一个典型的蛋白提取液应包括哪些组份？分别有什么作用？

1．比较原核微生物和真核微生物的异同点。 原核生物细胞有明显的核区，核区内只有一条双螺旋结构的脱氧核糖核酸（DNA）构成的染色体；原核生物细胞的核区没有核膜包围，称原核。真核生物细胞内有一个明显的核，其染色体除含有双螺旋结构的脱氧核糖核酸（DNA）外还含有组蛋白，核由一层核膜包围，称真核。

2． 细菌有哪几种形态？如何观察细菌的形态结构？

细菌是单细胞原核生物，即细菌的个体是由一个原核细胞组成，一个细胞就是一个生活个体。虽细菌种类繁多，但其基本形态分为：球状、杆状和螺旋状。分别称为球菌、杆菌和螺旋菌。

3． 什么是革兰氏染色？其原理和关键是什么？它有何意义。 革兰氏染色（Gram stain）是丹麦医生革兰（Hans Christian Gram）于1884年发明的对细菌染色的方法。初染，媒染剂，脱色，复染。细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异，主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物，乙醇能使它溶解，所以染色的前二步结果是一样的，但在G＋细胞中，乙醇还能使厚的肽聚糖层脱水，导致孔隙变小，由于结晶紫和碘的复合物分子太大，不能通过细胞壁，保持着紫色。在G—细胞中，乙醇处理不但破坏了胞壁外膜，还可能损伤肽聚糖层和细胞质膜，于是被乙醇溶解的结晶紫和碘的复合物从细胞中渗漏出来，当再用衬托的染色液复染时，显现红色。红色染料虽然也能进入已染成紫色的G+细胞，但被紫色盖没，红色显示不出来。

4． 比较革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁的成分和构造。

①革兰氏阳性细菌的细胞壁 G＋细菌细胞壁具有较厚（20-80nm）而致密的肽聚糖层，多达20层，占细胞壁成分的60%～90%，它同细胞膜的外层紧密相连（图2-9）。有的G＋细菌细胞壁中含有磷壁酸（teichoic-acid），也称胞壁质（murein），它是甘油和核糖醇的聚合物，磷壁酸通常以糖或氨基酸的酯而存在。由于磷壁酸带负电荷，它在细胞表面能调节阳离子浓度。磷壁酸与细胞生长有关，细胞生长中有自溶素（autolysins）酶类起作用，磷壁酸对自溶素有调节功能，阻止胞壁过度降解和壁溶。

如果细胞壁的肽聚糖层被消溶，G＋细胞成为原生质体（protoplasts），细胞壁不复存在，而只存留细胞膜。除链球菌外，大多数G＋细菌细胞壁中含极少蛋白质。

②革兰氏阴性细菌的细胞壁 G—细菌细胞壁比G＋细菌细胞壁薄（15～20nm）而结构较复杂，分外膜（outer membrane）和肽聚糖层（2～3nm）（图2-10）。在细胞壁和细胞质膜之间有一个明显的空间，称为壁膜间隙（periplasmic space）。

外膜 G—细菌细胞壁外膜的基本成分是脂多糖（lipopolysaccharide,LPS），它同细胞质膜相同之处也是双层类脂，但除磷脂外还含有多糖和蛋白质。

LPS的多糖部分包括核心多糖和O-特异多糖。O-特异多糖由重复分支的碳水化合物分子组成，含有已糖（葡萄糖、半乳糖和鼠李糖）和二脱氧已糖。由于糖的种类不同，使各种G—细胞具有不同特性的LPS。核心多糖（core polysaccharide）的主要组分是酮脱氧辛酸（ketodeoxyoctonate, KDO）。

外膜中还含有几种蛋白，如脂蛋白、通透蛋白。有些蛋白具有通孔作用（porin），调控外界分子进入细胞；有的蛋白分子可以作为噬菌体的受体；许多G—细菌对高等生物有致病性是由LPS的成分决定的，它的毒性组分常称为内毒素（endotoxins）。

肽聚糖层 G—细菌细胞壁的肽聚糖层很薄，在大肠杆菌和其它细菌中仅有单

层。肽聚糖层和外膜的内层之间通过脂蛋白连接起来。

壁膜间隙G—细菌细胞壁的外膜与细胞质膜之间存在明显的壁膜间隙，一层薄的肽聚糖处于其间，肽聚糖层和细胞质膜之间的间隙较宽，肽聚糖层至外膜之间的间隙较窄。大肠杆菌的壁膜间隙宽度为12～15nm，呈胶胨态。其间含有三类蛋白质：水解酶，催化食物的初步降解；结合蛋白，启动物质转运过程；化学受体（chemoreceptors），在趋化性中起作用的蛋白。

