试述革兰染色法的步骤,结果及其临床意义
一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：1）涂片固定2）草酸铵结晶紫染1分钟3）自来水冲洗4）加碘液覆盖涂面染约1分钟5）水洗，用吸水纸吸去水分6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，自来水冲洗干燥，镜检 具体试验 流程 1、 取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用marker笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂 2、 涂片：液体培养基：左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环，在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，再用接种环取少量菌体，涂在载玻片上，使其薄而均匀 3、 晾干：让涂片在空气中自然干燥 4、 固定：让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以不烫手为宜） 5、 染色：将固定过的涂片放报纸上，滴加草酸铵结晶紫液，染1min 6、 水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干简单染色结束可观察细胞形态 7、 媒染：滴加1滴碘液，染1min，水洗 8、 脱色：吸去残留水，连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色，立即水洗 9、 复染：滴加蕃红复染3-5min，水洗至此，革兰氏染色结束 结果：革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色 其重要的临床意义在于：1鉴别细菌 2选择药物 3与致病性有关：革兰氏阳性菌能产生外毒素，革兰氏阴性菌能产生内毒素；而内毒素主要是指革兰氏阴性菌胞壁成分中的脂多糖，两者的致病作用不同。
革兰氏染色时,初染前能加碘液吗？乙醇脱色后复染前,革兰氏阳性菌
不可以因为革兰氏碘液（媒染剂）的作用是增加结晶紫染料和细胞之间的亲和性或附着力，即以某种方式帮助染料固定在细胞上，使不易脱落改变顺序可能会对效果有影响，所以最好按步骤做脱色后复染前，理论上革兰氏阳性菌呈紫色，阴性菌无色复染的目的就是增加无色阴性菌与背景的反差，以便区别于紫色的阳性菌革兰氏阳性菌细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上呈紫色革兰氏阴性菌肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高，乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红复染后呈红色革兰氏染色步骤：1涂片，火焰固定2结晶紫1min，使菌体着上紫色3水洗4碘液1min，碘和结晶紫形成脂溶性大分子复合物，分子大，能被细胞壁阻留在细胞内5水洗6酒精脱色30s，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应7水洗8番红复染1min，增加脱色菌与背景的反差并区别于未脱色菌9以吸水纸吸干，油镜观察。
革兰氏染色法的原理
革兰氏染色法的原理： 简单来说：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，再用95%乙醇脱色。
具体来说：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色； 而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。 G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性屏障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔隙缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。
呈紫色。 Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高，乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红染液复染后呈红色。
扩展资料：
革兰染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。未经染色的细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难区别。
