看了一下CHSP60DP钢的成分和参数,这个并不能叫做汽车钢材,只是可以用在汽车制造中而已,钢材没有特定用在汽车上的。
CHSP60DP是一种很普通的冷轧钢,DP是Dual Phase Steels的缩写,中文的意思是双相钢,你可以到德松模具钢网站上查找相关详细资料,双相钢的显微组织主要为铁素体和马氏体,马氏体组织以岛状弥散分布在铁素体基体上双相钢具有低的屈强比和较高的加工硬化指数以及烘烤硬化值,是结构类零件首选材料之一。
复相钢: Complex Phase Steels,缩写CP,复相钢的显微组织主要为铁素体和(或)贝氏体组织。在铁素体和(或)贝氏体基体上,通常分布少 量的马氏体、残余奥氏体和珠光体组织。通过添加微合金元素 Ti 或 Nb,形成细化晶粒或 析出强化的效应。这种钢具有非常高的抗拉强度。与同等抗拉强度的双相钢相比,其屈服 强度明显要高很多。这种钢具有较高的能量吸收能力和较高的残余应变能力。
环境作用于生物,生物适应环境而生存同时也反作用于环境
遗传物质的变异是进化的内因,环境对遗传物质的变异起到诱发与筛选的作用,进化后的生物对环境又有反作用
具体:
1 遗传物质的变异是进化的内因
自然界存在数亿种生物,它们形态各异,种类纷繁,生物的多样性,主要就是遗传物质不同造成的同一物种遗传物质的相对稳定性保证了该物种的稳定性和连续性而遗传物质的变异为生物进化提供了可能性
11 基因突变和染色体畸变
中性学说在对生物大分子的量化分析后认为,基因随时会产生大量的中性突变对于编码蛋白质的结构基因而言,当三联体密码中的 1 个核苷酸(尤其是第 3 位)发生置换往往不会使氨基酸类型发生改变蛋白质的保守性替换又指出,即使改变了个别氨基酸残基,但该残基是在可变区域内这种变化也并不影响生命体的生存价值此外,结构基因只是整体 DNA 序列中的小部分,还有大量不编码蛋白质的序列,如调节基因、重复序列、内含子、假基因和退化基因等由此,木村资生( MottoKimura )等人结论生物进化在分子水平上起主导因素的是那些对生物生存即不有利,又无害的“中性”基因但如何界定“绝对”的中性突变,仍然是一个复杂的问题调节基因、内含子、重复基因、假基因等非编码蛋白质基因虽然不直接指导蛋白质的合成,但它们与各种环境因素相结合通过调节转录,翻译的过程来发挥作用有研究表明:由猿到人的变化,主要是调节基因的变化,不是结构基因的变化 [1] 许多实验证据也支持了 Gilbert 提出的关于内含子功能的假说,认为结构基因是通过内含子序列之间的重组,将外显子聚集在一起而产生的,即内含子是原初基因重新组合过程的残留物此外,就目前人们的认识来看,内含子还具有影响基因的表达调控;调控 RNA 的剪接;编码特定的蛋白质;保护基因家族等功能 [2] 同属于重复基因的 rRNA 和 tRNA 在蛋白质翻译中也具有各自的功能假基因可通过接受邻近功能基因的片段或者由于功能基因移动而获得功能假基因与功能基因之间发生外显子交换的例证已在小鼠 ψ a3 中有所发现 [3] 一些单个核苷酸被置换后,也许不能改变氨基酸的类型,但它通过化学键对邻近核苷酸的作用是不容忽视的它能改变邻近核苷酸的置换率因此,我认为将一些基因突变定义为绝对中性是欠妥当的
染色体畸变包括染色体结构和数目的变化,它与基因突变一样在进化中占有重要的位置染色体畸变牵涉到 DNA 分子上较大范围内的变化,影响基因间的连锁和交换,改变基因表达的方式,产生生殖隔离机制,加速物种分化的过程等
12 基因重组
病毒的进化很难用渐进突变累积来解释,病毒与宿主或其它病毒之间的基因重组引起的飞跃式突变起了很大的作用 [4] 事实上,在微生物间由于转化、接合和转导引起的基因重组发生的频率比基因突变高达一万倍 [5] 由此可见,基因重组是病毒及微生物进化的一种主要方式对于高等生物来说通过食物摄入,有性生殖,微生物介导也能获得外源核酸,为基因重组提供必须的物质要素张光明等人 [6] 提出微生物能有效介导基因重组,从原核生物到真核生物中广泛存在的转座作用可能是微生物介导的基因重组的一种重要方式微生物先感染一种生物,携带上该种生物的遗传物质,再感染另一种生物,将所携带的遗传物质转移到另一种生物的基因组中因为另一种生物本身已具有完善稳定的遗传机制,这种基因重组获得表达并固定下来的机率并不是很大,但不可否认基因重组在生物进化中起着重要作用
2 环境对遗传物质变异的诱发与筛选作用
从生态学的角度来说,任何生物都生存在总体稳定又时时处于变化之中的生态环境中,与环境存在物质、能量、信息的交流环境是生物进化的外因,它诱导遗传物质发生变异,又对其进行筛选,经过时间的积累达到生物的进化这里指的环境包括生物环境和非生物环境,宏观环境和微观环境是指所有对研究主体有影响的外界因素
21 环境诱发遗传物质变异
就化学环境而言,生物体从环境中摄入各种物质,经分解、吸收作用后,送入细胞中,这些物质中的某些化学成分与元素可能会与遗传物质的组成物发生反应,或使遗传物质的结构发生变化某些化学物质直接作用于生物体的表面,也可能引起表面细胞的破坏,并使遗传物质发生变异
物理环境能引起遗传物质变异的最主要因素是射线生物生活在地球上,无时无刻不受宇宙射线和地球上的放射性物质发出的射线的照射科学家作了统计,一个人一年平均受的射线照射在人体中可把大约十亿个分子的化学键打开 DNA分子在人体中所占比例很小,计算结果,每年每人平均损伤约200个DNA分子 [7] 若生物偶然接触到能量更大的射线则引起突变的机率更大
现在,许多科学家利用遗传工程技术,将 DNA上的某些片段人为的进行改变,培育出有利于生产经济的新品种进行了转基因改造的动植物及微生物若被推广,则为该种生物的进化提供了一定的物质可能性新品种与近源野生种的杂交,有可能使人为改造过的基因片段得到传播,并且固定下来这在植物中更为常见也可以说这是人为环境对生物进化的影响微生物介导的基因重组而使生物进化,则是自然的生物环境使遗传物质发生变化
获得性状是否能遗传一直是生物进化研究中争论的焦点如果获得性状可遗传,就可以进一步说明环境可引起遗传物质变异生物学家已发现了不少获得性遗传的实例例如,当用一种酶把枯草杆菌的细胞壁去除后,在特定的生长条件下,它们可以继续繁殖,后代也是无壁的,并且这种状态可以稳定地遗传下去,只有把它们放在另外的一种生长条件下,细胞壁才会重新生长出来 [8] 逆转录酶的发现,也证实了获得性是有遗传可能性的“生命环境均衡论”的学者们认为 :如果生活的环境条件改变了,生活也就发生改变,那么,动植物将采取适应其生活的性状,并且在这种性状永存的情况下,遗传因子也与之相应发生变化但是必须经过地质时代这样漫长的时间单位越来越多的证据证明获得性是可遗传的,但并不能认为获得性遗传是生物进化的主要方式因为在环境条件未发生剧烈变化的很长时期,生物进化的脚步并没有完全停止生物进化是许多因素共同作用的结果,归根到底都必须是遗传物质发生了改变,只有这样变异才能一代一代延续下去,环境只能是进化的外因
此外,有些科学家认为多数突变是自发的,完全随机的,这种看法不全面 DNA链处于细胞中,它必然生活在细胞内环境中氨基酸残基的脱落、置换、加入无不伴随着肽键的断裂,这就需要能量和物质的交流,这一系列变化都与细胞内环境密切相关
22 环境对遗传物质的筛选
在分子水平上环境对遗传物质的自然选择是有建设性作用的 DNA链上的某一位点是处在其它基因位点的包围之中的,如果这一位点发生了变异要受到此位点周围其它基因的约束和干预此外还要受到细胞核内环境中各种化学物质和染色体上组蛋白(只有真核生物具有)与非组蛋白的调控总之,在一个新基因型进化初期,将选取提高个体适合度的有利突变日本的太田(Ohta,1979)说,在分子水平上自然选择的主要作用是保持一个分子的现有机能,使它免受有害突变的影响 [8]