5细菌的细胞结构包括一般结构和特殊结构，试说明这些结构及其生理功能。

细菌的基本结构包括细胞壁、细胞质膜、细胞质及细胞核等四部分组成，有些细菌还有荚膜、鞭毛和芽孢等特殊结构。细胞壁具有保护细胞及维持细胞外形的功能。为鞭毛运动提供可靠的支点。此外细胞壁实际上是多孔性的，可允许水及一些化学物质通过，并对大分子物质有阻拦作用。细胞质膜（cytoplasmic membrane）,简称质膜（plasma membrane），是围绕细胞质外面的双层膜结构，使细胞具有选择吸收性能，控制物质的吸收与排放，也是许多生化反应的重要部位。中体（mesosome）或中间体 细菌的细胞膜折皱陷入到细胞质内，形成一些管状或囊状的形体称中体或中间体，其中酶系发达是能量代谢的场所。此外，细菌细胞分裂时与细胞壁的隔膜的合成，以及核的复制有关。细胞质具有生命物质所有的各种特征，含有丰富的酶系，是营养物质合成、转化、代谢的场所，不断地更新细胞内的结构和成分，使细菌细胞与周围环境不断地进行新陈代谢。细胞核在遗传性状的传递中起重要作用。鞭毛（flagella） 某些细菌能从体内长出纤细呈波状的丝状物称为鞭毛，是细菌的“运动器官”。荚膜的存在可以保护细菌在机体内不易被白血球所吞噬，使细菌具有比较强的抗干燥作用。

6． 芽孢有何特殊生理功能？其抗性机理是什么？芽孢的这些特点对实践有何指导意义？

芽孢其对不良的环境都有很强的抵抗能力。芽孢的高度耐热性主要与它的含水量低，含有DPA以及致密的芽孢壁有关。

7． 简述芽孢的生活史。 开始时细胞中核物质凝集向细胞一端移动，细胞质膜内陷延伸形成双层膜，构成芽孢的横隔壁，将核物质与一部分细胞质包围而形成芽孢。孢子壁破裂而通过中部、顶端或斜上方伸出新菌体。

8． 什么是质粒？为什么质粒可以作为基因工程的载体？

在很多细菌细胞中尚存有染色体外的遗传因子，为环状DNA分子，分散在细胞质中能自我复制，称为质粒（plasmid）。而附着在染色体上的质粒叫附加体。质粒携带着遗传信息，一般质粒携带的基因是细菌细胞的次级代谢基因；质粒可自我复制、稳定遗传，随细菌繁殖在子代细胞中代代相传，质粒在细胞中有时可自行消失，但没有质粒的细菌不能自行产生。质粒在基因工程的研究中重要的基因载体工具之一。

9． 什么叫菌落？怎样识别细菌和放线菌的菌落？

如果把单个微生物细胞接种到适合的固体培养基上后，在适合的环境条件下细胞就能迅速生长繁殖，繁殖的结果是形成一个肉眼可见的细胞群体，我们把这个微生物细胞群体称为菌落

细菌菌落特征包括菌落的大小、形态（圆形、丝状、不规则状、假根状等），侧面观察菌落隆起程度（如扩展、台状、低凸状、乳头状等），菌落表面状态（如光滑、皱褶、颗粒状龟裂、同心圆状等），表面光泽（如闪光、不闪光、金属光泽等），质地（如油脂状、膜状、粘、脆等），颜色与透明度（如透明、半透明、不透明等）

放线菌的菌落特征因种而异，大致分为两类： 一类是以链霉菌为代表，其早期菌落类似细菌，后期由于气生菌丝和分生孢子的形成而变成表面干燥、粉粒状并常有辐射皱折。菌落一般小，质地较密，不易挑起并常有各种不同颜色。 另一类中以诺卡氏菌为代表，菌落一般只有基质菌丝，结构松散，黏着力差，易于挑起，也有特征性的颜色。

