PSP的GBA模拟器中绿宝石和牧场物语的金手指码！！

在电脑上玩的话呢，模拟器上有个金手指的地方，点开它，然后点击代码出现一个添加金手指的对话框，在代码一栏添上代码点击确定，回到原来的金手指界面再点确定就OK了！接下来给你牧场物语和绿宝石的金手指。还有，我要给你个建议，牧场物语和绿宝石都最好不要用金手指，因为金手指既麻烦，效果也只有几天，我推荐你用修改器。牧场物语修改器：http://zhishaoys168com/

绿宝石：http://wenwensosocom/z/q92484482htm

牧场物语：男生版牧场金手指

金手指

金钱: 02004080:3B9AC9FF(32位元)

体力最大: 020041F4: ff(调多不会当机)

别墅:020025D8:xx 如果这金手指不行, 请用---->02004e0c:XX

xx为01:山 02:街 04:海 07:所有

修改天气:020025e4:XXXX 这个不行用下面的一>02004E18:XXXX

0000:晴天 0001:雨天 0002:雪 0003:台风 0004:大雪

家

020027CC: xx xx为00:小 01:中 02:大

所有家具

020027CC:AA 020027CD:FF 020027CE:00 020027CF:FF

020027D0:FF 020027D1:FF

好感度:

狗好感 02004262:ffff(冠军:02004261:FF)

马好感: 0200261A:FFFF(冠军:02002618:FFFF)

鸡好感:02002A1E:FF 02002A4E:FF 02002A7E:FF 02002AAE:FF

02002ADE:FF 02002B0E:FF

02002B3E:FF 02002B6E:FF

牛或羊的好感:

02002c12:ff 02002c4e:ff 02002c8a:ff 02002cc6:ff

02002d02:ff 02002d3e:ff 02002d7a:ff

02002db6:ff 02002df2:ff 02002e2e:ff 02002e6a:ff

02002ea6:ff 02002ee2:ff 02002f1e:ff

02002f5a:ff 02002f96:ff

七个小矮人10个心(浅蓝色,**,蓝色,紫色,橙色,红色,绿色,(顺序,由上至下):

02004680:FF

020046a4:FF

020045f0:FF

02004638:FF

02004614:FF

0200465c:FF

020046c8:FF

七个小矮人做事的速度(收获,浇灌,照顾动物):

蓝色:

020045FC:FF

020045FD:FF

020045FE:FF

橙色

02004620:FF

02004621:FF

02004622:FF

紫色

02004644:FF

02004645:FF

02004646:FF

红色

02004668:FF

02004669:FF

0200466A:FF

浅蓝色

0200468C:FF

0200468D:FF

0200468E:FF

**

020046B0:FF

020046B1:FF

020046B2:FF

绿色

020046D4:FF

020046D5:FF

020046D6:FF

所有女孩红心

珀布利 02004359:ffff

玛莉 02004415:ffff

卡莲 020044a5:ffff

艾利 020044d1:ffff

琳 02004525:ffff

女神 020045a5:ffff

村民的好感:

02004324:ff 02004338:ff 02004364:ff 02004378:ff 0200438c:ff

020043a4:ff 020043b8:ff

020043cc:ff 020043e0:ff 020043f4:ff 02004420:ff 02004434:ff

02004448:ff 0200445c:ff

02004470:ff 02004484:ff 020044b0:ff 020044dc:ff 020044f0:ff

02004504:ff 02004530:ff

02004544:ff 0200455c:ff 02004570:ff 02004584:ff 020045b0:ff

020045c4:ff 020045dc:ff

BABYBABY的好感

020042b8:ff

BABY可以爬啦

020042d5:ff

资材数

020025FC xxxx

计步器

020041F8 xxxxxxxx

时间

游戏进行年数:020025e8:xx自己调吧！

季节天数

020025e9:xx

xx为春1:00夏1:01秋1:02冬1:03春2:04秋2:06冬2:07

小时: 020025EA:xxxx

效果:时间停在你所选的时间,不会继续一下,所有人都会不见,当你去睡觉后第二天!你会发现还是今天!!(假如你是星期二用这个金手指,明天依然是星期二!后天才是星期三)

7800:AM00:00 7801:AM01:00 7802:AM02:00 7803:AM03:00

7804:AM04:00 7805:AM05:00

7806:AM06:00 7807:AM07:00 7808:AM08:00 7809:AM09:00

780A:AM10:00 780B:AM11:00

780C:PM00:00 780D:PM01:00 780E:PM02:00 780F:PM03:00

7810:PM04:00 7811:PM05:00

7812:PM06:00 7813:PM07:00 7814:PM08:00 7815:PM09:00

7816:PM10:00 7817:PM11:00

直接结婚金手指

珀布利 0200435a:ff

玛莉 02004416:ff

艾利 020044d2:ff

卡莲 020044A6:ff

琳 02004526:ff

女神 020045a6:ff

离婚金手指

珀布利 0200435a:00

玛莉 02004416:00

艾利 020044d2:00

卡莲 020044A6:00

琳 02004526:00

女神 020045a6:00

手上道具:

8格背包:02004210:08 或 02006A44:08

02004214: xxxx 持有物第1格

02004218: xxxx 持有物第2格

0200421C: xxxx 持有物第3格

作者：龙神阿渡 2007-3-18 13:40 回复此发言

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2 男生版牧场金手指

02004220: xxxx 持有物第4格

02004224: xxxx 持有物第5格

02004228: xxxx 持有物第6格

0200422C: xxxx 持有物第7格

02004230: xxxx 持有物第8格

xxxx持有物表

0100 马铃薯 0200 黄瓜 0300 草莓 0400 包心菜 0500 蕃茄

0600 玉米 0700 洋葱 0800 南瓜

0900 凤梨 0A00 茄子 0B00 红萝卜 0C00 地瓜 0D00 菠菜

0E00 辣椒

0F00 S蛋 1000 M蛋 1100 L蛋 1200 金蛋 1300 P型蛋

1400 X型蛋 1500 温泉蛋

1600 蛋黄酱S型 1700 蛋黄酱M型 1800 蛋黄酱L型 1900 蛋黄酱G型

1A00 蛋黄酱P型 1B00 蛋黄酱X型

1C00 牛乳S型 1D00 牛乳M型 1E00 牛乳L型 1F00 牛乳G型

2000 牛乳P型 2100 牛乳X型

2200 S奶酪 2300 M奶酪 2400 L奶酪 2500 G奶酪 2600 P奶

酪 2700 X奶酪

2800 苹果 2900 蜂蜜 2A00 竹笋 2B00 野葡萄 2C00 蘑菇

2D00 毒蘑菇 2E00 松菇

2F00 青色草 3000 绿色草 3100 红色草 3200 **草

3300 橙色草 3400 紫色草 3500 蓝色草

3600 黑色草 3700 白色草 3800 月下美人

3900 营养饮品 3A00 营养饮品 (新产品) 3B00 醒神饮料

3C00 醒神饮料 (新产品) 3D00 葡萄酒 3E00 葡萄汁

3F00 饭团 4000 面包 4100 油 4200 小麦粉 4300 咖哩粉

4400 肉丸粉 4500 巧克力

4600 消闲茶(轻松茶) 4700 SUGDW苹果 4800 HMSGB苹果

4900 AEPLL苹果

4A00 荞麦粉 4B00 野葡萄酒 4C00 沙拉 4D00 咖喱饭

4E00 炖品 4F00 味增汤 5000 炒青菜

5100 炒饭 5200 喜好烧 5300 三明治 5400 果汁

5500 菜汁 5600 调和汁 5700 果奶

5800 菜奶 5900 混合奶 5A00 草莓牛奶 5B00 草莓酱

5C00 蕃茄汁 5D00 腌大头菜

5E00 烤马铃薯 5F00 腌黄瓜 6000 番茄酱 6100 爆米花

6200 玉米片 6300 烤玉米 6400 凤梨汁

6500 南瓜布丁 6600 炖南瓜 6700 酱烤茄子 6800 地瓜布丁

6900 烤地瓜 6A00 凉拌青菜

6B00 炒鸡蛋 6C00 菜肉蛋卷 6D00 蛋炒饭 6E00 白煮蛋

6F00 热牛奶 7000 奶油 7100 奶酪蛋糕

7200 乳酪 7300 苹果派 7400 苹果酱 7500 果烧 7600 蘑菇饭

7700 竹笋饭 7800 松菇饭

7900 寿司 7A00 果酱面包 7B00 奶油烤面包 7C00 葡萄面包

7D00 葡萄酱 7E00 咖喱面包

7F00 生鱼片 8000 煮鱼 8100 寿司拼盘 8200 披萨 8300

8400 咖喱 8500 天妇罗

8600 8700 8800 天妇罗面 8900 乾烧意面

8A00 面 8B00 曲奇(应该是饼乾吧)

8C00 巧克力曲奇 8D00 天妇罗 8E00 冰淇淋 8F00 蛋糕

9000 巧克力蛋糕9100 消闲茶 9200 土司 9300 法国土司

9400 布丁 9500 筑前煮 9600 赏月年糕

9700 年糕 9800 烤年糕 9900 回复草 9A00 失败作

9B00 失败作 9C00 失败作

9D00 失败作 9E00 失败作 9F00 失败作 A000 小鱼

A100 中鱼 A200 大鱼 A300 烤饭团

A400 天妇罗饭 A500 鸡蛋饭 A600 粥 A700 热蛋糕

A800 鱼糕 A900 大学芋 AA00 炸肉饼

0001 月泪草 0101 猫薄荷草 0201 青色奇幻草

0301 红色奇幻草 0401 三色花

0501 羊毛S型羊毛 0601 羊毛M型羊毛 0701 羊毛L型羊毛

0801 羊毛G型羊毛0901 羊毛P型羊毛 0A01 羊毛X型羊毛

0B01 S型羊毛球 0C01 M型羊毛球 0D01 L型羊毛球

0E01 G型羊毛球0F01 P型羊毛球 1001 X型羊毛球

1101 废矿石 1201 铜 1301 银 1401 金 1501 秘银

1601 奥利哈水晶 1701 阿得曼金刚石

1801 月亮石 1901 沙漠玫瑰石 1A01 粉红矿石

1B01 亚历山大石 1C01 贤者之石 1D01 钻石

1E01 祖母绿宝石 1F01 红宝石 2001 黄玉 2101 橄榄石

2201 萤石 2301 玛瑙 2401 紫水晶

2501 女神之玉 2601 河童之玉 2701 真实之玉

2801 未使用道具 2901 未使用道具 2A01 未使用道具

2B01 未使用道具2C01 手镯 2D01 项鍊 2E01 耳环

2F01 胸针 3001 杂草 3101 石头 3201 树枝

3301 烤地瓜料理瓶子 3401 番茄酱料理瓶子

3501 和狗玩的球 3601 海盗之宝

3701 古代鱼化石 3801 空罐 3901 长靴 3A01 鱼骨头

3B01 卡莲的葡萄酒 3C01 珀布利的泥团子 3D01 琳的音乐盒

3E01 让玛莉感动的书 3F01 艾利的干花

4001 cd1 4101 cd2 4201 cd3 4301 cd4 4401 cd5

4501 cd6 4601 cd7 4701 cd8

4801 cd9 4901 cd10

4A01 未使用唱片 4B01 未使用唱片 4C01 未使用唱片

4D01 未使用唱片 4E01 未使用唱片

4F01 创拌膏 5001 女神答对100次证书 5101 香水

5201 克裏夫身上掉下来的照片

5301 植物百科 5401 小矮人招待券 5501 包装的裙子

5601 面膜 5701 化妆水 5801 防晒霜

5901 资材 5A01 黄金资材 5B01 牛羊牧草 5C01 鸡饲料

5D01 猜拳100次女神证书 5E01 狗飞盘

道具箱：

02002958:xxXX 第一个格子(小xx代表道具的数量)

0200295A:xxXX 第二个格子

XX道具表：

00 镰刀 01 铜镰刀 02 银镰刀 03 金镰刀 04 秘银镰刀

05 诅咒镰刀 06 祝福镰刀 07 贤者镰刀

08 锄头 09 铜锄头 0A 银锄头 0B 金锄头 0C 秘银锄头

0D 诅咒锄头 0E 祝福锄头 0F 贤者锄头

10 铁斧 11 铜斧 12 银斧 13 金斧 14 秘银斧 15 诅咒斧

16 祝福斧 17 贤者斧

18 铁鎚 19 铜铁鎚 1A 银铁鎚 1B 金铁鎚 1C 秘银铁鎚

1D 诅咒铁鎚 1E 祝福铁鎚 1F 贤者铁鎚

20 水壶 21 铜水壶 22 银水壶 23 金水壶 24 秘银水壶

25 诅咒水壶 26 祝福水壶 27 贤者水壶

28 钓竿 29 铜钓竿 2A 银钓竿 2B 金钓竿 2C 秘银钓竿

2D 诅咒钓竿 2E 祝福钓竿 2F 贤者钓竿

30 牛种 31 羊种

32 白萝卜种子 33 蕃薯种子 34 黄瓜种子 35 草莓种子

36 包心菜种子 37 番茄种子 38 玉米种子

39 洋葱种子 3A 南瓜种子 3B 凤梨种子 3C 茄子种子

3D 红萝卜种子 3E 蕃薯种子 3F 菠菜

40 辣椒 41 牧草种子 42 月泪草 43 猫薄荷 44 奇幻花

45 三色花

46 刷子 47 挤奶器 48 剪刀 49 铃铛 4A 动物药

4B 青色羽毛 4C 计步器

4D 飞行石 4E 女神秘宝 4F 河童秘宝 50 真实密宝

矿场金手指：

使用方法:先挖到楼梯然后进去它会问你是否要下去<WBR>,然后才用金手指,用了以后,还不要下去,再按取消<WBR>在下去就成功了

泉矿： 02005cf8:0034（第1层）~0132（255层）<WBR>[0097=100层，00fb=200层]

湖矿： 02005cf8:0133（第1层）~0232（255层）<WBR>[0196=100层，01fa=200层

绿宝石金手指：口袋妖怪绿宝石金手指

直接升到一百级 02023e94:270f （无限增加经验值直至删掉金手指）

首位PM (升级后会被打回原形……)