当遗传物质的变异通过了分子水平的自然选择后,还要接受更高级别的检验不管 DNA上的突变位点是直接指导蛋白质合成,还是间接调控、影响转录和翻译的过程,绝大多数遗传物质的变异终究体现在蛋白质的变化上多肽链上一个或多个氨基酸残基的变化可能影响蛋白质的空间构象及功能多肽链在折叠时追求能量最低原则,完全折叠后的肽链要使它的空间构象有利于其功能的更好发挥如果氨基酸残基的改变引起了蛋白质功能的变化,那改变后的蛋白质所发挥的功能将使生物体能更好地适应环境,提高其生存能力以上就包括了细胞水平的自然选择,及蛋白质在发挥功能时与其功能相关的组织、器官水平的自然选择这些选择将对由遗传物质变异引起的蛋白质变化进行筛选
当遗传物质的变异最终体现在表型的差异上时,环境的作用就类似于达尔文所提出的自然选择理论了只是根据现代生物进化理论,自然选择对象不是个体,而是种群自然选择的价值在于种群基因库中基因频率的变化状况
前面提到过有些突变似乎是中性的,没有任何意义但当环境条件改变时,很有可能这些突变就不再是“中性”的了 [9] 这些储备突变在环境条件发生改变时才有机会表达近年来一些实验表明,存在着以热休克蛋白 HSP90为代表的一些分子机制,能够在一定程度上隐藏基因突变造成的表型变化 [10] 也就是说,环境可以选择一些突变,让其表达,而让另一些暂时隐藏起来通过这些隐藏的后备突变,个体有更大的机会适应变化的环境
3 生物进化后对环境的反作用
约在 27亿年前,出现了含有叶绿素,能进行光合作用,属于自养生活的原始藻类,如燧石藻、蓝绿藻等这些藻类进行光合作用所释放的氧,进入大气后开始改变大气的成分 [11] 大气中游离氧的出现和浓度不断增加,对于生物来讲有极重要的意义生物的代谢方式开始发生根本改变,从厌氧生活发展到有氧生活代谢方式的改变打打出进了生物的进化发展约在10~15亿年前出现了单细胞真核植物,以后逐渐形成多细胞生物,并开始出现了有性生殖方式由此可见,生物的进化对环境有着极强的反作用,引起环境发生改变而改变了的环境条件对生物进化的方向又有指导意义人类有极强的改造自然和利用自然的能力人类对自然环境的影响比任何一种生物都大
起源和灭绝也都是生物不适应环境,被环境所淘汰的结果
其实它们和进化是一回事,只不过是结果不同
电焊工是有辐射的,不光有辐射,另外还有臭氧、高温、噪声、触电等众多有害身体的因素,因此你必须注意做好防护措施;
焊工在现场施焊,为了安全。必须按国家规定,穿戴好防护用品。焊工的防护用品较多,主要有防护面罩,头盔,防护眼镜,防噪音耳塞,安全帽,工作服,耳罩,手套,绝缘鞋,防尘口罩,安全带,防毒面具及披肩等。
电焊的种类比较多,目前常用的有以下几种
电弧焊
电弧焊是目前应用最广泛的焊接方法。它包括有:手弧焊、埋弧焊、钨极气体保护电弧焊、等离子弧焊、熔化极 气体保护焊等。绝大部分电弧焊是以电极与工件之间燃烧的电弧作热源。在形成接头时,可以采用也可以不采用填充金属。所用 的电极是在焊接过程中熔化的焊丝时,叫作熔化极电弧焊,诸如手弧焊、埋弧焊、气体保护电弧焊、管状焊丝电 弧焊等;所用的电极是在焊接过程中不熔化的碳棒或钨棒时,叫作不熔化极电弧焊,诸如钨极氩弧焊、等离子弧 焊等。
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(1)手弧焊
手弧焊是各种电弧焊方法中发展最早、目前仍然应用最广的一种焊接方法。它是以外部涂有涂料的焊条作电极和 填充金属,电弧是在焊条的端部和被焊工件表面之间燃烧。涂料在电弧热作用下一方面可以产生气体以保护电弧 ,另一方面可以产生熔渣覆盖在熔池表面,防止熔化金属与周围气体的相互作用。熔渣的更重要作用是与熔化金 属产生物理化学反应或添加合金元素,改善焊缝金属性能。手弧焊设备简单、轻便,操作灵活。可以应用于维修及装配中的短缝的焊接,特别是可以用于难以达到的部位的 焊接。手弧焊配用相应的焊条可适用于大多数工业用碳钢、不锈钢、铸铁、铜、铝、镍及其合金。
(2)埋弧焊
埋弧焊是以连续送时的焊丝作为电极和填充金属。焊接时,在焊接区的上面覆盖一层颗粒状焊剂,电弧在焊剂层 下燃烧,将焊丝端部和局部母材熔化,形成焊缝。在电弧热的作用下,上部分焊剂熔化熔渣并与液态金属发生冶金反应。熔渣浮在金属熔池的表面,一方面可以保 护焊缝金属,防止空气的污染,并与熔化金属产生物理化学反应,改善焊缝金属的成分及性能;另一方面还可以 使焊缝金属缓慢泠却。埋弧焊可以采用较大的焊接电流。与手弧焊相比,其最大的优点是焊缝质量好,焊接速度高。因此,它特别适于 焊接大型工件的直缝的环缝。而且多数采用机械化焊接。埋弧焊已广泛用于碳钢、低合金结构钢和不锈钢的焊接。由于熔渣可降低接头冷却速度,故某些高强度结构钢、 高碳钢等也可采用埋弧焊焊接。
(3)钨极气体保护电弧焊
这是一种不熔化极气体保护电弧焊,是利用钨极和工件之间的电弧使金属熔化而形成焊缝的。焊接过程中钨极不 熔化,只起电极的作用。同时由焊炬的喷嘴送进氩气或氦气作保护。还可根据需要另外添加金属。在国际上通称 为TIG焊。钨极气体保护电弧焊由于能很好地控制热输入,所以它是连接薄板金属和打底焊的一种极好方法。这种方法几乎 可以用于所有金属的连接,尤其适用于焊接铝、镁这些能形成难熔氧化物的金属以及像钛和锆这些活泼金属。这 种焊接方法的焊缝质量高,但与其它电弧焊相比,其焊接速度较慢。
(4)等离子弧焊
等离子弧焊也是一种不熔化极电弧焊。它是利用电极和工件之间地压缩电弧(叫转发转移电弧)实现焊接的。所 用的电极通常是钨极。产生等离子弧的等离子气可用氩气、氮气、氦气或其中二者之混合气。同时还通过喷嘴用 惰性气体保护。焊接时可以外加填充金属,也可以不加填充金属。等离子弧焊焊接时,由于其电弧挺直、能量密度大、因而电弧穿透能力强。等离子弧焊焊接时产生的小孔效应, 对于一定厚度范围内的大多数金属可以进行不开坡口对接,并能保证熔透和焊缝均匀一致。因此,等离子弧焊的 生产率高、焊缝质量好。但等离子弧焊设备(包括喷嘴)比较复杂,对焊接工艺参数的控制要求较高。钨极气体保护电弧焊可焊接的绝大多数金属,均可采用等离子弧焊接。与之相比,对于1mm以下的极薄的金属的焊 接,用等离子弧焊可较易进行。
(5)熔化极气体保护电弧焊
这种焊接方法是利用连续送进的焊丝与工件之间燃烧的电弧作热源,由焊炬喷嘴喷出的气体保护电弧来进行焊接 的。熔化极气体保护电弧焊通常用的保护气体有:氩气、氦气、CO2气或这些气体的混合气。以氩气或氦气为保护气时 称为熔化极惰性气体保护电弧焊(在国际上简称为MIG焊);以惰性气体与氧化性气体(O2,CO2)混合气为保护气体 时,或以CO2气体或CO2+O2混合气为保护气时,或以CO2气体或CO2+O2混合气为保护气时,统称为熔化极活性气 体保护电弧焊(在国际上简称为MAG焊)。熔化极气体保护电弧焊的主要优点是可以方便地进行各种位置的焊接,同时也具有焊接速度较快、熔敷率高等优 点。熔化极活性气体保护电弧焊可适用于大部分主要金属,包括碳钢、合金钢。熔化极惰性气体保护焊适用于不 锈钢、铝、镁、铜、钛、锆及镍合金。利用这种焊接方法还可以进行电弧点焊。
(6)管状焊丝电弧焊
管状焊丝电弧焊也是利用连续送进的焊丝与工件之间燃烧的电弧为热源来进行焊接的,可以认为是熔化极气体保 护焊的一种类型。所使用的焊丝是管状焊丝,管内装有各种组分的焊剂。焊接时,外加保护气体,主要是CO。焊 剂受热分解或熔化,起着造渣保护溶池、渗合金及稳弧等作用。管状焊丝电弧焊除具有上述熔化极气体保护电弧焊的优点外,由于管内焊剂的作用,使之在冶金上更具优点。管 状焊丝电弧焊可以应用于大多数黑色金属各种接头的焊接。管状焊丝电弧焊在一些工业先进国家已得到广泛应用。
电阻焊
这是以电阻热为能源的一类焊接方法,包括以熔渣电阻热为能源的电渣焊和以固体电阻热为能源的电阻焊。电阻焊包括:电阻点焊,涂焊,缝焊,高频焊,闪光对焊。由于 电渣焊更具有独特的特点,故放在后面介绍。这里主要介绍几种固体电阻热为能源的电阻焊,主要有点焊、缝焊 、凸焊及对焊等。电阻焊一般是使工件处在一定电极压力作用下并利用电流通过工件时所产生的电阻热将两工件之间的接触表面熔 化而实现连接的焊接方法。通常使用较大的电流。为了防止在接触面上发生电弧并且为了锻压焊缝金属,焊接过 程中始终要施加压力。进行这一类电阻焊时,被焊工件的表面善对于获得稳定的焊接质量是头等重要的。因此,焊前必须将电极与工件 以及工件与工件间的接触表面进行清理。点焊、缝焊和凸焊的牾在于焊接电流(单相)大(几千至几万安培),通电时间短(几周波至几秒),设备昂贵 、复杂,生产率高,因此适于大批量生产。主要用于焊接厚度小于3mm的薄板组件。各类钢材、铝、镁等有色金属 及其合金、不锈钢等均可焊接。