10．比较原生质体、支原体和L—型细菌的异同。

支原体（Mycoplasmas） 又名类菌质体，是介于细菌与立克次体之间的原核微生物，其个体很小，是已知可自由生活的最小生物，也是最小的原核生物。它们突出的形态特征是没有细胞壁。因为没有坚韧的细胞壁，所以细胞柔软而且形态多变，具有高度多形性。着色力弱，革兰氏阴性。尽管细胞壁是细菌的重要结构成分，但自然界也存在无壁细菌，如支原体属于

这一类。G＋ 和G— 细菌由于自发突变或在培养时用青霉素处理可以形成无壁细胞或胞壁残缺不全的L型细胞。这种缺乏坚硬的肽聚糖细胞壁的L型细胞可以继续繁殖，甚至再形成胞壁。如果肽聚糖被全部去除无残余留下，则细胞壁不能再合成。这种形态同无胞壁的支原体是相关的，但不能混淆。原生质体则是细胞除去细胞壁后所剩余的部分。

11．举例说明几种细菌在食品加工工业中应用的概况。

(10)乳杆菌属（Lactobacillus） 菌体单个或呈链状。不运动或极少能运动，厌氧或兼性厌氧，革兰氏染色阳性，分解糖的能力很强。从牛乳、乳制品和植物产品中能分离出来。常常被用作生产乳酸、干酪、酸乳等乳制品的发酵菌剂。明串珠菌属（Leuconostoc） 菌体呈圆形或卵圆形，呈链状排列，革兰氏阳性，分布较广，常常在牛乳、蔬菜、水果上发现。肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroide)能利用蔗糖合成大量荚膜物质——葡萄糖。已被用来生产右旋糖酐，作为代血浆的主要成分。右旋糖酐具有维持血液渗透压的增加血溶量的作用，在临床上可以用于抗休克、消肿和解毒。但是，明串珠菌常给食品的污染带来麻烦，如牛乳的变粘以及制糖工业中增加了糖液粘度，影响过滤而延长了时间，降低了产量。

12．什么是真菌、霉菌和酵母菌？

真菌是微生物中的一个庞大类群。据统计，真菌约有12万余种。由于真菌的种类极多，一般认为真菌的菌体为单细胞或多细胞的分枝丝状体，或为单细胞的不分枝的个体。真菌细胞中没有光合色素，不能进行光合作用。真菌属真核生物，细胞中具有完整的典型的细胞核，与高等生物一样，能进行有丝分裂，其繁殖方式主要靠无性孢子或有性孢子。真菌包括了单细胞的酵母菌、单细胞或多细胞的丝状霉菌以致产生子实体的蕈菇。霉菌(mold) 是一些“丝状真菌”的统称。菌丝是由细胞壁包被的一种管状细丝，大都无色透明，宽度一般为3~10mm，比细菌的宽度大几倍到几十倍。菌丝有分枝，分枝的菌丝相互交错而成的群体称为菌丝体。霉菌的菌丝分有隔膜菌丝和无隔膜菌丝两种类型。酵母菌（yeast）是一群单细胞的真核微生物。这个术语是无分类学意义的普通名称。通常用于以芽殖或裂殖来进行无性繁殖的单细胞真菌，以与霉菌区分开。极少数种可产生子囊孢子进行有性繁殖。

13．霉菌的营养菌丝和气生菌丝有什么特点，其功能分别是什么？

营养菌丝，伸入培养基吸收营养。气生菌丝，向空中生成，形成繁殖器官。（特化形式）

14．什么叫“9+2”鞭毛，与细菌鞭毛有什么不同？ 鞭毛的结构 “9+2”鞭毛：9根纤丝（3根亚纤丝/根）+2根纤丝（2根亚纤丝）=11根纤丝（31根亚纤丝）。

15．真菌无性过程的各种孢子和有性过程的各种孢子的特点如何？并说明其实践意义。

1、无性孢子：主要方式，特点是分散，数量大。； 孢囊孢子：内生孢子，毛、根、犁头霉

分生孢子：外生孢子，最普遍 ； 节孢子：粉孢子，菌丝断裂形成；厚垣孢子：真菌休眠体

2、有性孢子卵孢子：配子囊（雄器、藏卵器）；接合孢子：同宗、异宗配合；子囊孢子：形态多样。子实体、子囊果；担孢子：担子菌特征

16．比较细菌、放线菌、霉菌和酵母菌菌落的特征。 细菌菌落形态包括大小、形状、隆起、边缘、表面状态、表面光泽、质地、颜色等等。放线菌菌落以放射状而得名，分二类，一类小而质密，不易挑起具各种颜色，另一类只有基菌丝，结构松散，黏着力差，易于挑起，也有特征性颜色。霉菌菌落疏松，绒毛状、絮状、蛛网状。酵母菌菌落与细菌相似，但大且厚。