等级 020241E4:xx

HP 020241E6:03E7

HP上限 020241E8:03E7

能力最高

020241EA:03E7

020241EC:03E703E7

020241F0:03E703E7

战斗经验

02000076:03E7

第一只PM物攻999

020000A4:03E7

地点转移金手指 （这些金手指是我试验过的，其他网站类似的金手指不一定准确）一次用一条，到了后立刻删除

02031F84:yy 02031F85:0A1A 南岛水都捕捉地点

xxyy

0001 你家的那个小镇

0002 101路上方的小镇

0003 格斗系道观小镇

0004 火系道观小镇

0005 火山灰道观小镇

0006 117路左边小镇

0007 幻岛小镇

0008 普通系道观小镇

0009 海滩上方小镇

000A 电系道观小镇

000B 石系道观小镇

000C 飞行系道观小镇

000D 驻守区旁小镇

000E 超能力道观小镇

000F 水系道观小镇

0010 第一个四大天王

0011 乘船老爷爷家

0012 四口之家

0013 坐缆车的地方

0014 火山灰镇得TM28的地方

3810 潜水洞

3811 冠军之路（斗士载入）

3812 看看洞

3813 潮汐山洞(落)

3814 潮汐山洞(涨)

3815 无人发电厂

3816 搁浅船

3819 战斗都市右上角的屋子里

381A 梦幻岛 进入森林，把模拟器跳侦设置改成150%。梦幻会在草丛里逃来逃去。记住你别太快走。如果你前方好象有个硬的东西挡住你你马上按a。因为挡住你的是梦幻。（不是岩石。）。然后梦幻就会和你战斗了。

4210 以前捕捉古拉顿和海皇牙的洞

4211 废弃船

4217 废弃船拿钥匙的屋子

4219 新大陆战斗塔

421A 凤凰、路基亚捕捉地点

0A1A 南岛水都捕捉地点

0017 狩猎区（可自用宠物，精灵球，不限步数）

5518 天空龙捕捉地点（通关后）

6718 海皇牙捕捉地点（通关后）

6918 古拉顿捕捉地点（通关后）

3A1A 迪奥西斯捕捉地点

注：身上首位PM等级VBA金手使用后，要删除金手，再要吃了1个奇异甜食（怪兽升1级）后，才能开始练级，否则可能毁档，切记！！！

2敌方身上首位PM能力或所遇PM能力

PM等级0202443C:xx<xx为等级>

HP : 0202443E:03E7

HP : 02024440:03E7(HP上限)

攻击: 02024442:03e7

防御: 02024444:03e7

特攻: 02024446:03e7

特防: 02024448:03e7

敏捷: 0202444A:03e7

状态<非战斗中>：02024438：XX<XX为状态代码>

敌方身上首位PM能力或所遇PM能力VBA金手使用后，抓住PM后，要删除金手，再要吃了1个奇异甜食（怪兽升1级）后，才能开始练级，否则可能毁档，切记！！！

抓PM时要记住身上要保证没6只PM，如满6只后，抓住PM将会自动存入电脑的PM箱内恢复原样

[宠物小精灵等级]

lv 5=05

lv 10=0a

lv 15=0f

lv 20=14

lv 25=19

lv 30=1e

lv 35=23

lv 40=28

lv 45=2d

lv 50=32

lv 55=37

lv 60=3c

lv 65=41

lv 70=46

lv 75=4b

lv 80=50

lv 85=55

lv 90=5a

lv 95=5f

lv 100=64

状态代码

00普通

10烧伤

20冰冻

30冰冻

01~07睡眠

11~17睡眠

21~27睡眠

40~47麻痹

50~57麻痹

60~67麻痹

70~77麻痹

08~0F毒

18~1F毒

28~2F毒

38~3F毒

48~4F毒

58~5F毒

68~6F毒

78~FF毒

调敌方身上1~6位PM能力 [注：因调HP蠹次���琀P的就不写了]

[注：03e7<16位>即为999<10位>，切记！！！]

口袋妖怪LVBAOSHIGBA金手指大全(转) 吧里可能还没有,需要的进来看

攻击: 02024442:03e7

防御: 02024444:03e7

特攻: 02024446:03e7

特防: 02024448:03e7

敏捷: 0202444A:03e7

敌方身上2位PM能力

PM等级020244A0:xx

攻击: 020244A6:03e7

知识：

2005年，一场“环保风暴”在中国内地刮起，30个总投资达1179亿多元的在建项目被国家环保总局叫停，其中包括同属正部级单位的三峡总公司的三个项目。理由是，这些项目未经环境影响评价，属于未批先建的违法工程。

环境恶化无路可退中国的环境问题并非始自今日。早在上世纪90年代，环境污染问题就已非常严重。如淮河流域。在上世纪90年代五类水质就占到了80％，整个淮河常年就如同一条巨大的污水沟。1995年，由环境污染造成的经济损失达到1875亿元。

据中科院测算，目前由环境污染和生态破坏造成的损失已占到GDP总值的15％，这意味着一边是9％的经济增长，一边是15％的损失率。环境问题，已不仅仅是中国可持续发展的问题，已成为吞噬经济成果的恶魔。

目前，中国的荒漠化土地已达2674万多平方公里；全国18个省区的471个县、近4亿人口的耕地和家园正受到不同程度的荒漠化威胁，而且荒漠化还在以每年1万多平方公里的速度在增长。

七大江河水系中，完全没有使用价值的水质已超过40％。全国668座城市，有400多个处于缺水状态。其中有不少是由水质污染引起的。如浙江省宁波市，地处甬江、姚江、奉化江三江交汇口，却因水质污染，最缺水时需要靠运水车日夜不停地奔跑，将乡村河道里的水运进城里的各个企业。

中国平均1万元的工业增加值，需耗水330立方米，并产生230立方米污水；每创造1亿元GDP就要排放288万吨废水。还有大量的生活污水。其中80％以上未经处理，就直接排放进河道，要不了10年，中国就会出现无水可用的局面。

全国1/3的城市人口呼吸着严重污染的空气，有1/3的国土被酸雨侵蚀。经济发达的浙江省，酸雨覆盖率已达到100％。酸雨发生的频率，上海达11％，江苏大概为12％。华中地区以及部分南方城市，如宜宾、怀化、绍兴、遵义、宁波、温州等，酸雨频率超过了90％。

在中国，基本消除酸雨污染所允许的最大二氧化硫排放量为1200万~1400万吨。而2003年，全国二氧化硫排放量就达到21587万吨，比2002年增长12％，其中工业排放量增加了147％。按照目前的经济发展速度。以及污染控制方式和力度，到2020年，全国仅火电厂排放的二氧化硫就将达2100万吨以上，全部排放量将超过大气环境容量1倍以上，这对生态环境和民众健康将是一场严重灾难。