高能束焊
这一类焊接方法包括:电子束焊和激光焊。
(1)电子束焊
电子束焊是以集中的高速电子束轰击工件表面时所产生的热能进行焊接的方法。电子束焊接时,由电子枪产生电子束并加速。常用的电子束焊有:高真空电子束焊、低真空电子束焊和非真空电 子束焊。前两种方法都是在真空室内进行。焊接准备时间 (主要是抽真空时间)较长,工件尺寸受真空室大小限 制。电子束焊与电弧焊相比,主要的特点是焊缝熔深大、熔宽小、焊缝金属纯度高。它既可以用在很薄材料的精密焊 接,又可以用在很厚的(最厚达300mm)构件焊接。所有用其它焊接方法能进行熔化焊的金属及合金都可以用电子 束焊接。主要用于要求高质量的产品的焊接。还能解决异种金属、易氧化金属及难熔金属的焊接。但不适于大批 量产品。
(2)激光焊
激光焊是利用大功率相干单色光子流聚焦而成的激光束为热源进行的焊接。这种焊接方法通常有连续功率激光焊 和脉冲功率激光焊。激光焊优点是不需要在真空中进行,缺点则是穿透力不如电子束焊强。激光焊时能进行精确的能量控制,因而可 以实现精密微型器件的焊接。它能应用于很多金属,特别是能解决一些难焊金属及异种金属的焊接。
钎焊
钎焊的能源可以是化学反应热,也可以是间接热能。它是利用熔点比被焊材料的熔点低的金属作钎料,经过加热 使钎料熔化,靠毛细管作用将钎料及入到接头接触面的间隙内,润湿被焊金属表面,使液相与固相之间互扩散而 形成钎焊接头。因此,钎焊是一种固相兼液相的焊接方法。钎焊加热温度较低,母材不熔化,而且也不需施加压力。但焊前必须采取一定的措施清除被焊工件表面的油污、 灰尘、氧化膜等。这是使工件润湿性好、确保接头质量的重要保证。钎料的液相线湿度高于450℃而低于母材金属的熔点时,称为硬钎焊;低于450℃时,称为软钎焊。根据热源或加热方法不同钎焊可分为:火焰钎焊、感应 钎焊、炉中钎焊、浸沾钎焊、电阻钎焊等。钎焊时由于加热温度比较低,故对工件材料的性能影响较小,焊件的应力变形也较小。但钎焊接头的强度一般比 较低,耐热能力较差。钎焊可以用于焊接碳钢、不锈钢、高温合金、铝、铜等金属材料,还可以连接异种金属、金属与非金属。适于焊 接受载不大或常温下工作的接头,对于精密的、微型的以及复杂的多钎缝的焊件尤其适用。
其它方法
这些焊接方法属于不同程度的专门化的焊接方法,其适用范围较窄。主要包括以电阻热为能源的电渣焊、高频焊 ;以化学能为焊接能源的气焊、气压焊、爆炸焊;以机械能为焊接能源的摩擦焊、冷压焊、超声波焊、扩散焊。
(1)电渣焊
如前面所述,电渣焊是以熔渣的电阻热为能源的焊接方法。焊接过程是在立焊位置、在由两工件端面与两侧水冷 铜滑块形成的装配间隙内进行。焊接时利用电流通过熔渣产生的电阻热将工件端部熔化。根据焊接时所用的电极形状,电渣焊分为丝极电渣焊、板极电渣焊和熔嘴电渣焊。电渣焊的优点是:可焊的工件厚度大(从30mm到大于1000mm),生产率高。主要用于在断面对接接头及丁字接头 的焊接。电渣焊可用于各种钢结构的焊接,也可用于铸件的组焊。电渣焊接头由于加热及冷却均较慢,热影响区宽、显微 组织粗大、韧性、因此焊接以后一般须进行正火处理。
(2)高频焊
高频焊是以固体电阻热为能源。焊接时利用高频电流在工件内产生的电阻热使工件焊接区表层加热到熔化或接近 的塑性状态,随即施加(或不施加)顶锻力而实现金属的结合。因此它是一种固相电阻焊方法。高频焊根据高频电流在工件中产生热的方式可分为接触高频焊和感应高频焊。接触高频焊时,高频电流通过与工 件机械接触而传入工件。感应高频焊时,高频电流通过工件外部感应圈的耦合作用而在工件内产生感应电流。高频焊是专业化较强的焊接方法,要根据产品配备专用设备。生产率高,焊接速度可达30m/min。主要用于制造管 子时纵缝或螺旋缝的焊接。
(3)气焊
气焊是用气体火焰为热源的一种焊接方法。应用最多的是以乙炔气作燃料的氧-乙炔火焰。由于设备简单使操作 方便,但气焊加热速度及生产率较低,热影响区较大,且容易引起较大的变形。气焊可用于很多黑色金属、有色金属及合金的焊接。一般适用于维修及单件薄板焊接。
(4)气压焊
气压焊和气焊一样,气压焊也是以气体火焰为热源。焊接时将两对接的工件的端部加热到一定温度,后再施加足 够的压力以获得牢固的接头。是一种固相焊接。气压焊时不加填充金属,常用于铁轨焊接和钢筋焊接。
(5)爆炸焊
爆炸焊也是以化学反应热为能源的另一种固相焊接方法。但它是利用炸药爆炸所产生的能量来实现金属连接的。在爆炸波作用下,两件金属在不到一秒的时间内即可被加速撞击形成金属的结合。在各种焊接方法中,爆炸焊可以焊接的异种金属的组合的范围最广。可以用爆炸焊将冶金上不相容的两种金属焊 成为各种过渡接头。爆炸焊多用于表面积相当大的平板包覆,是制造复合板的高效方法。
(6)摩擦焊
摩擦焊是以机械能为能源的固相焊接。它是利用两表面间机械摩擦所产生的热来实现金属的连接的。摩擦焊的热量集中在接合面处,因此热影响区窄。两表面间须施加压力,多数情况是在加热终止时增大压力,使 热态金属受顶锻而结合,一般结合面并不熔化。摩擦焊生产率较高,原理上几乎所有能进行热锻的金属都能摩擦焊接。摩擦焊还可以用于异种金属的焊接。要适 用于横断面为圆形的最大直径为100mm的工件。
(7)超声波焊
超声波焊也是一种以机械能为能源的固相焊接方法。进行超声波焊时,焊接工件在较低的静压力下,由声极发出 的高频振动能使接合面产生强裂摩擦并加热到焊接温度而形成结合。超声波焊可以用于大多数金属材料之间的焊接,能实现金属、异种金属及金属与非金属间的焊接。可适用于金属 丝、箔或2~3mm以下的薄板金属接头的重复生产。(8)扩散焊 扩散焊一般是以间接热能为能源的固相焊接方法。通常是在真空或保护气氛下进行。焊接时使两被焊工件的表面 在高温和较大压力下接触并保温一定时间,以达到原子间距离,经过原子朴素相互扩散而结合。焊前不仅需要清 洗工件表面的氧化物等杂质,而且表面粗糙度要低于一定值才能保证焊接质量。扩散焊对被焊材料的性能几乎不产生有害作用。它可以焊接很多同种和异种金属以及一些非金属材料,如陶瓷等。扩散焊可以焊接复杂的结构及厚度相差很大的工件。
“紫癜也是一种常见的血液疾病,表现在皮肤上的过敏性紫癜是一种季节性比较强的疾病,每当季节转换时都是高发季节,特别是秋冬季”。徐燕丽主任说,它以全身坏死性小血管炎为主要病理改变的疾病,多发于3-10岁儿童。一般表现为皮疹、关节肿痛和胃肠道症。最为典型的症状是在四肢,尤其下肢体出现比较密集的血点皮疹,而且容易反复发作,但无传染性。
过敏性紫癜发作起来轻者关节肿痛、腹痛,重者出现便血、呕血现象,甚至发展为肠套叠、肠穿孔。如果不及时治疗,则会造成肝肾功能损害,出现血尿、蛋白尿。有的患儿还会头痛、抽搐、昏迷,甚至导致多种并发症,如脑血管炎、消化道出血和肾病综合征、紫癜性肾炎等。
及时发现:据了解,过敏性紫癜和患儿的过敏性体质有关。附着在灰尘上的细菌、海鲜类食物、动物皮毛、冷空气、花粉和含有抗生素等成分的药物等,都会造成紫癜发作。过敏性紫癜的血斑多出现在儿童下肢或臀部,不容易被家长发现。很多家长都是给孩子洗澡时无意间发现才就诊的。其病状多表现为腹痛、脚痛、呕吐,因此家长容易误把过敏性紫癜当成肠胃病或关节炎,结果延误病情。此外,家长应做好家庭卫生,尽量不养宠物,让孩子远离灰尘飞扬的环境。对孩子容易过敏的食物、药物,铭记在心,避免旧病复发。
在真核细胞中分泌蛋白进入内质网后,在伴侣分子、糖基化酶和氧化还原酶调控下进行折叠。正确折叠的蛋白被输送到高尔基体,在这里进行蛋白修饰,然后被分泌到细胞外。过量表达的外源蛋白、非正确折叠蛋白、错误折叠蛋白、效率低下的分泌蛋白或其他有害的分泌蛋白的积累,严重影响蛋白的转运和分泌,会对细胞产生压力,比如分泌压力,低产量蛋白或由于细胞接触各种化学品,而抑制蛋白折叠、转运等都会引起分泌压力。