17．如何识别毛霉、根霉、曲霉和青霉？

毛霉的菌丝体发达，呈棉絮状，由许多分枝的菌丝构成。菌丝无隔膜，有多个细胞核(图2-36)。其无性繁殖为孢囊孢子。 毛霉生长迅速，产生发达的菌丝。菌丝一般白色，不具隔膜，不产生假根，是单细胞真菌。以孢囊孢子进行无性繁殖，孢子囊黑色或褐色，表面光滑。有性繁殖则产生接合孢子。

根霉与毛霉同属毛霉目（mucorales），很多特征相似，主要区别在于，根霉有假根和葡匐菌丝。葡匐菌丝呈弧形，在培养基表面水平生长。葡匐菌丝着生孢子囊梗的部位，接触培养基处，菌丝伸入培养基内呈分枝状生长，犹如树根，故称假根（图2-37），这是根霉的重要特征。其有性繁殖产生接合孢子，无性繁殖形成孢囊孢子。

根霉菌菌丝体白色、无隔膜、单细胞，气生性强，在培养基上交织成疏松的絮状菌落，生长迅速，可蔓延覆盖整个表面。

曲霉菌丝有隔膜，为多细胞霉菌。在幼小而活力旺盛时，菌丝体产生大量的分生孢子梗。分生孢子梗顶端膨大成为顶囊，一般呈球形。顶囊表面长满一层或两层辐射状小梗（初生小梗与次生小梗）。最上层小梗瓶状，顶端着生成串的球形分生孢子。以上几部分结构合称“孢子穗”。孢子呈绿、黄、橙、褐、黑等颜色。这些都是菌种鉴定的依据。分生孢子梗生于足细胞上，并通过足细胞与营养菌丝相连。

青霉菌菌丝与曲霉相似，但无足细胞。分生孢子梗顶端不膨大，无顶囊，经多次分枝，产生几轮对称或不对称小梗，小梗顶端产生成串的青色分生孢子。孢子穗形如扫帚。美国研究者Thom按照分生孢子梗的形态，把青霉属分为四组。即一轮青霉：分生孢子梗只有一轮分枝；二轮青霉：分生孢子梗产生两轮分枝；多轮青霉：分生孢子梗具三轮以上分枝；不对称青霉：分生孢子梗上，不对称地产生或多或少轮层的分枝。孢子穗的形态构造是分类鉴定的重要依

18．简述真菌与人类的关系。 真菌在自然界中分布非常广泛，与人类关系密切。在食品加工业中具有重要的作用。很多食品都是应用真菌制造的，如各种酒类、面包、酱油、豆腐乳等。有些真菌可以直接用作食品，如香菇、木耳、草菇、蘑菇等，不仅是味道鲜美的菜肴，又是营养丰富的保健食品。我国名贵的药材灵芝、茯苓、天麻等也是真菌的菌丝体。在发酵工业上广泛用来生产酒精、抗生素（青霉素、灰黄霉素）、有机酸（柠檬酸、葡萄糖酸等）、酶制剂（淀粉酶、纤维素酶等）。此外，真菌在土壤中对有机物质的分解以及自然界的物质循环中起着重要的作用。在农业上用于饲料发酵，植物生长激素（赤霉素）、生物防治害虫等也有十分重要的作用。

但真菌也有对人类生活造成很大的危害。如许多霉菌会造成农作物许多病害；会引起农产品、纺织品和其它工业产品的发霉变质；受真菌污染的食品而发生腐败变质，因而降低或失去食用价值；还有真菌产生毒素，使人畜中毒，实验证明黄曲霉产生黄曲霉素可引起实验动物致癌。也有不少的真菌是病原菌，可引起人类和动植物的许多病害，给人类带来危害甚至灾难。

19．以啤酒酵母为例，说明酵母菌的形态和繁殖方式。

酵母菌是典型的真核微生物，细胞的形态通常有球状、卵圆状、椭圆状、柱或香肠状等多种，当它们进行一连串的芽殖后，如果长大的子细胞与母细胞并不立即分离，其间仅以极狭小的面积相连，这种藕节状的细胞串就称假菌丝。酵母细胞一般比细菌个体大得多，约为1~5×5~30µm。其细胞结构包括，细胞壁、细胞膜、细胞核、成熟酵母细胞中有液泡