1月27日，瑞士达沃斯世界经济论坛上有人预言，如果再不加以整治，人类历史上突发性环境危机对经济、社会体系的最大摧毁，很可能会在不久的将来出现在中国。

治理污染陷于两难有一种说法，要在经济发展的同时控制好环境，在环保方面的投入须达到GDP的15％以上。但这是在环境保护本来就非常良好的情况下，在中国，根据上海的经验，要真正有效地控制环境，环保投入须占到GDP的3％以上。而在过去20年里，中国每年在环保方面的投入，在90年代上半期是05％，最近几年也只有1％多一点。环保是一种“奢侈性消费”，投入大，对GDP贡献小，因此，一些本应用于环保方面的专项资金，也被挪作他用。

目前中国在环境问题上进退两难:再不治理，未来无法保障；真要治理，则需大规模投入，眼前的经济又难以承受。

有人算过，云南滇池周边的企业在过去20年间，总共只创造了几十亿元产值，但要初步恢复滇池水质，至少得花几百亿元，这是全云南省一年的财政收入。淮河流域的小造纸厂，20年累计产值不过500亿元。但要治理其带来的污染，即使是干流达到起码的灌溉用水标准也需要投入3000亿元。要恢复到20世纪70年代的三类水质，不仅花费是个可怕的数字，时间也至少需要100年。

违法成本低执法成本高就微观角度说，在过去20年里，国内制造业在无法依靠技术进步降低能耗、降低成本的情况下，只能朝两个方面挖潜:一是工资，二是环保。最简单的事，例如水泥生产，要达到起码的环保要求，每吨水泥需增加8元成本，占水泥出厂价的5％。纺织业每年排放的废水超过10亿立方米，如要处理，则每吨需花费12~18元。提高生产成本5％。而绝大多数企业根本就没有这么高的利润率。因此只能在环保问题上打游击:或是不建任何废水处理设施:或是建立以后就当摆设，白天把污水放到处理池里，晚上没人时就排放到河里，这样就可以节省一大笔成本。在市场的无序化竞争中，这5％的成本。往往就决定了企业的盈与亏、生与死。

而中国在环保执法上的两高一低——守法成本高、执法成本高、违法成本低，也助长了这种倾向。通常的情况是，环保部门为取证一件违法偷排事件，需耗费50万元，而最终落到违法企业头上的罚款，则只有区区5万元，包括正在劲刮的所谓“环保风暴”。

一些投资数十亿元的特大电站项目，违反环境评价擅自开工建设，最后的罚款也不过20万元。区区20万元罚款，对于一个投资超亿元的项目来说，简直是九牛一毛。这样的处罚力度对违法行为谈何震慑力？因此《环保法》历来被人称为“豆腐法”。

一场环保风暴将涉及数十万家企业，由此带来的结果必然是:大批企业的破产倒闭，大量人员失业，企业成本大幅提高，国内物价指数迅速地突破两位数。因此，无论是宏观成本，还是微观成本，实际上都无法承受。

四个因素阻碍环境治理对环保部门在执法过程中遭遇的巨大阻力，国家环保总局副局长潘岳总结出了四个方面的原因:

首先，一些地方对科学发展观认识不到位，单纯追求经济增长速度。一些高能耗、重污染的小冶炼、小铁合金、小化工等被明令禁止的项目，在一些地方竟然呈现蔓延的趋势。

其次，部分地方政府在招商引资中，片面强调简化审批，限期办理相关手续。而不管项目是否会存在污染情况，只要来投资就批准，个别地方在建设项目环境影响审批中存在“首长意志”、“先上车，后买票”等违法现象。

再次，环评质量亟待提高。有些环评单位不坚持科学评价，不敢以客观的事实和科学的数据说话，评价结论含糊，模棱两可，将项目的环境可行性与否的结论推给审批部门，甚至极个别的环评单位弄虚作假，编造、伪造数据，或者隐瞒事实，严重影响环境影响评价制度的落实，使环境影响评价流于形式，丧失了第三方咨询机构起码的科学性和公正性。

最后，信息公开和公众参与工作开展不足。我国目前的环境影响评价制度是政府主导型，以有限的政府力量去监管数量庞大的建设项目，显然力不从心。

其实，环评法遇到的阻力更有背后的经济利益在驱使。

掀起真正的“环保风暴”

中国是一个在环境上回旋余地极小的大国，又是一个在全球资源、市场基本被瓜分完毕后崛起的一个后起国家。中国没有任何可能像某些先行国家那样，等到环境恶劣到极点后再来治理。

但中国又是一个发展中国家，别人走过的先发展经济、再治理污染的道路，中国不可避免的也会走一遭。

世界各国的历史已经表明，在经济增长与环境变化之间有一个共同的规律:一个国家在工业化进程中，会有一个环境污染随国内生产总值同步高速增长的时期，尤其是重化工业时代:但当GDP增长到一定程度，随着产业结构高级化，以及居民环境支付意愿的增强。污染水平在到达转折点后就会随着GDP的增长反而戛然向下，直至污染水平重新回到环境容量之下，此即所谓环境库兹涅茨曲线，当年日本的发展过程就是这一规律。

毫无疑问，中国没有可能跨越这样一个重化工业时代。因为中国的人口太多，国家太大，无法像芬兰那样，在本国制造业尚不发达的情况下，借助于全球化分工，直接进入高科技时代。

上世纪90年代末，笔者曾回过苏南老家，小时候那种清清河水，坐着船就可到达四乡八镇的情景已一去不复返了。而令笔者吃惊的是，造成这种局面的主要因素竟然是最普通的生活垃圾。在中国，即使不发展工业，由人口增长带来的污染物，也足以使环境恶化到令人无法容忍的地步，即便是治理这样的污染，也需要大笔投资，需要有经济基础。

中国在治理污染问题上，任重道远，需要依法办事，制止恶性环保事件的发生，延缓环境恶化的速度

1、 绿色食品指什么食品？（C）

A，蔬菜，水果 B、绿颜色的食品 C安全无污染食品 D有丰富营养价值的食品

2，下列哪一项是可以分类回收，循环再生的垃圾。（C）

A回收废塑料 B回收剩饭 C回收废纸 D回收生物垃圾

3、我国环境保护事业是那一位***的 倡导下开创起来的？（D）

A、毛泽东 B、刘少奇 C、邓小平 D、周恩来

4、下列哪项不属于环境污染？（A）

A，生物污染 B。食品污染 C，噪音污染 D，土壤污染

5，环境现状评价包括那三方面？

A，环境污染评价 B、生态评价 C、美学评价。 D土地质量评价

6、我国酸雨面积区占国土面积的（B）

A 20% B40% C 30%

7、选无磷洗衣粉( B )。

A保护衣物 B 防止污染 C保护双手

8、湿地保护是环境保护的重要领域，是国际自然保护的一个热点；世界湿地日为每年的：（ C ）。

A 3月12日 B 5月2日 C 2月2日

9、我国面积最大的自然保护区(C)。

A喀纳斯湖保护区 B天池保护区 C 阿尔金山保护区

10、巴音布鲁克天鹅国家级保护区是（B）大天鹅最集中的繁殖地。

A我国 B世界 C亚洲

11一节1号电池能使一平方米的土地永远失去利用价值，一粒扣式电池可污染（C）A1立方米水 B1000立方米水 C6万立方米水

12、中国野生动物保护协会的会徽是（ B ）

A丹顶鹤 B 大熊猫 C骆驼

13、新疆的动植物王国，被称为神秘莫测的仙境的是（ A ）国家级自然保护区。

A哈纳斯 B天池 C阿尔金山

14、以下说那种是错误的：( C )