11141 非折叠蛋白响应
非折叠蛋白响应(Unfolded Protein Response,UPR)是真核细胞蛋白分泌途径中的一种重要调节机制,是细胞应对分泌压力而出现的一种响应机制。内质网中未正确折叠的分泌蛋白能启动UPR途径(Hetz et al,2009;Malhotra et al,2007),当未正确折叠蛋白在内质网中累积时,编码内质网折叠蛋白和伴侣分子的基因、编码内质网相关蛋白降解途径的基因和一部分转运蛋白基因及糖基化相关基因将被诱导表达。研究发现Treesei中UPR途径及其激活机制与其他生物的既有相似又有不同之处。
当内质网中未正确折叠蛋白积累时,它们结合内质网中伴侣分子BiP,少量BiP与IRE1蛋白内质网膜上的IRE1蛋白绑定时,就会激活UPR途径。IRE1蛋白激活时进行磷酸化。在Treesei中过表达IRE1时,大量相关基因的转录水平提高,有pdi1,内质网伴侣分子基因bip1和lhs1,糖基化途径基因pmi40,转运通道基因sec61和脂类生物合成基因ino1。这说明UPR涉及很多基因。在Treesei中表达抗体的Fab片段将会导致pdi基因表达的明显上调,这可能是由于外源蛋白在内质网的积累引发UPR后造成的(Saloheimo et al,1999)。Treesei中编码磷酸酶,使IRE1 蛋白去磷酸化,消除UPR响应的基因ptc2已经被克隆(Valkonen et al,2004)。
介导UPR的蛋白是HAC1(Cox et al,1996),Treesei的hac1基因和构巢曲霉(Aspergillus nidulans)hacA基因已经被克隆,发现激活UPR的是具有20个核苷酸的内含子拼接到hac1/A mRNA上(Saloheimo et al,2003)。Hac1/A mRNA在5’端区大约有200个核苷酸被截断,同时上游开放阅读框架(uORF)从 mRNA 上脱离。这说明 Treesei 中hac1/A是通过双重机制诱导表达的,内含子剪接恢复成一个活跃的开放阅读框,不使用常规翻译开始位点的uORF,用另一个转录起始点替代。
细胞中感受未折叠蛋白的是一个ser/thr跨膜激酶Irelp,它能检测到未折叠蛋白的聚集,并将信号传递到细胞核内,诱导UPR特异转录因子HAC1mRNA的非传统性剪接。在UPR响应发生时,IRE1的N-端感受信号,并多聚化激活C端的蛋白激酶和RNase活性,然后进一步激活下游转录调控因子HAC1。VoIkonen(2003)克隆了Treesei中的ire1基因,发现其与Scerevisiae中的IRE1 功能同源,他同时在Treesei中过表达ire1,发现ire1能诱导一些内质网伴侣分子和折叠酶的表达。
转录调控基因hac1可结合到UPR功能基因pdi1等基因的上游启动转录。丝状真菌中HAC1mRNA剪切过程是5’端区域被截短并除去20nt的内含子。HAC1因子入核后结合在UPR响应基因启动子区的非折叠蛋白响应元件区域,促使UPR相关的折叠酶、伴侣分子和糖基化修饰酶等的表达,以实现对内质网压力的响应。内质网压力响应与内质网相关蛋白降解途径(ER-Associated Protein Degradation,ERAD)是紧密相连的,ERAD可将错误折叠或未组装的蛋白直接导入蛋白酶体被26 S巨大蛋白酶降解。
HAC1为UPR途径中重要的调控转录因子,当蛋白质在内质网积累,跨膜感受器将刺激信号传递给HAC1,然后激活UPR途径,提高分子伴侣和折叠酶的表达。在UPR途径中具有重要作用。HACA属于bZIP型家族的转录因子,它在DNA结合结构域下游含有一个典型的亮氨酸二聚体基序结构。研究显示,hac1及其靶基因pdi1,bip1(编码二硫键异构酶、蛋白折叠伴侣)在低生长速率下出现诱导转录,说明低生长速率下蛋白分泌受到了限制(Pakula et al,2005)。而且,pdi1,bip1的转录也与纤维素酶基因一起受到乳糖、槐糖的诱导(Foreman et al,2003)。这都说明,即使不添加外源蛋白折叠抑制剂(例如二硫苏糖醇DTT),蛋白分泌压力的提高也可使蛋白折叠过程做出应答。同样,在Treesei中hac1/hacA基因也通过一个由UPR诱导的非常规内含子的剪切机制进行剪接(Saloheimo et al,2003)。这些实验结果都显示在丝状真菌中表达外源蛋白将会造成UPR响应并使相应的伴侣分子和折叠酶的表达上调,目前的研究表明这些变化是由上游的IRE1和HAC1调控的。
最近,在研究蛋白折叠和分泌抑制剂对Treesei的影响时,发现一种新的分泌压力响应机制(Pakula et al,2003)。该途径在有分泌压力时发挥作用,下调一些基因的转录水平。只有正确折叠的蛋白被转运到高尔基体,进一步修饰,调整蛋白的功能和稳定性。用DTT,BFA或者能打破Ca2+平衡并抑制蛋白折叠或者蛋白转运出内质网的A23187处理细胞时,纤维素酶和木聚糖酶主要编码基因的转录水平迅速降低,导致这些蛋白合成量迅速降低。当用DTT处理携带标记基因的完整cbh1启动子或在上游161位点断裂的cbh1启动子的菌株时,标记基因的mRNA量并没有减少,这说明基因调控发生在转录水平,并在上游161位点以后。这种分泌压力响应机制只在 Treesei和Aniger 中被检测到(Al-Sheikh et al,2004),这点不同于其他丝状真菌。这种新的途径被称为RESS(REpression under Secretion Stress),认为内质网中在基因转录水平终止新蛋白合成,处理未折叠蛋白的另一种新方式。目前已经有400余个和蛋白分泌压力响应有关的基因被鉴定。
11142 突变体
Suh等(1986)和Byers(1981)在尝试分离Treesei的温度敏感型突变体时发现sec突变体的分离程序基于酵母的单细胞特点,而不适合于多细胞的生物体。在一系列ts突变体中,共有两大类型:突变体为温度敏感型的,在37℃能生长;突变体能在37℃正常生长但其萌发需在25℃。b类突变体在37℃分泌的蛋白质量很少。但是,与酵母的sec突变体不同,生长对温度的敏感性与蛋白分泌障碍之间没有直接关联。当有2-脱氧葡萄糖存在时,Treesei的一些突变菌株可以在纤维二糖为碳源时产生纤维素酶,而这些突变菌株是超分泌型的,例如菌株 RUT C-30和RL-P37(Eveleigh et al,1979;Mandels et al,1976;Merivouri et al,1987)。当初使用这种筛选方法的目的是想得到碳源分解物阻遏型的突变菌株[在基因水平上已被Ilmen等(1996)所证实],但生物化学研究表明,这些突变体中也发生了其他一些变化,包括粗糙内质网及粗糙内质网衍生的泡囊等细胞结构的大量增加(Ghosh et al,1982,1984)。另外,通过亚细胞组分分析,在Treesei突变体RUT C-30的增生内质网上还发现了一些酶的活性(Glenn et al,1985),这些酶一般存在于其他真核生物的高尔基体中。由此可以判断Treesei菌株RUT C-30是一个内质网发生突变的菌株。在功能上,现在还不知道该突变是否与碳源分解物阻遏基因cre1相关(Ilmen et al,1996)。
魏松环等(2009)克隆了Treesei内质网压力响应途径中的调控蛋白基因hac1和分子伴侣基因hsp70,成功地进行了Treesei转化。对表达hsp基因的转化子T47-hsp和T112-hsp的胞外分泌蛋白总量进行了检测,相对于各自的出发菌株 T47和T112,T47-hsp和T112-hsp的胞外蛋白分泌总量有一定程度降低,但对胞外分泌蛋白CBHI活力测定结果显示:T47-hsp和T112-hsp菌株 CBHI 酶活均比出发菌株有提高,说明过量表达分子伴侣HSP70可提高内源蛋白的分泌量。