经染色后，阳性菌呈紫色，阴性菌呈红色，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，从而用以分类鉴定。 操作流程：革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是： （1）载玻片固定。
在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定。 （2）草酸铵结晶紫染1分钟。
（3）自来水冲洗，去掉浮色。 （4） 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟，倾去多余溶液。
（5）用中性脱色剂如乙醇（95%）或丙酮酸脱色30秒，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色，革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。酒精脱色为整个流程最关键的一步。
（6）用蕃红染液或者沙黄复染30秒，革兰氏阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。
参考链接：-革兰氏染色法。
革兰氏染色的详细步骤
革兰氏染色
一、 目的：在细胞发放之前，利用标准的革兰氏染色法对即将发放的细胞悬液进行检测，判断细胞悬液中是否含有革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌。
二、 原理：
通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。
三、实验用品准备：
灭菌玻片、10-100ul移液器、10-100ul灭菌移液吸头、100ul-1000ul移液器、100ul-1000ul移液吸头、接种环、酒精灯、打火机、革兰氏染色液、吸水纸、显微镜、香柏油、擦镜纸、计时器
四、 操作：
1 涂片：取灭过菌的载玻片于实验台上，用移液枪吸取10ul待检样品滴在载玻片的中央，用烧红冷却后的接种环将液滴涂布成一均匀的薄层，涂布面不宜过大。
2 干燥：将标本面向上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒精灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。
3 固定：固定常常利用高温，手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰处尽快的来回通过2-3次，共约2-3秒种，并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉过烫为宜（不超过60℃），放置待冷后，进行染色。
4 初染：在涂片薄膜上滴加草酸铵结晶紫1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。
5 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。
6 媒染：用100-1000ul移液枪吸取约300ul碘液滴在涂片薄膜上，使染色液覆盖涂片，染色约1min。
7 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。
8 脱色：斜置载玻片，滴加95%乙醇脱色，至流出的乙醇不现紫色为止，大约需时20-30S，随即水洗。
9 复染：在涂片薄膜上滴加沙黄染液1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。
10 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。
11 干燥、观察：用吸水纸吸掉水滴，待标本片干后置显微镜下，用低倍镜观察，发现目的物后滴一滴浸油在玻片上，用油镜观察细菌的形态及颜色，紫色的是革兰氏阳性菌，红色的是革兰氏阴性菌
要得到正确的革兰氏染色结果注意哪些操作,哪一步是关键步骤