A 三个废餐盒可以做一把学生用尺

B 废易拉罐溶解后可以100%的无数次循环再造成新罐

C 废玻璃无法回收利用

15、国家重点保护野生植物分（ A ）。

A．一、二两级 B．重点非重点两级 C．一、二、三级

16、为保护蓝天，我们在出门时，应该(C)。

A 尽量选择乘坐舒适的交通工具B使用私人车C 尽量选择乘坐公共交通工具

17、减少“白色污染”我们应该(A)

A 自觉地不用、少用难降解的塑料包装袋B 乱扔塑料垃圾

C 尽量使用塑料制品

18、因环境因素而导致的环境变化是指(A)

A环境影响 B环境改善 C环境改造

19、使用复印机时，复印机的带高电压的部件与空气进行化学反应产生的臭氧(B)

A 没有影响 B 对人体健康有害 C 对人体健康有益

20、环境监测的对象有：（A）

A 大气、水体、土壤、生物、噪声

B 大气、市容、土壤、生物、噪声

C 大气、交通、土壤、生物、噪声

21、当前人类社会面临六方面的严重环境问题之一：（B）

A 生态环境恶化问题 B 生态环境恶化与新资源开发带来的环境问题

C 新资源开发的问题

22、我国确立（C）为一项基本国策。

A民族团结 B扶贫 C环境保护

23、生物圈一般是指包括（B）所形成生物系统的边界圈与大自然边界圈相互关系、影响。

A 人类、动物 B 人类、动物、植物 C 动物、植物

24、21世纪是（C）世纪。

A 科技 B经济 C环保

25、随着绿色消费运动的发展，全球已逐渐形成一种（B）的生活风尚。

A追求时尚 破坏环境 B 保护环境 崇尚自然 C保护环境 盲目消费

餐厅、饭店使用一次性筷子、塑料餐具利弊谈

答：利：卫生，不易传染各种疾病。

弊：塑料餐具不易处理，造成“白色污染”。一次性筷子浪费大量木材，长此以往，将会破坏森林，破坏生态环境。

结论：弊大于利、应停止使用

（四）、问答题抢答

1、工业“三废“和生活”三废“各指什么？

答：工业”三废“是指废气、废水、废渣；

生活”三废“是制粪便、垃圾、污水。

2、你知道食品污染按其污染性质大致可分为哪两类？

答：A、生物污染 B、化学性污染

3、通过污染食品对人体造成危害的农药主要有那些？

答：A、有机氯农药 B、有机磷农药 C、有机汞农药

4、我国土壤污染物主要是什么？（全班同学举手抢答）

答：农药和重金属（尤其是镉）

5、水污染中常说的“五毒”物质是什么？

答：酚、 氰、 汞、 铬、 砷。

6、现在世界约有18亿人因为饮用了受生物污染的水而致病，你知道饮用这些受污染的水主要会得那些病吗？（至少答对4种）

答：有痢疾、伤害、副伤害、霍乱、小儿麻痹、传染性肝炎、血吸虫病、姜片虫病等。

7、水体被污染的途径有那些？（至少答3种以上）

答：城市污水，工业废水，含有农药、化肥、有机物的农田，大气沉降物，放射性散落物及酸雨等。

8、对绿色植物损伤最大的五种气体是什么？

答：氧化氮、乙烯、氯气、氟化物和二氧化硫。

9、环境污染主要有哪几种？

答（1）大气污染（2）水污染 （3）土壤污染 （4）食品污染（5）放射性污染 （6）噪音污染

10、吸烟危害健康，你知道香烟中含那种主要致癌物质和放射性物质？

答：尼古丁；钋-210，

11、环境噪音主要来源于那四个方面？

答：交通、工业生产、建筑工业、社会生活

青少年参与城市环境保护

环境毫无保留地奉献它的一切，人类就是靠它的给养而诞生，繁衍并发展的。在环境污染日益严重的今天，是我们为环境做点什么的时候了。

中国古代哲学家反复强调说与环境和谐是至高的美德。高尔基也曾说过“给予比得到好。”这些话都含有深刻的哲理。人类要发展，就一定要保护环境。否则环境污染就会成为阻碍人类进步的绊脚石。我们只有在向环境索取时，报以双倍的回赠，让我们与环境和谐相处，互利互助。

我们可以总结出城市的七大污染。

一、大气污染

二、水体污染

三、噪声污染

四、固体废物污染

五、电磁辐射污染

六、热污染

七、居室环境污染

另外还兼有绿地面积小，城市“拥挤症”等问题。

其实这些污染的存在我们城市居民是有目共睹并深受其害的，我们青少年必须做的就是参与到城市环境保护中。我觉得可分为二步，意识与行动。

意识是非常重要的，因为意识指导人们行动。我们必须意识到环保的重要性。因为环境与人类夕夕相关，若是我们过分地向环境索取而一点儿不爱惜它，我们必将受到环境的惩罚。而有的灾难与破坏一旦造成，就很难弥补了；环境一旦已严重污染，再将它恢复原貌比现在保护它要难得多。所以说，若现在不保护环境，待将来失去它的时候就会懂得珍惜，就会追悔与绝望。太迟了！为了人类的可持续发展，我们应当把环保付诸实践。

保护环境的行动需要每个人的参与，无论力量大小，人人都应从自己做起，从身边做起，

像爱护自己的家，自己的财富一样爱护环境。

青少年应从切实可行的小事做起，如下：

1． 定期宣传环保知识

2． 每年植一棵树

3． 节约草稿纸，不用一次性餐具

4． 轻声慢步，不乱扔废弃物

5． 坚决支持环保型产品

6． 回收有利用的废物，处理有毒害的垃圾

环保任重而道远，决非朝夕之功，青少年应该坚持环保，让环境伴着我们的成长而更好地、稳定地发展。

保护地球，从我做起

古往今来，地球妈妈用甘甜的乳汁哺育了无数代子孙。原来的她被小辈们装饰得楚楚动人。可是，现在人类为了自身的利益，将她折磨得天昏地暗。人类只有一个地球；而地球正面临着严峻的环境危机。“救救地球”已成为世界各国人民最强烈的呼声。

我为周围环境的恶化而感到心痛，我想：作为未来接班人的青少年，如果不了解人类环境的构成和环境问题的严重性，无视有关环境保护的法律法规，不去增强环境保护意识，自觉履行保护环境的义务的话，我们的生命将毁在自己的手中，老天将对我们作出严厉的惩罚。为此我下定决心要从我做起爱护环境，保护我们这个赖以生存的家园，做一个保护环境的卫士。

