高中生物常用的实验方法有哪些？

1．实验方法

实验方法是整个实验设计的精髓，是做好实验设计的关键所在。现将与中学实验有关的一些最常见的经典的实验方法汇总如下：

(1)化学物质的检测方法：

①淀粉——碘液

②还原糖——斐林试剂、班氏试剂

③CO2——Ca(OH)2溶液或酸碱指示剂

④乳酸——pH试纸

⑤O2——余烬复燃

⑥无O2——火焰熄灭

⑦蛋白质——双缩脲试剂

⑧染色体——龙胆紫、醋酸洋红溶液

⑨DNA——二苯胺试剂

⑩脂肪——苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液

(2)实验结果的显示方法：

①光合速率——O2释放量或CO2吸收量或淀粉产生量

②呼吸速率——O2吸收量或CO2释放量或淀粉减少量

③原子途径——放射性同位素示踪法

④细胞液浓度大小——质壁分离

⑤细胞是否死亡——质壁分离

⑥甲状腺激素作用——动物耗氧量，发育速度等

⑦生长激素作用——生长速度(体重变化，身高变化)

⑧胰岛素作用——动物活动状态

⑨菌量——菌落数或亚甲基蓝溶液褪色程度

⑩大肠杆菌——伊红—美蓝琼脂培养基

(3)实验条件的控制方法：

①增加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物

②减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水

③除去容器中CO2——NaOH溶液

④除去叶片中原有淀粉——置于黑暗环境

⑤除去叶片中叶绿素——酒精隔水加热

⑥除去光合作用对呼吸作用的干扰——给植株遮光

⑦如何得到单色光——棱镜色散或彩色薄膜滤光

⑧血液抗凝——加入柠檬酸钠

⑨线粒体提取——细胞匀浆离心

⑩骨的脱钙——盐酸溶液

⑾灭菌方法——微生物培养的关键在于灭菌，对不同材料,灭菌方法不同：培养基用高压蒸气灭菌；接种环用火焰灼烧灭菌；双手用肥皂洗净，擦干后用75％酒精消毒；整个接种过程都在实验室无菌区进行。

(4)实验中控制温度的方法：

①还原糖鉴定：水浴煮沸加热

②酶促反应：水浴保温

③用酒精溶解叶中的叶绿素：酒精要隔水加热

④DNA的鉴定：水浴煮沸加热

⑤细胞和组织培养以及微生物培养：恒温培养

2．斐林试剂、班氏试剂与尿糖试纸

这三种物质均可用来检验含醛基的有机物的存在，在医学上用来检验糖尿病，其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化，但成分略有不同：

斐林试剂：即硫酸铜、氢氧化钠和酒石酸钾钠组成的蓝色混合溶液。分为斐林试剂A和斐林试剂B，A为CuSO4溶液，B为氢氧化钠和酒石酸钾钠的混合溶液，使用时将A、B等体积混合即成斐林试剂。

班氏试剂：即硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸钠组成的混合液，又叫本尼迪克特(Benedict)试剂，它与醛反应的结果是与斐林试剂一致的，只是比斐林试剂更稳定，所以在临床化验中更常使用。

尿糖试纸：又叫硫酸铜试纸，呈白色,带蓝色斑点，用于糖尿病患者的尿糖测试。每片含硫酸铜20毫克,枸橼酸300毫克,碳酸钠80毫克，氢氧化钠235毫克。尿糖试纸法快速、方便，试纸的正确使用方法为：将试纸条放在尿液中浸湿，一秒钟后取出，在一分钟内观察试纸的颜色，并与标准色板对照，根据不同的颜色来确定尿糖阳性的程度。

3．斐林试剂和双缩脲试剂的比较

相同点：①都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成；

②斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0．1g/mLNaOH溶液。

不同点：①CuSO4溶液浓度不一样：斐林试剂乙液为0．05g/mLCuSO4溶液，

双缩脲试剂B为0．01g/mLCuSO4溶液。

②配制比例不一样。

③使用方法不一样：斐林试剂是甲、乙液一起混合后再使用，

双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后，再加入试剂B。

④鉴定的对象不一样：斐林试剂鉴定的是还原糖，双缩脲试剂鉴定的是蛋白质。

⑤反应本质及颜色反应不一样。

4．苏丹Ⅲ染液与苏丹Ⅳ染液的比较

都是用来鉴定脂肪。苏丹Ⅳ染液更易溶于脂肪，所以染色更深，同时要求染色时间更短。

生物学中常用的试剂：

1、斐林试剂： 成分：01g/ml NaOH（甲液）和005g/ml CuSO4（乙液）。用法：将斐林试剂甲液和乙液等体积混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热或直接加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。

2、班氏糖定性试剂：为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。

3、双缩脲试剂：成分：01g/ml NaOH（甲液）和001g/ml CuSO4（乙液）。用法：向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。