革兰氏染色：（1）涂片：涂片方法与简单染色涂片相同（2）晾干：与简单染色法相同（3）固定，与简单染色法相同（4）结晶紫色染色：将玻片置于废液缸玻片搁架上，加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1分钟（5）水洗：倾去染色液，用水小心地冲洗（6）媒染：滴加卢哥氏碘液，媒染1min(7)水洗：用水洗去碘液（8）脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色20—25s至流出液无色，立即水洗（9）复染：滴加蕃红复染5min(10)水洗：用水洗去涂片上的蕃红染色液（11）晾干：将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水纸吸干（12）镜检：镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色反应性（13）实验完毕后的处理：①将浸过油的镜头按下述方法擦拭干净，a先用擦镜纸将油镜头上的油擦去b用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头擦2—3次c再用干净的擦镜纸将镜头擦2—3次注意擦镜头时向一个方向擦拭②看后的染色玻片用废纸将香柏油擦干净1革兰氏染色成败的关键是酒精脱色如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影响，难以严格规定2染色过程中勿使染色液干涸用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色效果3选用幼龄的细菌G+菌培养12h-16h,Ecoli培养24h若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。
徐州市2009届初中毕业、升学考试
生物试题
一、选择题 （每题2分，共20分）
1．右边是绿色开花植物受精过程示意图。有关该过程的叙述正确的是（ ）
A．①分别和③、④结合的过程
B．②中的一个精子和③结合的过程
C．①和④结合的过程
D．②中两个精子分别和③、④结合的过程
2．与植物细胞相比，动物细胞没有的结构是（ ）
A．液泡和叶绿体 B．细胞质和液泡
C．细胞核和叶绿体 D．细胞膜和细胞壁
3．X、Y、Z是三个相邻的植物细胞，已知Z细胞液浓度>Y细胞液浓度>X细胞液浓度。下列
各图中能正确表示三者吸失水关系的是
4．现有四个实验装置，若要验证植物的光合作用需要二氧化碳，则应选用的装置组合是
5．有关一个体细胞经分裂产生两个新细胞的说法正确的是
A．每个新细胞的染色体数比原来细胞的少 B．两个新细胞含有一样多的细胞质
C．每个新细胞的染色体数和原来细胞的一样多 D．两个新细胞大小完全一样
6．如下图，将新鲜的血液分别放入A、B、C、D四支试管中，其中A、B试管中不加任何物质，C、D试管中加入抗凝剂，静置24小时后，其中正确的图示是 （ ）
7．下图是制作人口腔上皮细胞临时装片的四个步骤，这四个步骤的正确顺序是
8．大灾之后要防大疫。四川的汶川地震之后，我国政府在积极抢救伤员的同时，还组织大批防疫人员对灾区进行喷药消毒。这种做法的主要目的是 （ ）
A．控制传染源 B．保护易感人群 C．切断传播途径 D．改善生活条件
9．右图是人体完成反射活动的神经结构示意图，下面有关该图的说法不正确的是（ ）
A．完成反射活动的正确传导路线是①②③④⑤
B．③是该神经结构的中枢
C．甲处主要由神经细胞体构成
D．乙处主要由神经纤维组成
10．在视觉的形成过程中，物象和视觉的形成部位分别是
A．视网膜、大脑 B．大脑、视网膜
C．视网膜、视神经 D．视神经、大脑
二、非选择题（每空1分，共20分）
11．(5分)近年来国际上经常出现粮食危机，甚至在一些国家出现粮荒。粮食作为人体的
营养物质，发挥着重要作用。下面请同学们根据大米在人体内的主要变化，完成下列各题：
(1)大米的主要成分是淀粉，在人体的口腔内经初步消化后，最终在 内以葡萄糖的形式被吸收进入血液。
(2)葡萄糖随着血液循环到达心脏的右心房，经过 循环再回到心脏的左心房、左心室，最后进入主动脉。
(3)随着主动脉，部分血液流到肾脏，如右图。血液中的部分葡萄糖经过[ ] 的 作用进人原尿，在肾小管处它又被重新吸收回到了血液中。
(4)葡萄糖随着血液循环最终到达组织细胞处，在那里它被分解成
同时释放出能量。这样，大米的重要使命就完成了。
12．(4分)天然种植的棉花大都是白色的。偶尔在田中也会出现一两株彩色(如棕色)的棉花，这是生物变异的结果。彩棉用于纺织，可以免去繁杂的印染工序，既降低生产成本，又减少化学物质对人体的伤害，是名副其实的“绿色产品”。现有两株白色的棉花，分别让它们作父本和母本进行杂交。结果它们的子代中有的结白色棉花，有的结棕色棉花。请回答：
(1)棉花的白色和棕色在遗传学上是一对 。
(2)在上述棉花的遗传中，显性基因控制的性状是 。
(3)如果用B和b分别来表示显性和隐性基因，则上述杂交的子代中，结白色棉花和结棕色棉花的基因型分别是 、 。
13．(5分)徐州市区的故黄河曾因污染而失去应有的生态功能。近年来，由于当地政府加强了对故黄河的综合治理，使该河的生态系统又得到了重新恢复和改善。如今，两岸花红柳绿，鱼游虾戏，成了市内一道亮丽的风景线。然而，河水的质量到底如何河里的鱼虾是否可以安全食用对于这些问题，市内某中学的几位同学开展了一项调查研究。他们首先选取该河中5种不同的生物，对它们消化道内的食物组成进行了分析；然后又请当地环保部门的专家对这5种生物体内某种有毒物质(在生物体内不易分解)的含量进行了测定；最后将研究数据整理绘制成下表。