液泡蛋白分选受体基因vps10编码类型I跨膜受体蛋白,有四个保守结构域,是完成运输功能所必需的。通过与GFP融合表达观察到Vps10p主要位于高尔基体和液泡前体。尽管Vps10p能够识别几种重组体蛋白及异常蛋白并靶向运输至液泡降解,但是它对外源蛋白的产量的影响尚被知之甚少。为了研究里氏木霉(Treesei)蛋白分泌途径中的液泡蛋白分选受体vps10 基因的功能,于海娜(2011)利用基因敲除技术构建了里氏木霉(Treesei)vps10基因缺失菌株,并对其进行了生长和产酶分析。发现基因缺失菌株的生长状态与野生型菌株基本一致,生物量略有提高,对纤维素酶的分泌影响不显著。在Yoon(2010)最新的研究中,在米曲霉(Aspergillus oryzae)中破坏AoVps10基因,使外源蛋白CPY和HLY产量分别提高了3倍和22倍。这是首次关于破坏一个液泡分选受体基因而导致外源蛋白产量提高的报道。
11143 细胞膜和细胞膜组分对木霉蛋白分泌途径的影响
有些丝状真菌,如果向培养基中加入去污剂例如吐温-80,脂肪酸或者磷脂,其产酶能力能够得到提高(Reese et al,1969,1971)。这种效应的生物化学基础,应是通过刺激分泌途径中的限制性环节表现出来的,向Treesei培养基中加入胆碱或者吐温80,都能够促进质膜增长及蛋白质的分泌(Schreiber et al,1986)。另外,电子显微镜检查、化学成分分析及标志性酶分析表明,含胆碱培养基中生长的木霉菌丝中线粒体和内质网的含量也比对照有增加。因此,胆碱对蛋白质分泌的促进效应,可能与蛋白分泌有关的细胞结构“瓶颈”存在关联,其机理与RUT C-30突变有一定程度的相似性。用脂肪酸处理也能促进蛋白质的分泌,其过程和机理与此相似(Panda et al,1987)。
小泡在分泌途径的各个步骤中都起着重要作用,因此,质膜的流动性也应在蛋白质的分泌中有一定影响。为了证明这个假设,有人研究了一些影响质膜完整性或者流动性的因子。Merivouri等(1987)发现,2%(v/v)的乙醇能够抑制 Treesei 超分泌型菌株 RL-P37的纤维素酶分泌,但对其亲本菌株没有影响。令人感兴趣的是,分泌蛋白的糖基化方式也因为乙醇的加入而发生改变。但也有不同的报道,Haab等(1993)发现Treesei RUT C-30的蛋白分泌对乙醇的耐受性显著高于亲本菌株。对乙醇耐受性的这种差异在糖基化蛋白(CBHI和CBHII)及非糖基化蛋白(木聚糖酶Ⅱ)中均被发现,表明乙醇不影响糖基化相关步骤。Northern分析表明,乙醇还能减少纤维素酶mRNA的数量,因此能够干预纤维素酶基因的转录。这些研究者解释,对乙醇的高度耐受性源于细胞质膜固醇成分的改变,而这种改变又与筛选突变体时所用培养基中含有胆酸有关。Gorka-Niec等(2010)发现1M山梨糖醇对Treesei蛋白质分泌有很大影响,减少将近10倍分泌量。
分泌蛋白和膜蛋白是通过依赖SNAREs的胞外分泌途径到达质膜,SNAREs的作用是保证介导运输小泡与目标膜特异融合,位于运输小泡上的叫作v-SNAREs,而位于靶膜上的为t-SNAREs。v-SNAREs和t-SNAREs 特异性识别结合后形成 SNAREs 复合体(trans-SNAREs Complexes),并通过这个结构将运输小泡的膜与靶膜拉在一起,实现运输小泡特异性停泊和融合。Treesei 具有两个质膜突触融合蛋白样 t-SNAREs受体-Ssolp和Sso2p,Ssolp与次顶端质膜上的受体v-SNARE Snclp结合而Sso2p则与顶端质膜上的受体Snclp结合,考虑到菌丝的生长区主要在顶端,Sso2p可能主要含有与菌丝的顶端生长有关的物质例如细胞壁合成的酶类,而Sso1p则负责水解酶类及膜蛋白的运输。
液泡蛋白在高尔基体中被分选出来并通过内含体运输到液泡中,液泡对维持细胞质流动性、蛋白水解、分选及细胞间的转运有重要的作用。
胞外分泌物质和膜蛋白都是通过内吞作用实现的,内吞的蛋白在早期的内涵体内被分选出来,经过反向循环被带到质膜,或者通过晚期的内涵体进行降解。v-SNARE Snclp就是一种最后经过反向循环又回到质膜的蛋白,内吞泡对维持胞外蛋白的分泌和膜质的极性又有非常重要的作用,虽然其间接作用于蛋白的分泌过程,却起着关键作用。
11144 碳源、pH、温度等环境因素对木霉蛋白分泌途径的影响
Suarez等(2005)研究了分别以几丁质、其他真菌细胞壁为碳源时,Tharzianum的分泌蛋白质表达情况。研究发现,在不同的培养条件下胞外蛋白组存在显著差异,但一种新型的天冬氨酸蛋白酶的表达量是最高的,因而猜测这种蛋白质在其腐生生活中起主要作用。研究结果还发现,两个菌株除了在分泌量上的差异之外,纤维素酶的组成上有明显的差异。Treesei CL847分泌至胞外的蛋白种类较多,而Treesei RUT C-30 则倾向于只分泌纤维素酶。Monteiro(2010)分别在含有菜豆壳球孢菌(Macrophomina phaseolina),镰刀菌(Fusarium spp)和立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)病原真菌细胞壁的培养液中培养Tharzianum ALL42,提取胞外蛋白。经双向蛋白电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术检测分析,在这3种培养液中共发现60种分泌蛋白,其中7种蛋白是细胞壁诱导蛋白,分别是内切几丁质酶、β-葡糖苷酶、a-甘露糖苷酶、酸性磷酸酶、a-1,3葡聚糖酶和蛋白酶,这些酶在培养液上清中也能被检测到。其余53种蛋白未鉴定出来,可能是新蛋白或是还未被测序的蛋白。
伍红(2011)发现Treesei QM9414在发酵培养过程中的胞外分泌蛋白的总量变化与其培养液中碳源的成分有着密切的关系。在纤维素、木聚糖、乳糖、甘油、葡萄糖等不同碳源条件下培养QM9414,对纤维素酶、木聚糖酶的活性差异及其培养液中总分泌蛋白的表达差异进行了分析。发现纤维素、乳糖和木聚糖均可诱导纤维素酶和木聚糖酶的合成;而葡萄糖是两种酶合成的抑制性碳源。其中,以纤维素和乳糖为碳源的培养液中,蛋白合成的速度及总量都显著高于其他碳源,其次是以木聚糖为碳源的培养液,再其次是甘油为碳源的培养液,蛋白质合成速度及总量都很低的是葡萄糖为碳源的培养液,说明碳源对Treesei蛋白质合成代谢的调控作用很明显。纤维素、乳糖、木聚糖都可以诱导胞外分泌蛋白质基因表达。从蛋白合成总量来看,纤维素和乳糖的诱导能力强于木聚糖,与以前的报道一致(Suto et al,2001;凌敏等,2009)。柳常青(2009)发现Treesei在以葡萄糖或甘油为碳源时仅 CBHII,BXL和AxeI 3种纤维降解酶有微量表达,这3种酶可能是Treesei组成型表达的纤维降解酶。纤维二糖能够诱导CBHI,CBHII,EGI,EGIII,BXL,AxeI和AglI 较高水平的表达。纤维素纸浆可诱导 CBHI,CBHII,EGI,EGII,EGIII,EGIV,ManI,ManII,AxeI,BXL和AglI等11种酶的大量表达,表达量占分泌组的61%。纤维素诱导的纤维降解酶组分比例情况与纤维二糖条件很相似,但表达量和酶活性都有显著上升。不少报道也证明了这点(Wrleitner et al,2003;Mach et al,1996)。