在刚过去的一年中，我积极参加学校开展的植树活动，带领我们初一(6)中队的班干部创立了“绿色天使”植绿护绿小组，鼓励队员们在校园里认养了一棵小树苗，利用课余时间给它梳妆打扮，为它长成参天大树打下了基础。在学校组织的“让地球充满生机”的签字活动中，我郑重地在上面签下自己的名字，并写下了自己对环保的决心和期望，对美好未来的憧憬。我积极参加学校在世界环境日举行的有奖征稿，认真查阅、收集各类资料，进行社会调查，撰写有关环境治理设想方面的文章，我经常去参加学校组织的环保讲座，观看环保方面的录相带，积极参预环保知识问答调查活动，认真填写每一项提问。我参与了“红领巾植绿护绿队”的网站建设，在上面发布大量的环保和环保知识，以及关于环保的各方面的法律知识，我国在环保方面发展动向、世界各国的环境保护情况；每个月我都利用网络、报纸，查找一些最新的不同的专题和板块“环保资讯”来告诉大家；还定期制作一些宣传板来宣传环保知识和生活中的环保常识。提高了大家的环保意识；号召同学们从不同的方面来关爱自己的家园，从身边的小事做起，为周围的环境奉献自己的一份力量!我积极动员身边的人一起来依法保护和建设人类共有的同样也是仅有的家园，为促进经济和社会的可持续发展，为人类的文明做出贡献。我还和同学们共同发起“养一盆花，认养一棵树、爱惜每一片绿地，让我们周围充满绿色”和“小用塑料袋不使用泡沫饭盒和一次性筷子，让我们远离白色污染”的倡议。让我们放下方便袋，拿起菜篮子，让我们共同走向美好的绿色的明天，走向辉煌、灿烂的未来!

据我收集到的一份报告说：“环境问题是由于人类不合理地开发和利用自然源所造成的。触目惊心的环境问题主要有大气污染、水质污染、噪声污染、食品污染、不适当开发利用自然资源这五大类。”一个个铁一样的事实告诉我们，它们像恶魔般无情地吞噬着人类的生命。它威胁着生态平衡，危害着人体健康，制约着经济和社会的可持续发展，它让人类陷入了困境。为此我作出宣告：“只要我们——人类有时刻不忘保护环境的意识，有依法治理环境的意识，地球村将成为美好的乐园”。未来的天空一定是碧蓝的，水是清澈的，绿树成荫鲜花遍地，人类可以尽情享受大自然赋予我们的幸福。

“真正检验我们对环境的贡献不是言辞，而是行动。”虽然我现在做得只不过是一些微小的事，但是我坚信要是我们人人都有保护环境的责任心，从自己做起，从小事做起，携手保护我们的家园，自然会给人类应有的回报。在温暖的摇篮——草原上小憩；在慈祥的笑脸——天空下成长，在爱的源泉——河流中沐浴 ”

故事：

“天下第一水”边的一幕

九寨沟的风景，中外闻名。九寨沟的海子，更是秀绝天下。蓝天映照之下，溢彩流光，变幻多姿，素有“天下第一水”之美益。来此观光的中外游客络绎不绝，留连忘返。可是，不久前一位游人却向我诉说了那里一件令人揪心的真实故事

这一天的海子边，游人很多。湖水清碧如镜，映鉴出一带青山，大家都沉醉于眼前的美景中，但不久，这和谐的美便被无情的破坏了。只见前面走来几为打扮入时的男女青年，他们一边吃着东西，一边听着手提式录音机里放出的糟杂的摇滚音乐，好不快乐的样子。在海子边，他们站定了。波光粼粼中，那一尾尾活泼机灵的鱼儿，在游戏穿梭。

“啪！”的一声，一块苹果皮扔进了水中。紧接着，其中一个女青年又搓了一把面包撒了下去，顿时，碧澄澄的湖面，变得丑陋不堪，犹似一张破碎的面容。

我们看在眼里，痛在心里，几个人赶忙上去劝阻。男青年瞟了一眼，没好气的说：“你们是什么人，管什么闲事？” 那姑娘还自以为是慈悲为怀的“女菩萨”呢，振振有辞的说：“不喂，鱼怎么活？瞧，他们还对对我要尾巴，吐泡泡呢，它们实在是感谢我们呀！”瞧那毫无矫饰的神情，我着实的为她羞愧，暗想，这样一位雍容华贵的“文明**”怎么连“鱼靠吃浮游生物和微生物为生”这点常识也不懂。不过总算还好，他们停止了“布施”。

这时，不远处有一些人引起了我的注意。一看就知道，他们是几位港澳同胞和外国观光客。他们正挽起裤腿，从水里捞了一大堆垃圾上来。其中的一位外国朋友摇着头，用不太流利的汉语不解地问：“每个民族都把他们世代生息的土四比作‘母亲’他们在这举世无双的如画风景里，为什么如此这般糟蹋自己的母亲呢？”

他的语气不重，却象鞭子一样笞打在我的心上。我想，这外国人的声音，也会同样抽搭着每个中国人的自尊的心灵吧！难道祖国母亲的美丽，果真要外国人来保护吗？

千年井，不反唾

古时候，在我国江南某地有一个小官吏。一天，他接到一个出差的任务，是到当时的京城去送文件。他骑着一匹马匆匆上了路，傍晚，他歇宿在一个旅馆里。旅馆里有一口水井，井水冬暖夏凉，还有一丝淡淡的甘甜。小官吏喝着井水，感到旅途的辛劳减轻了不少。这口井为南来北往的人增添了许多美好的回忆。但这个小官吏是个自私自利的人，第二天早上他离开旅馆时，顺手便把马吃剩下的残草败根倒在了水井里。

过了一个月左右，小官吏从京城办完事回来，又来到这家旅馆。他赶到这里时，天已完全黑了，经过一天的长途奔波，小官吏感到又累又渴，他便从水井里打水上来喝。由于天黑看不清水桶里的水，小官吏又渴得够呛，喝起水来如同牛饮一样，结果喝进去一根草杆。草杆卡在小官吏的喉咙里，吞又吞不下，吐又吐不出，不一会儿，小官吏就一命呜呼了。而这草杆正是他前次来的时候，倒在水井里的。 古人为了吸取小官吏的教训，便告诫后人说：“千年井，不反唾。”这就是告诫人们不要弄脏水源的意思。

孩子和鱼的故事

有一天，大海退潮了，沙滩上躺满了"搁浅"的鱼，眼看就要干死了。这时有一个小男孩在岸边，把鱼一条条捡起来，然后扔回大海。一个成年人走过来，不屑的说："沙滩上有这么多鱼，就凭你，能救几条，有谁在乎呢？"小男孩捧着鱼，坚定地说："这条在乎！"……

谁给孩子带来了厄运

贝贝刚出生不到五个月，就跟许多其他孩子一样，可爱极了。你看他长着一头又密又软的黑头发，一双明亮 的眼睛常望着你笑，白里透红的小脸蛋上还不时地出现一个小酒窝，谁见了他都会马上喜欢上他。贝贝的爸爸妈妈更是把他当宝贝疙瘩一样，怕他冻着、怕他饿着、特别怕他哭，所以，贝贝生活得可幸福了！

贝贝长倒半周岁，不幸的事却发生了。他那娇嫩的脸蛋、胸背、腹部和手脚上，长出了一个个水疱，接着水疱越来越大，慢慢地又变成脓疱，并且开始溃烂，痛得小贝贝整天不停地哭闹。这可吓坏了他的爸爸和妈妈。他们连忙把贝贝送进医院治疗，这下，贝贝可再也笑不起来了，从夏天一直到秋天，贝贝几乎天天打针、吃药、涂药膏，这才算把病情控制住了