生物种类 消化道内食物组成 千克体重某种有毒物质含量／mg
某鱼 小虾 97
河蚌 水蚤、小球藻 55
小球藻 4
小虾 水蚤、小球藻 ． 32
水蚤 小球藻 16
请根据表中内容，分析回答：
(1)写出一条最长的食物链： 。
(2)在该生态系统中，最重要的生物成分是： 。
(3)根据表中生物间的相互关系，请解释该河中某鱼体内的有毒物质含量为什么最高
(4)如果人们在该河中大量地捕鱼捉虾，从生态学的角度看，将会造成的后果是
。
(5)根据生态学原理及目前状况，你认为故黄河还应该如何治理(至少写2条)
14．(5分)随着工业化的快速发展及化石燃料的大量使用，人们向大气中排放的二氧化硫等有害气体逐年增多。二氧化硫进入大气后，可在局部地区富集并在水的凝集过程中形成硫酸等酸性物质，随着雨水降落下来，这就是“酸雨”(pH<5．6)。酸雨的酸性程度可用pH值来表示，一般说来，pH值越小，其酸度就越大。酸雨对植物的生长有没有影响生物兴趣小组的同学想以小麦种子为材料，探究酸雨对种子萌发的影响。请你参与进来，和小组的同学一起探究。
一、提出问题：小组同学提出的问题是： 。
二、作出假设：略 ．
三、材料用具：大小相同的培养皿五只，大小、饱满程度相同的小麦种子100粒，小纱布10块， 以硫酸为材料配制的pH＝5、pH＝4、pH＝3、pH＝2的“酸雨”各20mL等。
四、方法步骤：
(1)将5只培养皿分别编号为A、B、C、D、E。
(2)在5只培养皿里各铺一块小纱布，其上均匀各撒20粒小麦种子，然后再用小纱布盖好。
(3)向A培养皿中均匀喷洒清水(pH＝7)5mL，使之刚好将要淹没种子。
(4)向B,C,D,E四只培养皿中分别喷洒pH=5、pH＝4、pH＝3、pH＝2的“酸雨’’各——mL。
(5)盖上培养皿，将它们都放在适于种子萌发的环境里。
五、预测结果并得出结论：在实验结果得到之前，我们可以预测可能的实验结果并得出相应结论。
预测1：随着pH值逐渐减小，种子萌发率逐渐升高，说明酸雨对种子的萌发有——作用。
预测2．
预测 3
徐州市2009届初中毕业、升学考试
生物参考答案及评分标准
一、选择题：1．D 2 A 3．D 4．B 5．C 6．D 7．B 8．C 9．A 1 O．A
二、综合题：以下各题，每空1分，共19分；卷面1分，合计20分。
11．(1)小肠(唯一) (2)肺(唯一)
(3)④肾小球(唯一且标号和名称不全对不得分) 滤过(唯一)
(4)二氧化碳和水(二氧化碳和水写不全不得分)
12．(1)相对性状(唯一) (2)棉花的白色(或只答白色可得分)
(3)BB或(和)Bb(写不全不得分） bb(唯一)
13． (1)小球藻_水蚤_小虾_某鱼(唯一) (2)小球藻(唯一)
(3)某鱼是该生态系统内的最高消费者，有毒物质随食物链而富集
(必须指出有毒物质可随食物链而富集才可得分)
(4)破坏现有的生态平衡(或生态失衡)
(5)一是减少污染物摊放，二是增加生物的种类和数量，三是不断更新水体；四是禁止鱼捉虾(答出其中之二即可得分)
14．一．酸雨对小麦种子的萌发有影响 (或酸雨对小麦种子的萌发有怎么样的影响吗)(必须是问句)
四、(4)5(唯一)
五、预测1：促进(唯一)
预测2：随着pH值的逐渐减小，种子的萌发率逐渐降低，说明酸雨对种子的萌发有抑制作用。
预测 3：随着pH值的逐渐减小，种子的萌发率没有变化，说明酸雨对种子的萌发没有影响。(预测2和预测3两种情况可以前后调换，但内容不变)
注：括号内小字部分为评分标准或要求，其他是参考答案
卷面分得分要求：有下列情况之二者不得分；
1文字与符号书写不规范、不整洁、不清晰，不符合生物学表达惯例。
2．不在规定区域内答题，乱涂乱画，分辨不清。
3．表述不清晰、不切合题意作答，书写无关内容。
高贵云：浅谈表格比较法在初中生物教学中的应用
作者：高贵云 文章来源：中国教育 点击数：71 更新时间：2007-10-25
通过比较(对比)帮助学生掌握概念、掌握知识，已是许多学科常用的教学方法。
人在单位时间内所记的对象数量有一定的限度。要求学生在一节课中把所讲过的材料都记住是不现实的，也没有这个必要。为了提高记忆效果，教师应在讲述的基础上提供精简而概括的记忆材料。
在生物教学中，通过表格进行比较、归纳不失为学生提供精简而概括的记忆材料的一个重要方法。它对学生概念的建立，知识体系的形成都有着其他方法难以替代的作用。它使比较间的事物在表格中占据相应的位置，使比较的因素(目的要求)明确，易于对比，显得清晰而有条理性，有时还体现出很强的系统性。
2006年生物实验突破
基础一学生基础实验(必修本)