除了碳氮源外,pH是影响微生物产酶量的主要因素,它对代谢通路、工业产酶量和酶合成效率都有影响。据报道,Treesei在不同pH时的蛋白分泌量有很大变化。Sunil等(2011)发现 Treesei 野生菌株(QM6 a)及其突变体(QM9414,RUT C-30,QM9414MG5)这4个菌株中,纤维素水解酶包括纤维素内切酶、外切葡聚糖酶、β-葡糖苷酶在不同pH培养基中表达水平都有变化。对在不同pH培养基中特异表达的蛋白进行聚类分析,发现 Treesei 野生菌株(QM6 a)及其突变体(QM9414,Rut-C30,QM9414MG5)分泌酶类所占比例相似,但明显随着pH的变化和菌株的不同而表达量不同。在pH为90时,Treesei菌株QM6 a和RUT C-30降解纤维素效率明显降低,具有较低的酶活性,细胞生长速度明显降低;RUT C-30菌株在pH为40时纤维二糖水解酶I和外切葡聚糖酶Ⅱ的蛋白丰度最大,这表明这两种酶的表达水平最高;而内切葡聚糖酶Cel74a,β-1,3-葡聚糖酶,β-葡聚糖酶等蛋白在pH为50时表达量最高;在pH在3~5之间时纤维素水解蛋白的丰度明显较高,纤维素降解能力相应增强。半纤维素水解酶包括GH11内切1,4-β-木聚糖酶、GH11木聚糖酶III、GH54 阿拉伯呋喃糖酶、GH5β-甘露聚糖酶、GH43木糖酶/阿拉伯糖苷酶,GH39 β-木糖酶、GH5 内切β-1,6-半乳聚糖酶、植酸酶等在不同pH环境中都能检测到。pH在30~70 范围内Treesei和突变体产半纤维素降解酶量并没有受到明显影响,在酸性条件下,半纤维素水解蛋白的分泌量最大。木聚糖酶Ⅰ~Ⅳ中木聚糖Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ分别在pH为40~45,40~60和60~65时分泌量最大(Tenkanen et al,1992 a;Torronen et al,1995;Xu et al,1998;Sunil et al,2011)。在碱性条件下各类纤维素酶、半纤维素酶、木质素降解蛋白、肽酶、几丁质酶和运输蛋白的分泌量均受到显著影响。
在木霉菌株培养过程中,经常是碳源与培养基的pH协同作用于木霉菌的蛋白分泌表达,Bailey等(1993)发现Treesei RUT C-30在pH为70时木聚糖酶分泌量最大,而在以纤维素和木聚糖作为主要碳源时纤维素酶在pH为40时分泌量最大。Xiong等(2004)报道Treesei在乳糖培养基中培养时,木聚糖酶I在pH为40、木聚糖酶Ⅱ在1 pH为60时分泌量达到最大。
培养温度对木霉纤维素酶的分泌量来说很重要,而且温度效应具有菌株特异性。Merivouri等(1990)发现在28℃培养时,Treesei RUT C-30的纤维素酶产量为亲本菌株的3倍,而在30℃培养时则仅为2倍。利用酶活性分析及电泳技术发现,温度的升高能够减少纤维素酶但能增加木聚糖酶的分泌量,这种效应对Treesei亲本菌株QM9414和突变菌株RUT C-30来说是相似的。Treesei QM9414 内切葡聚糖酶的分泌速率在17℃培养时提高,接近菌株 RUT C-30在 28℃培养时的分泌速率。Suh等(1986,1988)比较了Treesei QM6 a和Treesei RL-P37在25℃,30℃和37℃培养时的木聚糖酶和内切葡聚糖酶分泌情况,发现低产量菌株QM6 a在较高温度培养时蛋白质分泌量下降,但菌株RL-P37的产量却有所提高;但两个菌株的木聚糖酶活性在高温培养时都得到了提高。
11145 细胞壁在蛋白质结合与释放中的作用
在快速生长期,真菌的许多胞外蛋白质在分泌以后结合在细胞壁上,木霉的一些分泌型蛋白质也存在这种现象。Kubicek(1981,1982,1983)利用β-葡糖苷酶作为模式,研究了木霉分泌型蛋白与细胞壁的结合情况,发现分泌型酶总活性的80%与细胞壁有关联(Kubicek,1981),细胞壁也是限制商业纤维素酶产量的因素。β-葡糖苷酶对细胞壁的结合程度与细胞壁成分及更新动态有关。与β-1,3-葡聚糖酶或者几丁质酶共培养时,β-葡糖苷酶能够释放出来,如果木霉细胞壁中含有高水平的β-1,3-葡聚糖酶,总β-葡糖苷酶分泌量增加的部分即出现在培养液上清中(Kubicek,1982)。另外,在山梨糖(同质异形诱变剂)存在时,木霉在生长过程中向培养液中的释放β-葡糖苷酶量可被提高(Ku-bicek,1983;Nanda et al,1986),已知山梨糖能够抑制β-1,3-葡聚糖的合成。这些研究结果都支持如下假设:即细胞壁中的β-1,3-葡聚糖组分参与β-葡糖苷酶对细胞壁的结合。然而,在细胞壁酶解过程中,细胞壁中仍有多糖与β-葡糖苷酶紧密结合,通过对这些细胞壁多糖成分的纯化分析,发现β-葡糖苷酶与复杂的异型多糖有关联,这些多糖由甘露糖、半乳糖、葡萄糖和葡萄糖醛酸组成(Messner et al,1990a)。有趣的是,这种异型多糖在细胞壁中能够结合β-葡糖苷酶,但在体外则能够激活β-葡糖苷酶。经过核磁共振技术(NMR)分析,发现这种能够激活β-葡糖苷酶的异型多糖结构骨架为线形的a-1,6-D-甘露聚糖(Rath et al,1995)。
Perlińska-Lenart等(2006a)将酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)编码长醇基一磷酸甘露糖合成酶的dpm1基因转到Treesei中获得超量表达,结果提高了蛋白质糖基化强度和分泌量,而且引起了木霉细胞壁的超微结构变化。在化学组成方面,细胞壁中的N-乙酰基葡萄糖的含量增加,暗示几丁质含量提高,用荧光增白剂(Calcofluor White)染色后发现几丁质在细胞壁中的分布也发生了改变。还发现甘露糖及碱溶性β-1,6葡聚糖的含量减少。通过比较原生质体与菌丝的蛋白分泌情况,发现转化子的细胞壁是蛋白分泌的一道屏障,阻碍了蛋白分泌。分泌蛋白糖基化水平的提高,减少了核糖量,从而限制了细胞壁多糖的合成,但甘露糖及碱溶性β-1,6葡聚糖的含量减少又使得细胞壁的孔隙率提高,反而有利于蛋白质的分泌。
>> almost, nearly都是副词,意为“几乎,差不多”
>> almost一般不带语气,表示“这事情已经这样了。”
nearly一般带点语气,表示“这事情居然都已经这样了!”
>> 另外almost多表示时间、程度、距离、进度,且almost可以修饰more than, too, nothing, nobody, nowhere, no one, none, never等词,nearly则不行。
>> not nearly 表示“一点也不,决不”,而not almost则是“还没有那么多”。
作为习语用作介词时,as well as的涵义是“还有”、“不但…而且…”。值得注意的是,在A as well as B的结构里,语意的重点在 A,不在 B因此,“He can speak Spanish as well as English.”的译文应该是:“他不但会说英语,而且会讲西班牙语”,决不能译作:“他不但会说西班牙语,而且会讲英语”。如果这样翻译,就是本末倒置了。as well as和 not only… but also…同义,但前者的语意重点和后者的语意重点恰好颠倒。
如果 as well as用作连词引出比较从句,其义为“和…一样好”。因此,“He speaks Spanish as well as English.”应译作:“他说西班牙语像说英语一样好”。语意的重点依旧在前部,不在后半部。
请注意 as well as以下的用法:
She called on you as well as I.
不但我来看你,她也拜访了你。
She called on you as well as me.
她不但拜访了我,也拜访了你。
在下列句中,as well as表示“像…一样”的涵义:
She as well as you is an English teacher.
她像你一样也是英文教师。
这里的谓语动词用is,不用are,因为句中的主语是she,不是she和you
As well是副词短语,其义为“也”,相当于too,它一般放在句末,有时和连词and或but搭配使用。例:
He is a worker,and a poet as well.
他是工人,但也是诗人。
China possesses enormous quantities of coal and is rich in other minerals as well.
中国拥有大量煤炭,其他的矿藏也很丰富。
Mr.Liu can speak English,but he can speak Cantonese as well.