20．什么叫病毒、类病毒、噬菌体？

病毒（virus）是一类比细菌更微小，能通过细菌滤器，只含一种类型的核酸（DNA或RNA），仅能在活细胞内生长繁殖的非细胞形态的微生物；类病毒是一种只有侵染性小分子RNA而没有蛋白质的感染因子；噬菌体（phage）是侵染细菌的微生物病毒

21．病毒的一般特性是什么？

病毒比其它微生物结构更简单，它是由蛋白质围绕着核酸组成的复合分子构成的，为非细胞结构型，而且只有一种核酸，核酸构成病毒的基因组，病毒没有完整的酶系统。

病毒不能在人工培养基上繁殖，必须进入活细胞中，依靠寄主细胞供给能量、养料、酶类等才能增殖，在寄主细胞内的增殖是以自我复制的方式形成新的病毒粒子。某些病毒的基因片段，也可以整合到寄主细胞核染色体的基因组中，并随细胞DNA的复制而复制，引起潜伏感染。

在活细胞内生活的病毒，对于能干扰细胞代谢的各种因素具有明显的抵抗力。如对甘油有耐受作用，不像细菌等微生物那样可被甘油脱水而死亡，也能抵抗多种抗生素的作用，但干扰素可阻止它的生长和成熟。

22．名词解释：病毒粒子 壳体 壳粒 核壳 包膜

成熟的具有侵染力的病毒颗粒称为病毒粒子。

壳体和核酸统称为核壳

壳体的化学成分是蛋白质，由称为壳粒（capsomer）的亚单位组成。壳粒是电镜下能见的最小形态学单位，由一种或多种肽链折叠而成

23．病毒的成分及其结构是什么？病毒核酸有哪些类型？

多数病毒只含蛋白质和核酸两种成分。少数大型病毒还含有脂类和糖类。

结构是壳体包裹着核酸。病毒只含一类核酸（DNA或RNA），至今还没发现一种病毒同时兼有两类核酸。大多数植物病毒的核酸为RNA，少数为DNA；噬菌体的核酸大多数为DNA，少数为RNA；动物病毒，包括昆虫病毒，则部分是DNA，部分是RNA。含DNA的病毒称为DNA病毒，含RNA的病毒称为RNA病毒。

无论是DNA还是RNA，都有单链（ss）和双链（ds）之分。RNA病毒多数是单链，极少数为双链，DNA病毒多数为双链，少数为单链。病毒核酸还有线状和环状之分，如玉米条纹病毒的核酸为线状单链DNA，大丽菊花叶病毒的核酸为闭合环状双链DNA。但RNA病毒核酸都呈线状，罕见环状。

此外，病毒核酸还有正、负链的区别。凡碱基排列顺序与mRNA相同的单链DNA或RNA，称（+）DNA链或（+）RNA链，凡碱基排列顺序与mRNA互补的单链DNA和RNA，称（-）DNA 链或（-）RNA链。如烟草花叶病毒的核酸属于（+）RNA，副黏病毒的核酸为（-）RNA。正链（+）核酸具有侵染性，可直接作为mRNA合成蛋白质，负链（-）没有侵染性，必须依靠病毒携带的转录酶转录成正链后才能作为mRNA合成蛋白质。

24．病毒有哪几种对称方式？ 螺旋对称，二十面体对称，复合对称

25．病毒分成哪几大类？ 病毒分为微生物病毒、植物病毒、脊椎动物病毒和昆虫病毒。

26．什么是病毒包含体？它有什么实践意义？

包含体是寄主细胞被病毒感染后形成的蛋白质结晶体，内含1个到几个病毒粒子。实践意义在昆虫病毒中，80%以上是农林业中常见的鳞翅目害虫的病原体。大多数昆虫可在宿主细胞内形成包含体。在包含体病毒中分为核型多角体病毒（NPV），在宿主细胞核内形成包含体和杆状的病毒粒子；质型多角体病毒（CPV），在宿主细胞质中形成包含体和球状病毒粒子；以及颗粒体病毒（GV），可在细胞核或细胞质中形成包含体和杆状病毒粒子。