生物学是一门以实验为基础的学科，生物学的基础理论都是在实验基础上建立和发展起来的。近年来高考对实验的考查所占分值逐渐增加，因此要特别重视生物实验知识的学习和操作技能的训练。整个高中阶段的基础实验主要集中在高二必修本中，除研究性课题外，必修本实验有12个，还有2个实习内容。这些实验和实习，按实验性质分，7个是生化类的，6个是生理类的，5个是观察类的，1个(实习)是调查类的；按实验特点分，10个是验证类的，4个是探索类的。详见下表：
分类
序号
实验名称
实验性质
特点
学习侧重点
目标要求
观察类
生理类
生化类
调查类
验证类
探索类
实验类
1
生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
√
√
控制条件、分析结果
B
2
用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动
√
√
高倍镜的使用
A
3
观察植物细胞的有丝分裂
√
√
装片制作
A
4
比较过氧化氢酶和 Fe3+的催化效率
√
√
选择材料、控制条件分析结果
B
5
探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用
√
√
同上
B
6
叶绿体中色素的提取和分离
√
√
同上
A
7
观察植物细胞的质壁分离与复原
√
√
√
同上
B
8
植物向性运动的实验设计和观察
√
√
同上
B
9
DNA的粗提取与鉴定
√
√
同上
A
10
制作DNA双螺旋结构模型
√
√
DNA分子结构特点
A
11
性状分离比的模拟实验
√
√
基因分离
B
12
观察 SO2对植物的影响
√
√
√
√
同实验 4
A
实习类
1
种群密度的取样调查
√
√
√
取样调查法
B
2
设计并制作小生态瓶，观察生态系统的稳定性
√
√
√
同实验 4
B
对近几年上海、广东和江苏的高考生物试卷和全国的理科综合试卷分析发现，生物实验的考查主要有这样几种类型：
1实验问题解答类
这类试题以实验为背景，用文字、示意图、数据表格、直方图、二维坐标等形式表达，题目要求解释实验现象或结果，或者要求根据实验结果进行分析，得出实验结论。具体又可分为：
11基本操作和实验材料的选用型
这类实验题主要考查实验基本操作技能和对实验材料的选用。基本操作包括使用各种玻璃器皿和其他工具、仪器，如放大镜和显微镜的使用、水浴加热、研磨和过滤、层析法、引流法、试剂配制、制作玻片标本等，以及进行操作、观察、记录、绘图等。实验材料的选择正确与否，关系到一些实验能否成功，如"观察植物细胞的有丝分裂"这个实验，根尖的选取要选分生区而不是伸长区。对实验2、3、6、7、9的考查涉及这种题型。
侧重考查：仪器和工具的使用方法，观察和记录方法，实验材料在实验中的作用。
12实验原理的理解应用和实验结果的推断处理型
这类实验题是高考的常考题型，既考查了与实验原理相关的知识，又考查了观察、分析和推断能力。如2004年北京理综第27题、江苏生物第35和42题、上海生物第39和42题、2002年广东第34和37题等。
侧重考查：实验原理的理解以及在实际中的应用，实验操作程序，对实验数据的处理和实验结果的推断预测。
2实验设计类
这是对实验考查高层次的要求。通过考查学生对实验原理、实验数据、实验现象和实验结论等内容的分析、归纳和总结，来考查理解能力、分析能力、综合能力、收集处理信息能力、逻辑思维能力、语言文字表达能力等综合素质。这种题型在近年高考卷中逐渐多了起来，说明对实验的考查逐渐由知识型过渡到能力型。从实验目的和实验手段上看，实验设计包括验证性、探究性和开放性实验设计；从考查题型上看，可分为实验方案评价型、补充实验过程型和完整实验方案设计型。对实验5、8和两个实习的考查多是这种题型。
侧重考查：知识的综合应用，创新能力。
3研究性课题类
见重点四--课题研究。
在可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述错误的是
A马铃薯块茎中含有较多的糖且近于白色，可用于进行可溶性还原糖的鉴定
B花生种子富含脂肪且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的好材料
C大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料
D鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料
解析本题考查学生是否理解本实验的选材要求。用于可溶性还原糖鉴定的材料的要求是：①含糖量高，且必须是还原性的糖(如葡萄糖、麦芽糖、果糖)。②颜色较浅或近于白色，便于观察。蔗糖没有还原性，淀粉一般不溶于水且无还原性，它们都不符合要求。马铃薯块茎中含有的糖是淀粉，不合适。用于脂肪鉴定的材料是富含脂肪的种子，花生种子富含脂肪，是用于脂肪鉴定的理想材料。用于蛋白质鉴定的材料是富含蛋白质的生物组织，常用的是大豆和鸡蛋清(蛋白)。 答案A