刘先生会说英语,但他也能讲广东话。
rather than 用法小结
rather than 是一个并列连词,用法比较复杂,现归纳如下:
1 rather than 与would 连用时,构成“would ratherthan”句式,意思是“宁愿……而不愿……”,表示主观愿望,即在两者之中选择其一。例如:
She'd rather die than lose the children 她宁愿死也不愿失去孩子们。
2 rather than 不与would连用时,表示客观事实,意为“是……而不是……;与其……不如……”。它连接的并列成分可以是名词、代词、形容词、介词(短语)、动名词、分句、不定式、动词等。现分述如下:
(1) 连接两个名词或代词
He is an explorer rather than a sailor 与其说他是一个海员,不如说他是一个探险者。
You rather than I are going to go camping 是你而不是我要去要野营。
注意:rather than 连接两个名词或代词作主语时,谓语动词应与rather than 前面的名词或代词在人称和数上保持一致。
(2) 连接两个形容词
The sweater she bought was beautiful rather than cheap 与其说她买的这件羊毛衫便宜不如说它漂亮。
(3) 连接两个介词(短语)或动名词
We will have the meeting in the classroom rather than in the great hall 我们是在教室里开会,不是在大厅里。
She enjoys singing rather than dancing 她喜欢唱歌,而不喜欢跳舞。
(4) 连接两个分句
We should help him rather than he should help us 是我们应该帮助他而不是他应该帮助我们。
(5) 连接两个不定式
I decided to write rather than (to) telephone 我决定写信而不打电话。
注意:rather than 后接不定式时,不定式可以带to,也可以不带to, 如上句。但rather than位于句首时,则只能接不带to 的不定式。如:Rather than allow the vegetables to go bad, he sold them at half price 他唯恐蔬菜烂掉,把它们以半价卖掉了。
(6) 连接两个动词
He ran rather than walked 他是跑来的,而不是走来的。
注意:这里rather than 后用了walked,而没有用walk,表示客观事实,而不是主观愿望。如果换成walk,则作“宁愿……而不愿 ……”解。
would rather的用法
一、would rather意思是“宁愿、宁可、更、最好、还是为好”,后接动词原形,常省略为’d rather,表示优先选择的一种方式
其否定形式是would rather not do sth。would rather没有人称和数的变化,所有的人称一律用would rather。
“would rather+动词原形”是英语中常见的一个惯用句式,美国英语中多用had rather。would (had)在此决无“过去”之意,它是一个情态助动词,且无词性、时态变化。
例 Mr Li would rather not listen to rock music 李先生不愿意听摇滚音乐。
If you’d rather be alone, we’ll all leave here 如果你宁愿独自呆着,那我们都离开这儿。
He’d rather work in the countryside 她宁可到农村去工作。
You would rather stay at home and do some reading this evening 今晚你最好呆在家中读点书。
二、如果在两者中进行取舍,表示“宁愿……而不愿……,与其……宁可……”的意思时,则可用would rather…than…或would…rather than…的句型
例 I would rather watch TV at home than go to the cinema 我宁可在家看电视而不愿去看**。
The children would walk there rather than take a bus 孩子们宁愿步行去那里而不愿乘公共汽车。
请注意 1) would rather…than…/would…rather than…也可以颠倒为:rather than…would…。Would(rather)和than后都接不带to的动词不定式,若选用的动词相同,那么than 后的动词可以省略。
例 I would rather have noodles than rice 我宁愿吃面条也不吃米饭。
He would rather drink wine than beer. 他喜欢喝红葡萄酒而不喜欢喝啤酒。
Rather than work in such bad condition, he would give up 与其在这样差的条件下工作,他宁愿放弃。
2)使用would rather…than…句型时要注意“平行结构”,即在than 的前后要用两个同类的词或词组,如两个名词、两个不定式、两个介词短语等。
例 I would rather go to work by bike than by bus 我宁愿骑自行车也不愿乘公共汽车去上班。
I would rather talk with his mother than with his father 我宁愿和他妈说话而不愿和他爸说话。
三、在疑问句式中,would rather 与would rather…than…中的would要放在主语之前
例 Would you rather stay here or go home 你愿意呆在这里,还是回家?
Which would you rather have, apples or bananas 你喜欢吃苹果还是香蕉?
Would you rather read a novel than read a poem你宁愿看小说而不愿朗读诗歌吗?
四、would rather+从句,是一个常用的虚拟语气句型 Would rather+从句,谓语一般用过去时来表示现在或将来。其意为“宁愿……,还是…… 好些”“一个人宁愿另一个人做某事”。引导从句的that常省略。在谈到过去的动作时,谓语则用过去完成时。
例 John wants to see me today I would rather he came to tomorrow than today 约翰今天想去看我。我宁愿他明天来看我而不是今天。(句中came不是表示过去而是表示将来)
We’d rather he paid us the money tomorrow 我们宁愿他明天付给我们那笔钱。
Don’t come tomorrow I’d rather you came next weekend 明天别来。我希望你下周末来。
请注意 1) 如果谈到过去的动作,也就是表示过去已经发生的事情在选择上不恰当。此时,主句一般为I had rather ,其(that)从句则用过去完成时。 例 Would rather you had not done that 我真希望你没有做那件事。
2)如果只涉及主语本人而不涉及另一个人,则would rather之后不接that从句而接have done结构。
例 I would rather have gone to the theatre than stayed home night 我真希望昨天晚上去看了戏而不是呆在家里。 He would rather be poor than have got money by dishonest methods. 他宁可穷也不愿意用不诚实的手段获取金钱。
Henry would rather that his girlfriend worked in the same department as he does.亨利希望他的女朋友和他在一个部门工作。
五、would rather/sooner和prefer/would prefer的区别 would rather和would sooner之间一般没有区别,但经常接触到的是would rather。
例Tom would rather/sooner read than talk. 汤姆宁可读书而不愿谈天。 Tom prefers reading to talking.汤姆喜欢读书而不喜欢谈天。
请注意 1)would rather后跟不带to的不定式+than+不带 to的不定式,而prefer后跟动名词+to+动名词。有时prefer后面也可跟名词,而在would rather之后要求只带动词原形。
例 He prefers wine to beer.= He would rather drink wine than beer. 他喜欢喝红葡萄酒而不喜欢喝啤酒。
I prefer tennis to golf.= I’d rather play tennis than golf. 我喜欢打网球而不喜欢打高尔夫球。 2)某些 prefer+名词的情况不能用 would rather完全确切地表达出来:He prefers dogs to cats.(他喜欢狗而不喜欢猫。)和 He would rather have dogs than cats.(他宁可养狗而不愿养猫。)很明显,这两句的意思并不完全相同。
3) would rather+不带to的不定式有时可代替 would prefer+带 to的不定式。
例 I’d rather fly than go by sea.=I’d prefer to fly. 我宁愿乘飞机也不愿乘船。
这两个结构后面带名词时情况也一样:
例 —Would you like some gin?
—I’d prefer a coffee.=I’d rather have coffee than gin.
—您想喝点杜松子酒吗?
