叫冲卵)。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入－196℃的液氮中保存。

　　④对胚胎进行移植。

　　⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。

　　3胚胎分割

　　(1)概念：是指采用机械方法将早期胚胎切割2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。

　　(2)意义：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，属于无性繁殖。

　　(3)材料：发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚。（桑椹胚至囊胚的发育过程中，细胞开始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割。）

　　(4)操作过程：对囊胚阶段的胚胎分割时，要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

　　（四）生物技术的安全性和伦理问题

　　1转基因生物的安全性争论 ：

　　(1)基因生物与食物安全：

　　反方观点：反对“实质性等同”、出现滞后效应、出现新的过敏原、营养成分改变

　　正方观点：有安全性评价、科学家负责的态度、无实例无证据

　　(2)转基因生物与生物安全：对生物多样性的影响

　　反方观点：扩散到种植区之外变成野生种类、成为入侵外来物种、重组出有害的病原体、成为超级杂草、有可能造成“基因污染”

　　正方观点：生命力有限、存在生殖隔离、花粉传播距离有限、花粉存活时间有限

　　(3)转基因生物与环境安全：对生态系统稳定性的影响

　　反方观点：打破物种界限、二次污染、重组出有害的病原微生物、毒蛋白等可能通过食物链进入人体

　　正方观点：不改变生物原有的分类地位、减少农药使用、保护农田土壤环境

　　2生物技术的伦理问题

　　(1)克隆人：两种不同观点，多数人持否定态度。

　　否定的理由：克隆人严重违反了人类伦理道德，是克隆技术的滥用；克隆人冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；克隆人是在人为的制造在心理上和社会地位上都不健全的人。

　　肯定的理由：技术性问题可以通过胚胎分级、基因诊断和染色体检查等方法解决。不成熟的技术也只有通过实践才能使之成熟。

　　中国政府的态度：禁止生殖性克隆，不反对治疗性克隆。四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。

　　(2)试管婴儿：两种目的试管婴儿的区别两种。不同观点，多数人持认可态度。

　　否定的理由：把试管婴儿当作人体零配件工厂，是对生命的不尊重；早期生命也有活下去的权利，抛弃或杀死多余胚胎，无异于“谋杀”。

　　肯定的理由：解决了不育问题，提供骨髓中造血干细胞救治患者最好、最快捷的方法，提供骨髓造血干细胞并不会对试管婴儿造成损伤。

　　(3)基因身份证：

　　否定的理由：个人基因资讯的泄漏造成基因歧视，势必造成遗传学失业大军、造成个人婚姻困难、人际关系疏远等严重后果。

　　肯定的理由：通过基因检测可以及早采取预防措施，适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。

　　3生物武器

　　(1)种类：致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌。

　　(2)散布方式：吸入、误食、接触带菌物品、被带菌昆虫叮咬等。

　　(3)特点：致病力强、多数具传染性、传染途径多、污染面广、有潜伏期、不易被发现、危害时间长等。

　　(4)禁止生物武器公约及中国政府的态度：在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。

　　生态工程的原理（识记）

　　（1）生态工程建设的目的：遵循自然界物质循环的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止环境污染，达到经济效益和生态效益的同步发展。

　　（2）生态经济：通过实行循环经济的原则，使一个系统产出的污染物能够成为本系统或另一个系统的生产原料，从而实现废弃物的资源化。[实现手段：生态工程]

　　（3）基本原理：物质循环再生原理[如无废弃物农业]

　　物种多样性原理[提高生态系统的抵抗力稳定性]

　　协调与平衡原理[处理生物与环境的协调与平衡，考虑环境容纳量]