说明选材时，首先要考虑生物组织中待鉴定物质的含量，其次考虑是否对材料大小有特殊要求。选材时要把握一个原则，即根据实验的原理和目的以及实验材料在实验中的作用来选取，要符合和满足实验要求：现象明显、容易操作、便于观察、来源广泛、容易获得。
回答下列实验操作和观察的有关问题：
(1)下面是几位同学在实验中的做法，其中操作正确的是_________。
甲：将反光镜对着太阳光以使视野内达到最大亮度
乙：观察切片时，两眼睁开，左眼观察，右手画图
丙：用卫生纸擦拭目镜
丁：使用低倍镜已看到细胞，觉得有些模糊，于是试着调试细准焦螺旋
戊：使用低倍镜看不到细胞，于是换高倍镜期望能看到细胞
己：为了用高倍镜观察低倍镜视野中左上方的一个细胞，在换用高倍镜前应先向右下方移动装片
(2)下列关于实验观察的叙述，错误的是_________。
A低倍镜下看到的洋葱根尖分生区细胞呈正方形；与低倍镜相比，高倍镜下视野变暗，但细胞变大，数目减少
B纸层析法分离出的色素，从上到下的顺序依次是：胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b
C蛋白质与双缩脲试剂反应生成紫色物质
D将斐林试剂加入到蔗糖溶液中，加热后出现砖红色沉淀
E观察细胞质流动时，应以液泡的运动作为参照物；每个细胞的细胞质流动的方向是一致的，且流动速度与温度等条件无关
F在紫色洋葱发生质壁分离复原的过程中，液泡由小变大，紫色变浅
解析(1)题考查显微镜的使用。对光时不能将反光镜对着太阳光，否则可能会刺伤眼睛。当镜头不干净时，要用擦镜纸擦拭镜头，不能用卫生纸。高倍镜的视野更小，如果低倍镜下看不到，高倍镜下更看不到。显微镜成像原理是光学成像原理，像与物是倒反关系，装片移动方向与看到的实际操作的方向相反，因此装片应向左上方移动。(2)题考查对实验现象的观察。A正确，根尖分生区细胞的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的正在分裂；高倍镜的特点是：物像大、数目少、视野暗。B正确，由于四种色素在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上的扩散速度不同而分离，从上到下依次是：胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b。C正确，蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，故能与双缩脲试剂发生反应，形成紫色或紫红色的络合物。D错误，蔗糖是非还原糖。E错误，液泡颜色和运动都不明显，不宜作为参照物；每个细胞的细胞质流动的方向是不一样的，且速度与温度等条件有关。F正确，质壁分离复原的原因是细胞渗透吸水，细胞液浓度变小，紫色变浅。 答案(1)乙、丁(2)D、E
说明要想具有显微镜的使用技能，先要熟悉显微镜的构造，理解成像原理，掌握亮度调节(反光镜和光圈)和清晰度调节(粗细准焦螺旋)，弄清高倍镜与低倍镜的特点。多操作，细心观察和体验。
将1 g淀粉放在烧杯中加水煮沸，冷却后，取2 mL淀粉悬浮液和2 mL唾液装入一个玻璃纸袋(半透膜)内，扎紧袋口。然后将它放入盛稀碘液(浅褐色)的烧杯中，袋的扎口露出液面，在37℃条件下保持20 min左右。上述过程中依次出现的现象是：玻璃纸袋内最初无色→逐渐变蓝色→一段时间后又变成无色，而玻璃纸袋外的液体始终是浅褐色。请分析出现上述现象的原因。
(1)最初无色的原因是_________________________________________________。
(2)逐渐变蓝色的原因是___________________________________________________。
(3)一段时间后又变成无色的原因是___________________________________________。
(4)玻璃纸袋外液体始终是浅褐色的原因是____________________________________。
(5)已知唾液的pH为68,胃液(含胃蛋白酶)的pH为20。若将唾液和胃液混合，并使混合液的pH为3，混合液混合一段时间后，混合液中新增加的物质为__________，简述理由：___________。
解析这是一道学科内跨章节综合题，重点考查了三个方面的知识：碘遇淀粉变蓝色；唾液淀粉酶催化淀粉的最佳温度为37℃左右，最适pH为68；半透膜的特性是只能让某些小分子物质通过，如碘，而像淀粉这样的大分子物质是不能通过的。玻璃纸袋内由无色变为蓝色，是因为碘液进入玻璃纸袋内遇到淀粉发生了颜色反应，一段时间后又变为无色，是因为在淀粉酶的作用下，淀粉被完全水解了。唾液和胃液混合，混合液的pH为3，使唾液淀粉酶失去活性，胃蛋白酶的活性虽然已降低，但还有一定的活性。在胃蛋白酶的作用下，唾液淀粉酶被水解成多肽，因此增加的物质是多肽。