27．什么是病毒的一步生长曲线？对生产和科研有何指导意义？

定量描述毒性噬菌体生长规律的实验曲线称为一步生长曲线，如图2-60所示。该种曲线反映出三个重要特征参数：潜伏期、裂解期、裂解量。实践意义是可以了解病毒的生长过程和规律，从而在利用和预防的过程中加以运用和控制。

28．什么叫毒性噬菌体？简述其增殖裂解细胞的过程。 可导到寄主细胞裂解的噬菌体称为毒性噬菌体。毒性噬菌体的入侵增殖一般包括吸附、侵入、复制、装配、释放等五个阶段。

29．什么是温和噬菌体？温和噬菌体与溶源性细胞的关系如何？ 有些噬菌体侵入寄主细菌后，并不像上述毒性噬菌体那样发展，而是它们的核酸和寄主细胞同步复制，寄主细胞不裂解，这类噬菌体称为温和噬菌体。含有温和噬菌体的寄主细胞称为溶源细胞（或细胞溶源化），。

30．名词解释：溶源细胞 溶源性 前噬菌体 溶源细胞的复愈

含有温和噬菌体的寄主细胞称为溶源细胞。在溶源细胞内的噬菌体核酸称为原噬菌体（或前噬菌体）。寄主细胞在受噬菌体感染而不发生裂解的特性称溶源性。溶源细胞有时消失了其中的原噬菌体，变成为非溶源细胞，这时既不会发生自然溃溶现象，也不发生诱发溃溶现象，称为溶源细胞的复愈或非溶源化

31．在发酵工业中，为何常常遭噬菌体危害？如何防治？

因为发酵工业中有许多产品是由细菌发酵完成的，具有庞大数量的细菌存在，而噬菌体是专门感染细菌的病毒，因而会受到噬菌体感染。

预防的措施主要有：a 决不可使用可疑菌种。认真检查摇瓶、斜面及种子罐所使用的菌种，坚持废弃任何可疑菌种。b 严格保持环境卫生。c 决不排放或丢弃活菌液。严格消毒或灭菌后才能排放。d 注意通气质量。空气过滤器要保持质量并经常灭菌。e 加强管道和发酵罐的灭菌。f 不断筛选抗性菌种，并经常轮换生产菌种。g 严格执行会客制度。

预防不成，一旦发现噬菌体污染，要及时采取合理措施。例如：a 尽快提取成品。b 使用药物抑制， 加入某些金属螯合剂（如03～05%的草酸盐、柠檬酸铵，可抑制噬菌体的吸附和侵入），抗生素，表面活性剂等。c 及时改用抗噬菌体的生产菌株。

第三章

1试述微生物的营养物质及其功能。 （1）水分：微生物细胞中的结合态水约束于原生质的胶体系统之中，成为细胞物质的组成成份，是微生物细胞生活的必要条件。游离态的水是细胞吸收营养物质和排出代谢产物的溶剂及生化反应的介质；一定量的水分又是维持细胞渗透压的必要条件。由于水的比热高又是热的良导体，故能有效地吸收代谢过程中产生的热量，使细胞温度不致于骤然升高， 能有效地调节细胞内的温度。微生物如果缺乏水分，则会影响代谢作用的进行。⑵ 碳源物质：提供碳素营养并作为能源物质。⑶ 氮源物质 ：微生物利用它在细胞内合成氨基酸和碱基，进而合成蛋白质、核酸等细胞成分，以及含氮的代谢产物。⑷ 无机元素 ：许多无机矿物质元素构成酶的活性基团或酶的激活剂；并具有调节细胞的渗透压，调节酸碱度和氧化还原电位以及能量的转移等作用。有些自养微生物需要利用无机矿质元素作为能源。⑸ 生长因子 ： 生长因子是微生物维持正常生命活动所不可缺少的、微量的特殊有机营养物，这些物质在微生物自身不能合成，必须在培养基中加入。缺少这些生长因子就会影响各种酶的活性，新陈代谢就不能正常进行。

2什么是碳源、氮源、碳氮比？微生物常用的碳源和氮源物质各有哪些？ C/N 比是指培养基中所含 C 原子的摩尔浓度与 N 原子的摩尔浓度之比。碳源：糖类，氮源：蛋白质

3什么叫生长因子？它包括哪些物质？ 生长因子是微生物维持正常生命活动所不可缺少的、微量的特殊有机营养物，这些物质在微生物自身不能合成，必须在培养基中加入。缺少这些生长因子就会影响各种酶的活性，新陈代谢就不能正常进行。生长因子是指维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等特殊有机营养物。而狭义的生长因子仅指维生素。