—我想喝点咖啡。/我想喝点咖啡,不想喝杜松子酒。
4)would rather/sooner和would prefer后面都可跟完成式,但后者带to。
例 We went by sea but I’d rather have gone by air=I’d prefer to have gone by air. 我们是乘船去的,可我本想乘飞机去。(我愿意乘飞机去,可我的愿望未能实现。)这和 would like+不定式的完成式有点相似,would like+带to 的不定式的完成式也表示未能实现的愿望。
rather than就是比起什么更什么,一般都是更喜欢什么
instead of,就是以什么什么代替什么什么,不过一般也是除了什么以外。
一instead意为“代替”“替代”,作副词用,通常位于句尾。如位于句首时常用逗号与后面阁开。instead 在顺接句子中作“代替”讲,而在转折(或逆转)句子中作“然而”讲。
例如:1Lily isn't here Ask Lucy instead
Lily不在这儿,去问Lucy吧 [注意]当instead在祈使句中时,只能位于句末。
2she didn't answer me, instead, she asked me another question
她没有回答我,反而问了我另外一个问题。
二instead of是介宾短语,其意与instead相同,不同之处在于它后面常接宾语,起宾语多由名词、代词、介词、短语、动词 + ing 形式充当。
例如:1We'll ask Li Mei instead of Mary
我们将去问李梅而不问玛丽。
2I'll go instead of her
我会替她去。
三instead 与instead of的转换。
例如: 1He didn't answer me, instead, he asked me another
question → He asked me another question instead of answering me
2I'll of instead of her→She won't goI'll go instead
最佳答案电焊作业职业危害研究进展
1、电焊作业危害因素及影响因素
电焊作业的健康危害因素很多,一般可分为物理因素和化学因素两大类。前者有高温电弧光产生的紫外线、红外线等。后者为电焊气溶胶的各种成分,固态有各种金属铁、锰、铝、铬、铅、镍,放射性元素等,气相部分有氧化锰、氟化氢、氮氧化物等[1]等气体。高温、震动、噪声则不是很明显。
电焊气溶胶的分散度极高,生物活性明显高于其它粉尘。焊条、焊接方式不同,电焊气溶胶的组成变化也很大,生物活性也不同[2];生物活性还与电焊烟尘溶解度、新鲜度有关。
2、电焊作业对工人健康的损害
21焊工尘肺及肺功能的影响
电弧焊接时,焊条中的焊芯、药皮和金属母材在电弧高温下熔化、蒸发、氧化、凝集,产生大量金属氧化物及其他物质的烟尘,长期吸入可引起焊工尘肺。电焊工尘肺一般发生在密闭、通风不良的作业条件下,发病工龄平均为18年左右[3] 。肺通气功能测定表明接触电焊尘可引起电焊工一定程度的肺通气功能损伤,FVC、FEV10、FEV10%、MMF、V50、V25、PEFR等肺通气功能指标均明显降低[4];吸烟因素与接尘因素对电焊工的肺通气功能可能产生协同作用;电焊工的肺通气功能损伤有随接尘工龄的延长而加重的趋势[5]。
22锰中毒
各种焊件和焊条中均含有数量不等的锰,一般焊芯中的含锰量很低,只有03~06%左右。为了提高机械强度、耐磨、抗腐蚀等性能,使用含锰焊条时,含锰量可高达23%。在通风不良场所如船舱、锅炉或密闭容器内施焊,长期吸入含锰的烟尘可发生锰中毒,可检出血锰、尿锰升高,神经行为功能改变[6],发锰测定亦可作为锰中毒早期筛检指标[7]
23电焊烟热
电焊烟热也称焊工热,是金属烟热的一种,由吸入金属氧化物地所致的以骤起体温升高和外周血白细胞计数增多为主要表现的全身性疾病,常在接触金属氧化物烟后6一12小时[8]起发病,有头晕、乏力、胸闷、气急、肌肉关节酸痛,以后发热,白细胞增多,重者有畏寒、寒颤。
24对神经系统的影响
大量研究表明,电焊作业存在与职业接触有关的神经系统损害,主要涉及记忆、分析、定位等信息加工处理的功能,表现为神经生理、神经心理、神经行为异常[9],与电焊烟尘中的锰、铝、铅等有密不可分的联系。采用WHO.NCTB测试,结果行为功能总分与尿锰存在负相关[10],提示神经行为功能的变化可作为预防锰中毒的早期指标之一[11]。国外研究有电焊作业工人行为功能总分反而较对照组升高的报告,作者分析可能是工人健康效应和工作相关技能训练效应所致[12]。电焊作业对工人副交感神经调查功能的影响也有报道[13]。国外尚有报道帕金氏综合症在电焊工人群中的发病年龄明显提前[14](平均46岁,对照组平均63岁),提示电焊作业是帕金氏综合症的危险因素之一。
25对眼及皮肤的影响
紫外线(UVR)和红外线(IFR)对眼及皮肤的损伤是电焊作业职业损害的一个重要方面。电焊工眼部症状明显增多常有报道,表现为电光性眼炎、慢性睑缘炎、结膜炎、晶体混浊等,且慢性睑缘炎、结膜炎患病率有随工龄增加而增高的趋势[15]。过量UVR暴露的主要损害为光敏性角膜炎,电焊工白内障与红外线接触有关。国外最近的研究表明,工人接触过量UVR会有发生非黑色素细胞皮肤癌[16]和其它诸如眼恶性黑色素瘤[17]等慢性疾病的危险。
26对生殖系统的影响
生殖毒性的结局意义重大,故近10年来国内外开展了一些关于电焊作业生殖毒性的研究,主要涉及男工精液质量、女工生殖结局及损害机制。研究表明:电焊女工月经的经量增加、周期缩短、经期延长、白带增加,自然流产、早产、痛经、均较对照组高[18]。锰中毒男工精液外观呈均匀灰白色,PH值正常,平均液化时间比对照组延长。检验结果证明,锰中毒男工平均一次射精量、精子总数、精子存活率及活动精子率均比对照组下降,锰中毒男工精子畸形率明显高于对照组[19]。认为金属锰能够影响男工生精系统,对精子的发育有直接毒作用,并能杀伤精子,从而引起男性精液质量的改变。国外也有报道电焊作业工人性激素分泌改变,精子质量下降,但对子代的性别比例没有影响[20]。
27对体内酶和抗体水平的影响
近年来,有关电焊作业对工人体内酶及抗体产生影响的报道很多。研究表明:电焊工血清中的总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)显著下降,丙二醛(MDA)水平显著升高,但不存在剂量-效应关系[21、22],电焊工于氧化应激状态,抗氧化能力减弱,提示生物膜受到损伤[23]。
为探讨电焊烟尘对人体免疫球蛋白含量的影响,对电焊工和健康对照者采用单向免疫琼脂扩散法分别测定IgG、IgA、IgM含量。结果发现,电焊组的IgG、IgA二项含量与对照组比较,差异有高度显著性(P<0001);电焊组的IgM含量与对照组比较,差异无显著性(P>005);且尿锰与IgG、IgA有相关关系,分别为r=0982,r=0991[24],提示电焊烟尘对人体免疫球蛋白含量有影响。
热应激蛋白(HSPs)是机体在各种应激状态下诱导合成增加的一组进化上高度保守的蛋白质。在生理状态下,它们是细胞生存所必需,在应激状态下水平的增加,可提高细跑对损伤的耐受力和应激能力,以保护组织细胞抵抗有害因家的损害作用,对维持机体的自身稳定性起着重要作用。应用酶联免疫吸附法对电焊工血浆中HSP65抗体水平进行检测。结果表明,电焊工血浆抗体水平高于对照组(P<005);其中异常检出率均为261%,认为电焊混合尘作为应激原能够诱导机体HSP65抗体水平合成增加[25]。因此认为,电焊工血浆中HSDP65抗体水平能够反映电焊混合尘对工人的危害程度。
28对内脏的影响
通过B超检查探讨电焊对作业工人肝脾的影响。结果电焊作业组工人左肝长、厚,右肝斜厚及脾厚均高于对照组,并有显著性差异。电焊对作业工人肝脾存在一定的损害,且随工龄延长有加重趋势[26]。国外有报道,胰腺内分泌肿瘤在电焊工中发生的危险度也明显高于正常人群[27]。
29对体内微量元素的影响
有报道采用等离子发射光谱仪,检测锰电焊作业工人血清中的Mn,Cu,Zn,Fe和Pb5种微量元素。结果接触组锰和铁的血清含量明显高于对照组(P<001),铜略高于对照组,但与对照组比较无显著性差异(P>0.05);而锌和铅的血清含量明显低于对照组(P<0.01);接触组工龄及年龄分层显示,各组血清微量元素比较均无统计学意义。结论:锰的过量吸入可影响体内Mn,Cu,Zn,Fe和Pb5种微量元素变化,从而引起体内微量元素的失衡,促使锰中毒的发生[28]。尚有报道电焊作业者红细胞内锰含量女性高于男性,且红细胞内铜锌含量变化与锰呈正相关关系[29]。
氩弧焊的危害程度要比焊条电弧焊相对来说要大,但是没有大到让人望而生畏的地步,红外线辐射约为普通焊条电弧焊的1~15倍,氩弧焊电弧产生的紫外线辐射约为焊条电弧焊的5~30倍,在有限空间内焊接时,臭氧的浓度可增大到危险程度,在焊接过程中,还会产生二氧化碳·一氧化碳等有害气体和金属粉尘,这些都对焊工产生一定的危害。所以我们在焊接过程中要做好防护,选用电极的材料,要尽量选用放射性小的钍钨·铈钨。磨削电极时,要戴好口罩·手套,且工作后要洗手;如果长时间的焊接要定期的进行身体检查,在工作中做到有张有持,就像我们晒太阳,晒久了也会对人身体不好的。
电光性眼炎
有些人白天被电焊晃了眼睛,在夜间突然发生两眼睁不开,剧烈眼痛,流泪,这往往就是电光性眼炎。
电焊和气焊的弧光、紫外线灯、烈日的海滨和高原、雪山的日光反射都可产生大量紫外线而引起电光性眼炎,尤以电焊工为多见。电光性限炎的主要表现是:在眼睛接触紫外线照射的2~12小时后,由于角膜上皮受损,患者感觉眼痛,怕光,眼睛难以睁开,眼痛犹如许多沙粒进入眼睛一样,视物很模糊。眼科检查可见眼睑皮肤充血、眼红、球结膜充血水肿、角膜上皮脱落。电光性服炎虽然病情来势凶猛,但预后较好。发病当时可滴用表面麻醉药(如0.5%地卡因液)1~2次,可立即消除眼痛症状,并滴用消炎眼水以预防感染。随着结膜、角膜上皮的迅速修复,2~5天后即可痊愈。
为预防电光性眼炎,电焊工人操作时一定要戴上防护面罩或眼镜。此外,高原、雪地或沙漠日光反射后的紫外线也可使人发生电光性眼炎,因此也需戴上防护眼镜。
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