答案(1)碘液没有进入玻璃纸袋内(2)碘液逐渐进入到玻璃纸袋内，遇淀粉液显蓝色
(3)玻璃纸袋内的淀粉逐渐被水解成麦芽糖，蓝色渐渐褪去
(4)淀粉分子比较大，不能穿过玻璃纸袋
(5)多肽当唾液和胃液混合后，pH为3的时候，唾液淀粉酶失活，不能消化淀粉，胃蛋白酶仍有活性，但胃蛋白酶不能消化淀粉，此时的唾液淀粉酶被胃蛋白酶消化成多肽。
试根据所提供的材料建立一个微型密闭生态系统(不必做对照实验)，并回答有关问题。
供选材料：A黑玻璃瓶B透明玻璃瓶C橡胶塞及密封胶D河水及河泥E蒸馏水F无机盐G新鲜水藻H死水藻I活小鱼
(1)本实验不可缺少的材料是(填代号)__________________。
(2)生态系统建立起来后应放在____________适宜，并且有_____________的环境中才能较长时间不需喂食和通氧。理由是__________________________。
(3)该生态系统的能量流动是从开始的，流经这个生态系统的总能量是。
解析本题属于原理应用型实验题，考查生态系统的成分、结构和功能等知识的应用。要建立一个微型密闭生态系统，肯定需要橡胶塞及密封胶；生态系统只是物质上自给自足，能量来自生产者固定的太阳能，所以玻璃瓶必须是透明的，植物见光才能进行光合作用；生态系统必须有三大成分：生产者、消费者和分解者，新鲜水藻可以作生产者，活小鱼作消费者，分解者来自河泥；水不能用蒸馏水，因为蒸馏水溶氧不足；瓶中装水不能太多，要留有一定空间，以便O2和CO2的循环。只有保证合理的物质循环和能量流动，生态瓶中的生物才能存活较长时间。
答案(1)B、C、D、G、I (2)温度光照水藻通过光合作用为小鱼提供O2和养料，小鱼通过呼吸作用为水藻提供光合作用所需的CO2，排泄物被河泥中的分解者分解成小分子物质再被水藻利用(3)水藻的光合作用水藻固定的太阳能
说明制作小生态瓶时应该注意以下问题：
(1)在制作完成的小生态瓶中所形成的生态系统，必须是密闭的。
(2)小生态瓶中的各种生物之间以及生物与无机环境之间，必须能够进行物质循环和能量流动。
(3)小生态瓶必须是透明的，既让里面的植物见光，又便于观察。
(4)小生态瓶中投放的生物，必须具有很强的生活力。投放的动物数量不宜过多，以免破坏食物
链 (5)生态瓶宜小不宜大，如果模拟的是微型池塘生态系统，则瓶中的水量应为容器的4/5。
(6)小生态瓶制作完毕后，应该贴上标签，写上制作日期，然后将小生态瓶放在有较强散射光的地方，不能将小生态瓶放在阳光直射的地方，否则会导致水温过高，而使水草死亡。
(7)在整个实验过程中，不要随意移动小生态瓶的位置。
生态系统稳定性的观察方法：
(1)设计一份观察记录表，内容包括植物、动物的生活情况，水质变化(由颜色变化进行判别)，基质变化。
(2)每天观察一次，同时做好观察记录。
(3)如果发现小生态瓶中的生物已经全部死亡，说明此时该生态系统的稳定性已经被破坏，观察结束。这时应把从开始观察到停止观察所经历的天数记录下来。
为探究二氧化硫对植物叶片的影响，请根据所给材料和用具(品)设计出实验的方法和步骤，预测可能的实验结果，并分别得出相应的结论。
材料用品：长势相同的2株盆栽黄瓜幼苗，小烧杯1个，大小相同的玻璃罩2个，玻璃板2块(比玻璃罩略大)、稀硫酸、凡士林、水。
已完成的实验步骤：称取一定量的亚硫酸钠(亚硫酸钠与稀硫酸反应生成二氧化硫)，并对幼苗、玻璃罩和玻璃板进行标号。在小烧杯中加入稀硫酸2 mL，在1号和2号玻璃板边缘涂上凡士林。
待完成的实验步骤：
①______________________________________________________；
②______________________________________________________；
③______________________________________________________。
可能的实验结果和相应的实验结论：
①______________________________________________________；
②______________________________________________________；
③______________________________________________________。
解析本题既属于补充实验过程的探究性实验设计题，又属于结论开放型实验设计题。补充实验步骤时，注意与前面已有的步骤相衔接，要理解前面步骤的意图，按照这个设计思路，遵照实验设计的基本原则，完成后续步骤(见答案)。
结论开放型试题的特点是试题改变了传统试题的"答案惟一"的做法，变"答案惟一"为"答案不惟一"。此类试题的任何一个答案都能完成试题的指令，符合并满足试题的全部条件和要求，因此，对可能的实验结果应全部预测到，并进行分析，得出相应的结论。不能用习惯性思维，认为二氧化硫对植物的叶片有伤害作用。