你是指单复数变化还是第三人称单数呢下面这个讲解的比较详细,希望能够帮助到你!O(∩_∩)O

各种名词的复数形式

A 名词的复数形式通常是在单数名词后加s：

day,days天,白天

dog,dogs狗

house,houses房屋

在词尾p,k或f音之后加的s读为／s／除此之外s读／z／词尾是ce,ge,se或ze的词之后加s时,该词的读音要加上一个音节（／Iz／）

其他复数形式

B 以字母o,ch,sh,ss或x结尾的单词,在词尾加es构成其复数：tomato,tomatoes西红柿

brush, brushes刷子

church,churches教堂

kiss,kisses吻

box,boxes箱,盒

但以字母o结尾的外来词或缩写词的复数形式是只加s：dynamo,dynamos发电机

kilo,kilos公斤

kimono,kimonos和服

photo,photos照片

piano,pianos钢琴

soprano,sopranos女高音歌手

词尾是ch,sh,ss或x的词后面加es时,该词的读音要加上一个音节（／Iz／）

C 以y结尾但y前为辅音的名词在构成复数时,先把y去掉再加ies：

baby,babies婴儿

country,countries国家

fly,flies苍蝇

lady,ladies女士

以y结尾但y前为元音的名词在构成复数时,直接加s：boy,boys男孩

day,days天

donkey,donkeys驴子

guy,guys家伙

D 有12个以f或fe结尾的名词在构成复数时,去掉f或fe加ves这些词是：

calf小牛

half半

knife刀

leaf叶子

life生命

loaf（面包的）条／只

self自身

sheaf捆

shelf架子

thief贼

wife妻子

wolf狼

例如：

loaf,loaves

wife,wives

wolf,wolves

名词hoof（蹄）,scarf（围巾）和wharf（码头）构成复数形式时,其词尾可以加s或ves：

hoofs或hooves

scarfs或scarves

wharfs或wharves

其他以f或fe结尾的名词在构成复数形式时,直接加s：cliff,cliffs悬崖峭壁

handkerchief,handkerchiefs手帕

safe,safes保险箱

E 有些名词用改变无音的方法来构成其复数形式：

foot,feet,英尺,脚

goose,geese鹅

louse,lice虱子

man,men男人

mouse, mice老鼠

tooth,teeth牙齿

woman,women女人

但是,child的复数是children,ox的复数是oxenF 某些动物名称没有复数形式：

名词fish通常没有复数形式,虽然有fishes这一形式,但不常用

鱼类的某些种类通常没有复数形式：

carp鲤鱼

cod鳕鱼

mackerel 鲐鱼

pike狗鱼

plaice鲽鱼

salmon鲑鱼

squid 鱿鱼

trout鳟鱼

turbot大菱鲆

但是,这些名词如果表达复数的意思,其动词要用复数形式其他鱼虾要表达复数意思则要在词尾加s：

crabs蟹

eels鳗鱼

hetrings鲱鱼

lobsters龙虾

sardines沙丁鱼

sharks鲨鱼

deer（鹿）和sheep（羊）没有复数形式：

one sheep一只羊

two sheep两只羊

喜欢打猎的人说duck（野鸭）,partridge（鹧鸪）,pheasant（野鸡）等时,对其不分单复数都用同一形式但是其他人通常在常见的有复数形式的鸟类名称上加s：

ducks partridges pheasants

打猎的人用game这个词表示所猎获的猎物时,它总是取单数形式,而且后边跟单数动词G 还有一些没有变化的词：

aircraft航空器,飞机

craft船只

counsel法庭上的辩护律师

quid一英镑（俚语）

有些度量单位和数词没有复数形式（参见第三十六章）关于不可数名词,参见第13节

H 集合名词如crew,family,team等用单数或复数动词都可以；如果认为这个词表示的是一个群体或单位,可用单数动词：

Our team is the best．

我们这个队是最好的

如果认为它表示的是这个队的所有成员,就用复数动词：

Our team are wearing their new jerseys．

我们这个队的队员们都穿着新运动衫

这些名词后面需要带所有格形容词时,复数动词+their要比单数动词+ its常用一些,虽然有时两者都可以用：

The jury is considering its verdict．

陪审团正在考虑裁决

The jury are considering their verdict．

陪审团成员们正在考虑裁决

I 有些词总是复数形式,并和复数动词连用：

clothes衣服

police警察

由两部分组成的服装用复数：

breeches马裤

pants（男用）短衬裤

pyjamas睡衣裤

trousers裤子

由两部分组成的工具和仪器用复数：

binoculars双筒望远镜

glasses眼镜

pliers钳子

scales天平

scissors剪刀

shears大剪刀

spectacles眼镜／护目镜

还有其他一些词用复数：

arms武器

damages损害／赔偿

earnings收入

goods／wares商品／货品

greens蔬菜

grounds（建筑物周围的）庭院,场地

outskirts郊外

pains费心,辛苦

particulars细情

prenises／qusrters房屋／住所

riches财富

savings储蓄

spirits烈酒

stairs台阶,楼梯

surroundings环境

valuables贵重物品

J 有一些以ics结尾的词从形式上看是复数,通常也要跟复数动词这些词有：

acoustics音响效果

athletics体育运动

ethics道德／伦理学

hysterics歇斯底里发作

mathematics数学

physics物理学

politics政治

例句如：

His mathematics are weak．

他的数学学得不好

但学科的名称有时是单数：

Mathematics is an exact science．

数学是一门精密的科学

K 形式上是复数但意义上却是单数的名词包括news：

The news is good．

消息很好

还包括某些疾病的名称：

mumps流行性腮腺炎

rickets软骨病,佝偻病

shingles带状疱行疹

这一类中也包括某些游戏的名称：

billiards台球（俗称“打弹子”）

bowls滚木球（保龄球）

darts掷飞镖

dominoes多米诺骨牌游戏

draughts（〔美〕checkers）国际象棋

L 一些源自希腊或拉丁的外来词在构成复数时,依照各自原有的规则变化：

crisis／′kraIsIs／,crises／kraIsI：z／危机

erratum,errata印刷或书写的错误,勘误表

memorandum,memoranda备忘录

oasis／′eIsIs／,oases／+u′eIsI：z／绿洲

phenomenon,phenomena现象

radius,radii半径

terminus,termini铁路或公共汽车的终点

但是有些外来词依照英语的规则而变化：

dogma,dogmas教条

formula,forrmulas公式（科学家仍用formulae）

gymnasium,gymnasiums体育馆

有些词的两个复数形式意思不同：

appendix,appendixes／appendices（医学术语）阑尾

appendices（书的）附录

index,indexes（书的）索引

indices（数学术语）指数

音乐家对意大利文音乐术语通常用意大利文中的复数形式：

libretto,libretti歌剧脚本

tempo,tempi拍子

但在词尾直接加s也是可以的：

librettos tempos

M 复合名词的复数形式

1 通常是把最后一个词变成复数形式：

boy-friends男朋友

break－ins入室盗窃

travel agents旅行社经纪人

如man和woman位于复合名词的第一部分,两部分都要变成复数：

men drivers男司机

women drivers女司机

2 由动词+er构成的名词+副词组成的复合名词构成复数形式时,只需把第一个词变为复数：

hangers-on食客,奉承者

lookers－on旁观者

runner’s－up（在竞选、赛跑等中）占第二位的人,亚军

另外,由名词+介词+名词构成的复合名词变为复数时,也同样只需将第一个词变为复数：

ladies-in－waiting侍从女官

sisters-in-law嫂子,弟媳

wards of court法庭指定受监护者

3 首字母缩写词也可有复数形式：

MPs（Members of Parliament）英国下院议员

VIPs（very important persons）要人

OAPs（old age pensioners）养老金领取者

UFOs（unidentified flying objects）不明飞行物,飞碟