但是，医生告诉贝贝的爸爸妈妈：一定要注意保持孩子的皮肤的清洁。所以，贝贝的爸爸妈妈省吃俭用，专门为贝贝请了一位保姆，给他勤洗澡、勤换衣。谁知道第二年天气刚热，贝贝身上又长满了大脓疱。于是，只好又送医院。这次可真的把贝贝折磨得够呛。小贝贝痛得哭个不停，哭得嗓子都哑了。为了治疗贝贝的病，全家四处求医，找遍了所有的名医，都只能治一时，仍然无法把病根治掉。每年夏天和秋天都要复发，使贝贝小小年纪吃足了苦头，体质也明显下降。最后，贝贝的爸爸妈妈抱着一线希望，把贝贝送到省里最大的一家医院求医。医生们作了全面检查之后，询问起贝贝妈妈的工作史和生活习惯，最后诊断说，孩子的病是由内火引起的，光是治疗皮肤表面没什么用处，这个病根与母亲当年没有良好的生活习惯有关。原来贝贝的妈妈18岁就参加工作，先后当了13年的轮窑工。她每天在火热的烧砖窑炉边铲煤加炭，呼吸受污染的空气。她常常感到喉咙干燥得要冒火似的，疲乏无力，心烦意乱。开始的时候，她对高温作业和空气污染一点也不适应，但后来时间一长，也就慢慢地习以为常，并不放在心上了。想不到，这种环境污染在十多年后，竟然给自己的宝贝孩子带来了难以改变的不幸，而且这种不幸像影子一样尾随着他的一生。每当想到这一切，贝贝的妈妈就心如刀绞。

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纳米金即指金的微小颗粒，其直径在1～100nm，具有高电子密度、介电特性和催化作用，能与多种生物大分子结合，且不影响其生物活性。由氯金酸通过还原法可以方便地制备各种不同粒径的纳米金，其颜色依直径大小而呈红色至紫色。

以纳米金为免疫标记物的检测技术的发展

作为现代四大标记技术之一的纳米金标记技术(nanogold labelling techique)，实质上是蛋白质等高分子被吸附到纳米金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是纳米金颗粒表面负电荷，与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合，而且吸附后不会使生物分子变性，由于金颗粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中。由于球形的纳米金粒子对蛋白质有很强的吸附功能，可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白等非共价结合，因而在基础研究和实验中成为非常有用的工具。

1．1 作为显微镜示踪物

1978年，Geobegan等将纳米金标记抗体用于普通光镜下检测B淋巴细脑表面膜免疫球蛋白，建立了光镜水平的免疫金染色(immunogold staining，IGS)。1981年 Danscher用银显影方法增强金颗粒的可见度，并提高了灵敏度。Holgate等人于1983年建立了用银显影液光镜下金颗粒的可见性的免疫金银染色法(immunogold-siliver staining，IGSS)，利用银的增强作用，加大单独金粒子在光镜下可视粒子的半径，增加了小颗粒金粒子的标记密度，提高了灵敏度。1986年Fritz等人又在IGSS法基础上成功地进行了彩色IGSS法，使得结果更加鲜艳夺目。尽管如此，由于亚硝酸银化合物是光敏性的，需要在暗室里进行标记，实验操作非常的不便，改用非光敏的醋酸银化合物，价格又过于昂贵，所以纳米金在光镜中的应用日渐减少。而利用纳米金的高电子密度，能在电镜下清晰的分辨颗粒，作为在透射电镜(TEM)、扫描电镜(sEM)和荧光显微镜的示踪物在电镜免疫化学和组织化学中得到了广泛应用。

1．2 应用于均相溶胶颗粒免疫测定技术

均相溶胶颗粒免疫测定法(sol particle immunoassay， SPIA)是利用免疫学反应时金颗粒凝聚导致颜色减退的原理，将纳米金与抗体结合，建立微量凝集试验检测相应的抗原，如间接血凝一样，用肉眼可直接观察到凝集颗粒。已成功地应用于PCG的检测，直接应用分光光度计进行定量分析。

l3 应用于流式细胞仪

应用荧光素标记的抗体，通过流式细胞仪(Flow CytoMeter，FCM)计数分析细胞表面抗原，是免疫学研究中的重要技术之一。但由于不同荧光素的光谱相互重叠，区分不同的标记很困难。Boehmer等研究发现，纳米金可以明显改变红色激光的散射角，利用纳米金标记的羊抗鼠Ig抗体应用于流式细胞术，分析不同类型细胞的表面抗原，结果纳米金标记的细胞在波长632nm时，90度散射角可放大10倍以上，同时不影响细胞活性。而且与荧光素共同标记，彼此互不干扰。因此，纳米金可作为多参数细胞分析和分选的有效标记物，分析各类细胞表面标志和细胞内含物。

1．4 应用于斑点免疫金银染色技术

斑点免疫金银染色法(Dot-IGS，IGSS)是将斑点ELISA与免疫纳米金结合起来的一种方法。将蛋白质抗原直接点样在硝酸纤维膜上，与特异性抗体反应后，再滴加纳米金标记的第二抗体，结果在抗原抗体反应处发生金颗粒聚集，形成肉眼可见的红色斑点，此称为斑点免疫金染色法(Dot-IGS)。此反应可通过银显影液增强，即斑点金银染色法(Dot-IGS/IGSS)。

1．5 应用于免疫印迹技术

免疫印迹技术(immunoblotting，IBT)也称为免疫转印技术，其原理是根据各种抗原分子量大小不同，在电泳中行走的速度不同，因而在硝酸纤维素膜上占据的位置也不同；把含有特异性抗体的血清和这一薄膜反应，那么特异性的抗原抗体反应就显色。而纳米金免疫印迹技术相比酶标记免疫印迹技术具有简单、快速、具有相当高的灵敏度。而且应用纳米金将硝酸纤维素膜上未反应抗体进行染色，评估转膜效率，校正抗原一抗体反应的光密度曲线，即可进行定量免疫印迹测定。

1．6 应用于斑点金免疫渗滤测定技术

斑点金免疫渗滤测定法(dot immuno-gold filtration assay，DIGFA)是斑点免疫测定法(dot immunoboding assay，DIBA)中的一种，是1982年由Hawkes等人在免疫印迹技术基础上改良发展起来的一项免疫学新技术。其原理完全同斑点免疫金染色法，只是在硝酸纤维膜下垫有吸水性强的垫料，即为渗滤装置。在加抗原(抗体)后，迅速加抗体(抗原)，再加金标记第二抗体，由于有渗滤装置，反应很快，在数分钟内即可显出颜色反应。与斑点免疫渗滤测定法(d o t immunotietration assay，DIFA)相比，所不同的是免加底物液，直接由红色胶体金探针显色，结果鲜艳，背景更清楚，可以在室温下保存。该方法已成功地应用于人的免疫缺陷病病毒(HI)的检查和人血清中甲胎蛋白的检测。目前使用的有HCG试剂盒，AFP试剂盒，消化道肿瘤筛检试剂盒。