答案 待完成的实验步骤：
①将1号和2号幼苗分别放在1号和2号玻璃板中央，将小烧杯放在1号幼苗旁
②将称好的亚硫酸钠迅速投入到小烧杯中，立即扣上玻璃罩，同时将2号幼苗用2号玻璃罩扣上 ③将上述实验装置放在向阳处，定期观察其叶片的变化
可能的实验结果和相应的实验结论：
①1号和2号幼苗的叶片均正常或异常(或答差异不显著)，说明该种植物叶片不受二氧化硫的影响(或二氧化硫的量不够)(注：将"异常"答成"变黑、发黄"或"出现病症"、"受到伤害"均给分，下同)
②1号幼苗的叶片异常，2号幼苗的叶片正常(或答差异显著)，说明二氧化硫对植物的叶片有伤害作用
③1号幼苗的叶片正常，2号幼苗的叶片异常(或答差异显著)，说明一定浓度的二氧化硫对叶片生长有益
说明答题要领：认真分析题干中提供的信息，透过背景材料找出该实验涉及的知识点，确定解决问题的目标；辨别实验类型，把握解题的方向和关键。在实验设计时，先要对所设计的实验有一个整体设想，遵循和体现实验设计的"三大原则"(对照性原则、等量性原则、单因子变量原则)和"四性"(科学性、安全性、可行性和简约性)，文字叙述力求简练、准确、科学。
现有长势相当的燕麦幼苗若干，请用适当的实验材料，设计实验证明植物的向光性与顶端有关。写出实验步骤，预测实验结果并得出结论。
实验原理：植物的感光部位是胚芽鞘尖端，单侧光能改变生长素的分布。
实验步骤： (1)_______________________________________________；
(2)_______________________________________________；
(3)_______________________________________________。
结果预测及分析：____________________________________________________；
实验结论：__________________________________________________________。
解析植物的向光性就是植物在单侧光的作用下，向光源方向弯曲生长的特性。燕麦感受光刺激的部位是胚芽鞘尖端，尖端产生生长素并向下运输，促进胚芽鞘尖端下面一段的生长。本实验设计要解决的问题是：尖端是否是感光部位及其与向光弯曲的关系。要解决这个问题，可仿照教材上的有关实验进行设计：让尖端感光或不感光(对照)，让尖端下部感光或不感光，观察生长情况。
答案(1)取3株燕麦幼苗分别标号1、2、3(2)对1号幼苗不作处理，2号幼苗的顶端用黑纸帽套住，3号幼苗用黑纸帽套在尖端下面一段(3)将3株幼苗放在单侧光条件下，观察结果
结果预测及分析： 1号和3号幼苗向光弯曲生长，2号幼苗直立生长，说明感光部位在胚芽鞘尖端 实验结论：植物的向光性与顶端有关
说明像向光性这类经典实验，实验原理等相关知识没有难度，只要按照实验设计方法，运用设计原则进行仿造(设计)即可。
设计一个实验，证明ATP是生物的直接能源物质。
要求：(1)自选器材、试剂；(2)写出实验步骤；(3)预测实验结果；(4)设置对照实验。
解析这是一道条件开放型实验设计题。可以从课题要求入手，进行逆向思维。按照"能源物质→发光→萤火虫→发光原理→选择器材→设计步骤"的思路设计实验方案。
(1)选择萤火虫的发光器为实验材料，主要是因为它发光的现象容易观察；(2)将发光器捣碎，增大发光细胞与溶液的接触面积，加快化学反应速率；(3)蒸馏水不是能源物质，葡萄糖虽然是细胞的主要能源物质，但不是直接能源物质，因此，可用葡萄糖、蒸馏水作对照实验，它们都不会使熄灭的离体发光器重新发光。
本实验过程中的现象是：(ATP供能)发光→(ATP耗尽)萤光熄灭→(能否提供ATP)决定发光器是否重新发光。
答案(1)器材和试剂：培养皿，试管，活萤火虫(取其尾部发光器备用)，ATP制剂，01%的葡萄糖溶液，生理盐水，蒸馏水。
(2)实验步骤： ①取三支试管，分别标号A、B、C。
②分别往试管中加入等量的捣碎的发光器和生理盐水，观察现象。当发光器熄灭时，立即进行下一步。
③分别往试管A、B、C中加入ATP制剂、01%的葡萄糖溶液、蒸馏水各5 mL，观察现象。
(3)结果预测：试管A：恢复发光，试管B：不再发光，试管C：不再发光。
(4)对照实验：B、C是对照实验组。
说明这类题要求考生要有较强的实验能力和较高的素质。其实只要注意知识的联系和灵活运用，平时加强这方面的练习，就不会束手无策。
1有时候，由于实验材料用品所限而需要设法替代。下列各项中正确的是
A做植物细胞有丝分裂实验时，可用蒜叶代替洋葱
B做植物细胞质壁分离和复原实验时，可用30%的食盐溶液代替30%的蔗糖溶液
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