4微量元素和生长因子有何区别？

微量元素是无机物，生长因子是有机物。在代谢上，微量元素有的参与细胞成份构成或酶的构成，有的作为催化剂。生长因子一般不经结构改变，直接参与代谢。

5什么叫单纯扩散、促进扩散、主动运输、基团转位？比较微生物对营养物质吸收的异同。

单纯扩散： 营养物质通过分子的随机运动透过微生物细胞膜上的小孔进出细胞。其特点是物质由高浓度区向低浓度区扩散（浓度梯度），这是一种单纯的物理扩散作用，不需要能量。

促进扩散：经渗透酶参与的扩散方式。其过程是由浓度梯度来驱动的，不需耗费代谢能量。

主动运输：可见主动运输的特点是营养物质由低浓度向高浓度进行，是逆浓度梯度地被“抽”进细胞内的，因此这个过程不仅需要渗透酶，还需要代谢能量，能量由腺三磷（ATP）提供，渗透酶起着将营养物质从低浓度的周围环境转运进高浓度的细胞内不断改变平衡点的作用。

基团转位：在微生物对营养物质吸收的过程中，还有一种特殊的运输方式，叫基团转位。这种方式除具有主动运输的特点外，主要是被转运的物质改变了本身的性质，有化学基团转移到被转运的营养物质上面去。

（一）提取概念：采用一种方法，使中药里面有效的成分与无效的成分分开。

（二）提取方法：

1溶剂提取法：选择一个适当的溶剂将中药里面的有效成分提取出来。

（1）常用提取溶剂：石油醚、正己烷、环己烷、苯、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮、乙醇、甲醇、水。（极性小→极性大）

（2）提取溶剂的特殊性质：石油醚：是混合型的物质；氯仿：比重大于水；乙醚：沸点很低；正丁醇：沸点大于水。

①亲脂型溶剂与亲水型溶剂：石油醚、正己烷、环己烷、苯、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇与水混合之后会分层，称为亲脂型溶剂；丙酮、乙醇、甲醇与水混合之后不分层，称为亲水型溶剂。

②不同溶剂的符号。

（3）选择溶剂：不同成分因为分子结构的差异，所表现出的极性不一样，在提取不同级性成分的时候，对溶剂的要求也不一样。

1）物质极性大小原则：

①含C越多，极性越小；含O越多，极性越大。

②在含O的化合物中，极性的大小与含O的官能团有关：含O官能团所表现出的极性越大，此化合物的极性越大。

③与存在状态有关：游离型极性小；解离型（结合型）极性大。

2）选择溶剂原则：相似相溶。

（4）提取方法：

1）浸渍法：不用加热，适用于热不稳定化学成分，或含有大量淀粉、树胶、果胶、黏液质的成分提取。缺点：效率低、时间长。

2）渗漉法：不用加热，缺点：溶剂消耗量大、时间长

3）煎煮法：使用溶剂为水，适用于热稳定的药材的提取。缺点：不是用于含有挥发性或淀粉较多的成分的提取；不能使用有机溶剂提取。

4）回流提取法与连续回流提取法：使用溶剂为有机溶剂。

回流提取法有机溶剂消耗量大；连续回流提取法溶剂消耗量少，节省了溶剂，缺点：加热时间长，对热不稳定的成分在使用此法时要十分小心。

5）超声波提取法：提取效率高；对有效成分结构破坏比较小。

6）超临界流体萃取法：CO2萃取。特点：

①不残留有机溶剂，萃取速度快、收率高，工艺流程简单、操作方便。

②无传统溶剂法提取的易燃易爆危险；减少环境污染，无公害；产品是纯天然的。

③因萃取温度低，适用于对热不稳定物质的提取。

④萃取介质的溶解特性容易改变，在一定温度下只需改变其压力。

⑤可加入夹带剂，改变萃取介质的极性来提取极性物质。

⑥适于极性较大和分子量较大物质的萃取。

⑦萃取介质可以循环利用，成本低。

⑧可与其他色谱技术连用及IR、MS联用，高效快速的分析中药及其制剂中的有效成分。

2非溶剂提取法

（1）水蒸气提取法：适用于具有挥发性的、能随水蒸气蒸馏而不被破坏，且难溶或不溶于水的成分的提取。

（2）升华法：具有升华性质的成分提取。