4、苏丹Ⅲ：用法：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘**（被苏丹Ⅳ染成红色）。

5、二苯胺：用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺（沸水浴）会被染成蓝色。

6、甲基绿：用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿（常温）会被染成蓝绿色。（甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。）

7、50%的酒精溶液：在脂肪鉴定中，用苏丹Ⅲ染液染色，再用50%的酒精溶液洗去浮色。

8、75%的酒精溶液：用于杀菌消毒，75%的酒精能渗入细胞内，使蛋白质凝固变性。低于这个浓度，酒精的渗透脱水作用减弱，杀菌力不强；而高于这个浓度，则会使细菌表面蛋白质迅速脱水，凝固成膜，妨碍酒精透入，削弱杀菌能力。75％的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。

9、95%的酒精溶液：冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。

10、15%的盐酸：和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。

11、龙胆紫溶液：(浓度为001g/ml或002g/ml)用于染色体着色，可将染色体染成紫色，通常染色3~5分钟。（也可以用醋酸洋红染色）

12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、35%的氯化铁：用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶）

13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。

14、碘液：用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。

15、丙酮：用于提取叶绿体中的色素。

16、层析液：（成分：20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成，也可用93号汽油）可用于色素的层析，即将色素在滤纸上分离开。

17、二氧化硅：在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分。

18、碳酸钙：研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。

19、03g/mL的蔗糖溶液：相当于30%的蔗糖溶液，比植物细胞液的浓度大，可用于质壁分离实验。

20、01g/mL的柠檬酸钠溶液：与鸡血混合，防凝血。

21、氯化钠溶液：①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol/L、 0015mol/L时DNA的溶解度最高，在氯化钠浓度为014 mol/L时，DNA溶解度最低。②浓度为09%时可作为生理盐水。

这个算是复杂混合物剖析，需要相关专业人士去做。

首先要有一个清析的分析思路，可以通过蒸馏的方法分离低沸点及高沸点物质，通过馏出气相温度可以大概判断低沸组成，如果100度以下有大量馏分，可能是一些低沸溶剂之类，100度左右有大量馏分一般可以认为是水。可以对样品做一个GC-MS，可以对样品中300度内能气化的成分进行分析，通过GC来定量，通过MS去对样品中各组分定性。关于水的精确定量可以采用卡尔费休法。

样品常压蒸馏后如果有残留，首先要判断残留物是无机的还是有机的，最简单的方法，将蒸干后的样品灼烧，如果质量没有损失，可以认为是无机物，通过XRD对样品中无机物进行定性分析，通过XRF对样品各元素进行定量分析，结合XRF与XRD的数据可以得出各无机成分的组成及含量。

如果灼烧样品部分损失或全部损失，可以认为含有有机物，如果是灼烧完全失重，则可以认为全部是有机物，可以通过薄层色谱大概地区分含有几种成分，当然需要样品有紫外吸收，此时可以用HPLC-MS去对样品进行定性定量分析，这类未知物HPLC条件需要去摸索，相对比较烦。当然也可以通过层析的方法分离富集各组成成分，然后通过FTIR或NMR对样品进行表征。如果样品蒸干后是有机和无机的混合物，则需要用合适的溶剂将有机组分和无机组分分离之后按上面的思路去做。

所有工作都做完最关健就是数据的处理，需要相关专业人员对图谱数据分析计算,

提取液是把所有色素溶解掉，主要起到吧叶绿体中的色素溶解的作用，而层析液是利用不同色素在层析液中的溶解度不同，让他们在试纸上分层，用来观察叶绿体中色素种类的。要是正确的话，给我采纳谢谢。

1、提取液：丙酮5ml。层析液：石油醚。

2、在做叶绿体色素分离时用到,将叶片碾碎，浸出绿色液体，将液体与层析液（石油醚）混合，将滤纸一段进入混合液体，四种色素在层析液中的溶解度不同，在滤纸上留下4条色素带。由此观查出各种色素的相对含量和种类。

3、纸层析法一般用于叶绿体中色素的分离，叶绿体中色素主要包括胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b，它们在层析液中的溶解度不同，溶解度大的随层析液在滤纸上扩散地快，反之则慢；含量较多者色素带也较宽。最后在滤纸上留下4条色素带，所以利用纸层析法能清楚地将叶绿体中的色素分离。叶绿素提取后的色素带分布：最上端橙**为胡萝卜素，其次**为叶黄素，再下面蓝绿色为叶绿素a，最后的黄绿色为叶绿素b。

生物学中，植物光合作用分辨色素的的一种液体。或者是化学中用于萃取的液体。

层析液的作用是溶解样品，作为样品的载体。例如，要分析A物质和B物质将其溶解于层析液中，由于是不同物质，其溶解能力和移动速度是不同的，所以可以在薄层板中得到明显的现象。溶解度大的物质在滤纸上扩散得快，离液面较远；溶解度小的物质在滤纸上扩散的慢，离液面较近。