(1)内环境包括组织液、血浆、淋巴,乳腺上皮细胞处在组织液中;免疫球蛋白属于大分子物质,运输时胞吞胞吐,体现细胞膜的流动性
(2)由图观察,与血浆相比,乳汁中特有的成分是乳糖和酪蛋白.
(3)脂质的合成场所是滑面内质网,脂肪的组成单位是甘油和脂肪酸.
(4)蛋白质是在核糖体上合成,内质网上加工,高尔基体分类包装,后囊泡运输出去,所以出现放射性的先后顺序是内质网→高尔基体→细胞膜.
(5)免疫球蛋白是在浆细胞中合成的.
(6)细胞膜选择透过性的功能特点主要依赖于细胞膜上的蛋白质实现的,按照其功能可分为通道蛋白和载体蛋白,通道蛋白协助水溶性物质进出细胞膜,需要载体蛋白的运输方式是协助扩散和主动运输,协助扩散不需要能量,主动运输需要能量.
故答案为:
(1)组织液 胞吞胞吐
(2)乳糖、酪蛋白
(3)内质网 甘油和脂肪酸
(4)内质网→高尔基体→细胞膜
(5)免疫球蛋白
(6)通道 水溶性 C
(1)水
水是动物所必需的养分,占动物体重的60%~70%,若动物严重缺水或失水达20%时可危及生命。体内水分的分布比例,细胞内液占65%~75%,间液占20%,血浆中占5%。因此在奶牛体内具有十分重要的作用和地位。
研究证明,在一般情况下,干奶母牛每天需饮水35升;日产奶15千克的母牛每天需饮水50升;日产奶40千克左右的高产母牛每天需饮水约100升。炎热季节母牛所需饮水量都超过春秋季及冬季。
(2)蛋白质
动物的一切生命和生产活动都必须有蛋白质参与。蛋白质在动物体内的营养作用不能为其他任何物质所取代或转化。蛋白质供给不足时,幼年动物生长发育迟缓、消瘦,种用动物精液品质下降,母畜性周期失常、胎儿发育不良,甚至产生弱胎、死胎,幼畜初生重小。日粮蛋白质过多,对动物同样有不良影响,不仅造成浪费,而且长期饲喂引起机体代谢紊乱,甚至产生疾病。
(3)能量
由于奶牛对于代谢能转化成维持和产奶净能的效率十分近似,为了便于应用,两者均用同一个指标。因此中国奶牛饲养标准中将产奶、维持和生长统一用产奶净能表示。奶牛饲养标准中采用相当于1千克含脂4%的标准乳能量,即3138兆焦产奶净能作为一个奶牛能量单位(NND)。奶牛能量需要可将其分成维持需要(包括温度变化时的额外需要)、产奶需要、增重需要和妊娠后期需要。
(4)粗纤维
奶牛是反刍动物,为了保持正常的消化机能,日粮中必须考虑粗纤维的供应量。粗纤维主要包括纤维素、半纤维素和木质素等,它们均对奶牛饲养意义重大:
①维持牛的瘤胃正常发酵和消化生理
当奶牛从日粮中获得足够的中性洗涤纤维时,它可保持每日7~8小时反刍时间,因此获得110~160升唾液进入瘤胃,进而使瘤胃中发酵产生的挥发性脂肪酸得到缓冲,使其氢离子浓度保持在100~1000纳摩尔(pH6~7),这样才使瘤胃内的细菌能正常繁殖。
纤维素的长度平均在064厘米以上时,才会起到上述作用。
②保持正常的乳脂率
当奶牛日粮中粗纤维小于17%,或有效中性洗涤纤维小于21%时,乳脂率会明显下降;当奶牛瘤胃中发酵过快,即发酵不均衡,也会使乳脂率下降,其直接原因是在瘤胃中中性洗涤纤维的消化率下降。
高产奶牛粗饲料的加工长度应当在1~4厘米,应占总中性洗涤纤维的40%~50%,才可保持瘤胃的正常生理机能,维持其正常产奶水平和乳脂率。
③防止瘤胃酸中毒和保持肢蹄健康
当奶牛日粮中有效中性洗涤纤维进食不足,使瘤胃发酵类型由乙酸发酵变为丙酸发酵,并引起瘤胃酸度升高(pH5~55),造成瘤胃中因积存大量乳酸而中毒,并且会发生瘤胃乳头(黏膜)角化不全和蹄叶炎等肢蹄病。
④防止发生四胃变位
干奶牛日粮中粗饲料加工太短(小于1厘米),精料比例大于50%时,均可发生四胃变位。故干奶牛的饲料应喂足3~4千克长为3~4厘米的禾本科粗料,防止四胃变位的发生。
(5)矿物质元素
①钙
99%的钙存在于骨骼和牙齿中,钙能调节肌肉和神经的兴奋性,钙浓度高时,兴奋性降低。钙在凝血过程中也发挥着重要作用。泌乳早期由于产奶对钙的需求量突然增加,会引起血钙降低,而导致产褥热。如不及时治疗,会导致奶牛心跳减慢以致不能站立、走动甚至昏迷死亡。犊牛缺乏钙引起佝偻病,成年奶牛缺钙易引起软骨症和骨质疏松症。以豆科作物为主的粗饲料一般可满足维持生长和一定限度产奶量的钙需要量。
②磷
体内80%的磷存在于骨骼和牙齿中。由于磷有多种作用,如参与能量代谢、是遗传物质的组成成分并参与体内脂肪运输等,所以磷缺乏没有特定症状。实际上由于磷与钙密切相关,磷缺乏症与钙缺乏症极为相似。另外,非特异性症状表现为食欲下降、抗病能力降低和繁殖率下降。饲喂大量谷物或植物性蛋白质饲料,或低质粗饲料时需要补充磷以满足需要。
③食盐
奶牛缺乏食盐后按严重性划分,缺乏症依次表现如下:舔或咬各种物品以获得钠盐;无食欲;不健壮、憔悴、眼睛无光泽、皮毛粗糙等;产奶量下降或增重缓慢;战栗、行动失调、虚弱和心跳不规律,严重者可引起死亡。奶牛储钠能力很强,只有长期缺乏才会表现出症状。
A.泌乳母牛食盐需要量
按日粮干物质净含量的046%或按配合饲料(或精料补充料)的1%计算,即可满足产奶母牛的需要。一般泌乳母牛每日喂15克食盐;日产奶量在20千克以上的需喂30克食盐。
B.非泌乳牛食盐需要
按日粮干物质进食量的025%~03%计算,即可满足需要。
夏天食盐量可略高,冬天食盐量不宜增加,因为吃盐多会引起饮水量增加,冬天水温低,多饮冷水会降低瘤胃功能,而且把冷水升温到体温会大量增加能量消耗,如1千克水从10℃升高到体温(385℃)消耗能量0119兆焦。
④钾
泌乳母牛钾的最低需要量为日粮干物质的09%。高产奶牛(30~60千克)为1%,热应激时,钾的需要量增加,约为日粮干物质的12%。奶牛体内含钾量为015%,钾从牛奶和汗中损失掉,故应在全夏季每日平衡供应才会有效。公牛和生长母牛钾的需要量为日粮干物质的065%。
⑤镁
牛奶中含镁量约为0015%,镁的需要量按产奶量的提高而增加。缺镁会使牛发生抽搐症,镁与磷缺乏,还会使乳汁呈酒精阳性,乳汁变稀。母牛镁的维持需要量为2~258克/(天·头),每产1千克奶另加012克。
日粮按干物质计算,约为02%。泌乳初期和日产奶量大于35千克的高产奶牛,对镁的需要量为025%~03%,在日粮中添加05%~08%的氯化镁即可满足需要,通常可添加到精料中。犊牛每千克体重镁需要量为12~16毫克,按日粮干物质计算,为007%~01%;干奶母牛、公牛和生长牛均为016%。
⑥硫
奶牛瘤胃微生物合成菌体蛋白和B族维生素都需要硫。瘤胃菌体可利用无机硫(硫酸钠)合成含硫氨基酸(蛋氨酸、胱氨酸),进而合成菌体蛋白。奶中含硫003%,其中大部分存在于蛋氨酸和胱氨酸中。泌乳牛硫的需要量约为日粮干物质的02%,泌乳早期牛为025%,犊牛为029%、干奶牛、公牛和其他生长牛为016%。高产奶牛日粮中添加硫酸钠、硫酸钙、硫酸钾和硫酸镁时能够维持其最适的硫平衡。保持泌乳牛最大饲料进食量的适当氮硫比为10~12∶1。奶牛日粮中缺硫会使饲料进食量和消化率下降,增重缓慢,产奶量下降。硫水平过高也会降低饲料进食量,并给泌尿系统造成过重负担,且干扰硒和铜的代谢。
(6)微量矿物元素
奶牛对微量元素的需要量小,但为机体生理功能所必需。微量元素通常毫克/千克来表示。在牛体内或牛奶中的含量也可以这样表示。微量元素包括:铁、铜、钴、锰、锌、硒、钼、铬和硅等10种元素,尤以前8种对奶牛更重要。
(7)维生素
维生素是奶牛维持正常生产性能和健康所必需的营养物质。有充分证据证明瘤胃微生物合成B族维生素及维生素K。故传统认为,对牛来说需要从饲料中供给的维生素只有维生素A、维生素D、维生素E三种。但是最近研究表明,随着奶牛产奶量提高,日粮中精料比例的增加以及饲料加工过程中维生素的破坏作用,在日粮中添加某些水溶性维生素可提高奶牛的生产性能,改善乳质、增强免疫机能和繁殖功能、减少疾病的发生,如硫胺素(维生素B1)、烟酸(维生素B5)和维生素C等。
奶牛需要从日粮中获得维生素A和维生素E。在紫外线照射下奶牛皮下的7-脱氢胆固醇能合成维生素D,但全封闭式的舍饲牛和高产奶牛均需在日粮中添加维生素D。瘤胃微生物能合成足够量的维生素K。同时,大量饲喂青贮而又缺少阳光照射的高产奶牛,特别是长期以秸秆为粗料的牛,日粮中需另外添加维生素D、维生素A和维生素E,以保持牛的健康和生产性能。
一斤牛血大约等于500毫升,而牛血清的提取量取决于血浆的含量和提取方法。在一般情况下,牛血清的提取率约为50-60%,也就是说,一斤牛血可以提取约250-300毫升的牛血清。然而,不同的提取方法和设备都可能影响提取效率,因此实际的提取量可能会有所不同。此外,提取出的牛血清经过多次纯化、浓缩和过滤等步骤后,才能得到用于实验和制药的高纯度牛血清制品。
血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡**透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。
基本介绍 中文名 :血清 外文名 :Serum 定义 :指纤维蛋白原已被除去的血浆 作用 :提供激素和各种生长因子等 血清类别,主要成分,主要作用,鉴别方法,血清,血浆,常见问题,保存方法,避免产生沉淀物,何谓热灭活,保存注意事项,血清兽药, 血清类别 1胎牛血清 胎牛血清替代品 2透析型胎牛血清 3天然低IGG胎牛血清 4干细胞培养胎牛血清 5特殊用途胎牛血清 6活性炭/葡萄糖处理胎牛血清 7胎牛血清替代物 8小牛血清 9新生牛血清 10加强型小牛血清 11补铁小牛血清 12成牛血清 13供体马血清 14兔血清 15鸡血清 16猪血清 17马血清 18其他动物血清 19合成血清替代品。 主要成分 血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。主要是: 第一:血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难; 第二:血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制; 第三:不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一。 主要作用 ●提供基本营养物质:胺基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。 ●提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(氢化可的松、地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。 ●提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。 ●提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。 ●对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢解毒中起重要作用,如SeO3,硒等 鉴别方法 血清 血液凝固析出的淡**透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡**透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆最大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。 血浆 血浆是血液的液体成分,血细胞悬浊于其中。人体含有2750-3300毫升血浆,约占血液总体积的55%。血浆的绝大部分是水(体积的90%),其中溶解的物质主要是血浆蛋白,还包括葡萄糖、无机盐离子、激素以及二氧化碳。血浆的主要功能是运载血细胞,同时也是运输分泌产物的主要媒介。 将新鲜血液离心,使血细胞沉降,上层淡**清液即是血浆。血浆与血清的区别是血清中不含纤维蛋白原等凝血因子。 常见问题 保存方法 血清应保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。 如何解冻血清才不会使产品质量受损? 将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰柜使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。 避免产生沉淀物 1、解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃,实验显示非常容易产生沉淀物。 2、解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生 3、请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。 4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。 5、若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理 欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。 何谓热灭活 一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。 有必要做热灭活吗 实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。 购买的时候注意询问厂家是否是已灭活血清。 保存注意事项 血清的保存应该注意以下几点: (1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰柜中4℃冰柜中保存时间切勿超过1个月由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰柜前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂 (2)热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清加热过程中须规则摇晃均匀此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化 (3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰柜中的血清放入4℃冰柜中溶解1天然后移入室温,待全部溶解后再分装在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀 (4)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清 (5)血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清 (6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量 血清兽药 根据注入细菌或病毒的不同,以及注射到不同种类的动物体内,得到不同免疫性能的抗毒血清。根据河南顺鑫动物血液制品有限公司的市场调研,当前市场上动物抗毒血清大致分为以下几类抗毒血清: 1、猪抗毒血清:猪瘟抗毒血清,猪蓝耳抗毒血清,猪圆环病毒抗毒血清,猪伪狂犬抗毒血清,猪细小病毒抗毒血清,猪口蹄疫抗毒血清,猪流感抗毒血清等。 2、禽抗毒血清:小鹅瘟抗毒血清,鸭肝抗体抗毒血清,鸭浆膜炎抗毒血清,禽流感抗毒血清,新城疫血抗毒清等 3、牛抗毒血清:牛口蹄疫抗毒血清,奶牛 炎抗毒血清,牛流行热抗毒血清,牛病毒性腹泻抗毒血清,牛出血性败血症抗毒血清等 4、羊抗毒血清:羊痘抗毒血清,羊口蹄疫抗毒血清,羊小反刍兽疫抗毒血清,羊快疫抗毒血清,羊肠毒血症抗毒血清,羊猝疽抗毒血清,羊黑疫抗毒血清等 5、犬抗毒血清:犬狂犬病抗毒血清、犬瘟热抗毒血清、犬副流感抗毒血清、犬腺病毒抗毒血清与犬细小病毒病抗毒高免血清,狐貉水貂的伪狂犬抗毒血清、细小病毒抗毒血清、乙脑抗毒血清等 血清 主要成份:蒙古黄芪提取液、抗病毒药、ALR、混感血清。 性状:本品为黄棕色澄明液体。 功能:本品能诱导机体产生干扰素,调节机体免疫功能,促进抗体形成, 巨噬细胞吞噬作用,增强机体对病原微生物的吞噬作用,具有抗炎、抗病毒、抗毒素和提高机体免疫功能等作用。 主治: 1、由猪瘟、伪狂犬病引起的体温升高,精神沉郁,磨牙,流涎,呕吐,肌肉痉挛,食欲减退;便秘、腹泻,拉恶臭粪便或便秘腹泻交替;体表局部出现紫红色出血点,指压不退色;呼吸困难,胸式呼吸等。 2、由传染性胃肠炎、流行性腹泻引起的呕吐、腹泻或水样腹泻、下痢、脱水;母猪母乳停止剧烈腹泻等症。 3、由猪细小病毒病、蓝耳病引起的母猪多次 而不受孕,早产、后期流产、产死胎、木乃伊胎、产弱仔猪或产少数仔猪;新生仔猪呼吸困难,运动失调;有时表现耳部发绀等。 4、对以上疾病混合感染或与细菌病混合感染都有很好的治疗效果;对鸡传染性法氏囊等病毒性疾病疗效确切。 用法用量:肌肉或静脉注射:一次量,每1kg体重,猪01-02ml, 鸡02-03ml,一日一次连用2-3天。 规格:10ml:黄芪多糖2g,抗病素药1g,其它适量。 包装:10ml×10支/盒
小牛血清与人血清离体的血液凝固之后,经血凝块聚缩释出的液体,即血清。血清可以抗病毒,增强抵抗力血清属于生物制剂 小牛血清含在离开母体后自身产生的一些代谢物质,当然也包括一些生长激素,而胎牛血清绝大部分的物质来自于母体 血液凝固析出的淡**透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡**透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆最大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。</span><br /> 血清细胞培养的发展,培养基的质量又是关键,而培养基的主要成份中动物血清对细胞的生长繁殖发挥着重要甚至是难以替代的作用。在动物血清的应用中牛血清又是最为广泛的,所以血清是医药生物技术产品中重要的原材料之一。保证血清质量也是促进生物制品质量提高的重要环节。血清的主要成分血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。<br />主要是:第一:血清的成份可能有几百种之多,目前对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;<br />第二:血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制;<br />第三:不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一。血清种类目前用于组织培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。<br />选择用牛血清培养细胞的原因:来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。 牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能。牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。<br /><strong>人血清</strong>主要作用: 1)提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。 2)提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。3)提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(氢化可松、地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。4)对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢解毒中起重要作用,如SeO3,硒等6)提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。<strong>人血清</strong>是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
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