1．7 应用于免疫层析技术

免疫层析法(gold immunochromatography assay， GICA)是将各种反应试剂以条带状固定在同一试纸条上，待检标本加在试纸条的一端，将一种试剂溶解后，通过毛细作用在层析条上渗滤、移行并与膜上另一种试剂接触，样品中的待测物同层析材料上针对待测物的受体(如抗原或抗体)发生特异性免疫反应。层析过程中免疫复合物被截留、聚集在层析材料的一定区域(检测带)，通过可目测的纳米金标记物得到直观的显色结果。而游离标记物则越过检测带，达到与结合标记物自动分离之目的。GICA特点是单一试剂，一步操作，全部试剂可在室温长期保存。这种新的方法将纳米金免疫检测试验推进到～个崭新的阶段。

1．8 生物传感器

生物传感器(biosensor)是指能感应(或响应)生物、化学量，并按一定规律将其转换成可用信号(包括电信号、光信号等)输出的器件或装置。在生物传感器方面，纳米金主要设计为免疫传感器，是利用生物体内抗原与抗体专一性结合而导致电化学变化设计而成。另外由于纳米金的氧化还原电位是+1．68V，具有极强的夺电子能力，能大大提高作为测定血糖的生物传感器葡萄糖氧化酶膜的活性，金颗粒越细，活性越大。

1．9 生物芯片

生物芯片是以膜、玻璃、硅等固相介质为载体，其最大的优点在于高通量、并行化、微型化。一次实验可同时检测多种或多份生物样品。生物芯片包括基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片。目前，生物芯片用于食品安全检测领域的应用主要包括农药、兽药残留检测，食品微生物检测、动物疫病监测、转基因动物植物检测等。2002年Park等在《Science》杂志上介绍了一种以纳米金为探针的基于电荷检测的新型基因芯片，该芯片具有非常好的灵敏度及特异性，可以在十万分之一比率中检测出单碱基突变的基因片段。

纳米金技术在食品安全快速检测中的应用

目前食品检测分析一般采用化学分析法(CA)、薄层层析法(TLC)、气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)，但需要繁琐、耗时的前处理，样品损失也较大。相对于灵敏度较低的CA和TLC方法，GC、HPLC的灵敏度较高，但操作技术要求高、仪器昂贵，并不适合现场快速测定和普及，而以纳米金为免疫标记物的检测技术正弥补了这些技术的缺点，在现代食品分析检测中的运用也越来越多。

2．1 兽药残留

所谓兽药残留是指动物产品的任何可食部分所含兽药的母体化合物及，或其代谢物，以及与兽药有关的杂质的残留。兽药残留既包括原药也包括药物在动物体内的代谢产物。主要的残留兽药有抗生素类、磺胺药类、呋喃药类、抗球虫药、激素药类和驱虫药类。兽药通常是通过在预防和治疗动物疾病用药、在饲料添加剂中使用以及在食品保鲜中引入药物而带来对食品的污染。人长期摄入含兽药的动物性食品后，不但会对人体产生毒性作用，出现过敏反应，而且动物体内的耐药菌株可传播给人体，当人体发生疾病时，就给临床上感染性疾病的治疗带来一定的困难，延误正常的治疗。另外有些残留物还具有致畸、致癌、致突变作用。

Verheijen利用胶体金标记纯化的抗链霉素单克隆抗体，对链霉素的检测限为160ng/ml，检测方便快速，不需要其他试剂和仪器，时间仅需lOmintl41。而使用胶体金免疫层析试纸条，在检测虾肉等组织试样中残留氯霉素(chloramphenicol，CAP)残留时，灵敏度可达到 lng/ml，只需5～10min，并且与类似物没有交叉反应。Yong Jin等也使用金标法来检测动物血浆和牛奶中的新霉素残留，其检测限为10ng/mltl6J。盐酸克伦特罗即β2受体兴奋剂，俗称“瘦肉精”能增强脂解和减慢蛋白质分解代谢，若在畜牧生产中使用，可明显提高饲料转化率和瘦肉率；但使用剂量过大，则会对动物和人(间接)的肝脏、肾脏等器官产生严重的毒副作用。尽管欧盟于1996年禁止在畜牧生产中使用该药(EC Direc． tive 96/22/EC)，我国农业部也于1997年明令禁止，但国内“瘦肉精”中毒事件时有发生。刘见使用金标试纸法快速检测检测盐酸克伦特罗，最小检测量达到40ng/ml。现在商品化的试纸条产品现在也比较成熟，比利时UCB Bio-products公司开发的Tlhe Beta STAR检测法就是将特定的β-内酰胺受体固定在试纸条上，用胶体金有色微粒作为标记物，5min内可以检测到青霉素和头孢霉素残留。而国内的刘平在用生物电化学传感器检测牛奶中残留的青霉素时，认为使用纳米金将有助于提高传感器的检测限。

22 动物传染病

动物传染病不但会影响动物养殖经济，也对人类健康构成威胁，联合国粮农组织和世界卫生组织已把预防和控制严重的动物流行病作为其工作重点之一。虾白斑病毒(white spot syndrome virus，WSSV)是阻碍虾养殖业发展的主要因素，至今还没有有效的药物，所以及早检测出病毒，显得尤其重要。Wang Xiaojie等已成功研究了斑点免疫金渗滤法(DIGFA)t19~和金标试纸法来检测虾白斑病毒，其中金标试纸法的检测限为1 μg/ml，而使用银增强，可以达到0．0lμg/ml。赖清金等使用金标试纸条来检测猪瘟病毒，10～15min就能检出结果，并可根据检测结果合理指导猪瘟免疫和建立适宜的免疫程序。禽流感病毒(AIV)是引起禽类急性死亡的烈性、病毒性传染病，而且能感染人，我国许多地区也先后报道有高致病性禽流感的发生，给养禽业造成了重大的经济损失，也严重威胁了人类的健康。刘永德等将兔抗禽流感H5、H9亚型病毒抗体纯化后，分别与制备的胶体金研制成免疫金探针，用改良的渗滤法安全快速地检测被检材料中禽流感H5、H9亚型病毒，3min即可得到结果，检测灵敏度分别为1．62ug/ml和1．25μg/ml。

23 农药残留

农药残留分析的困难包括：样品基质背景复杂、前处理过程繁琐，需要耗费较多的时间、被测成分浓度较低、分析仪器的定性能力受到限制、仪器检测灵敏度不够等一系列问题，但使用金标记的快速检测可以很好的解决以上问题。国内的王朔分别使用纳米金免疫层析和纳米金渗滤法检测西维因的残留，整个检测过程只需5min，检测限也分别达到100ug/L和50μg/L。国内的生物技术公司也开发出了成熟的商品化产品，如克百威农残速测试纸条等。

2．4 致病微生物检测

目前基于金标记的快速检测研究在致病微生物方面比较多，检测的种类也比较多。最早Hasan以免疫磁性分离技术为基础的免疫胶体金技术已成功应用于01群霍乱弧菌(Vibriocholerae)的检测。国内洪帮兴等人研究了以硝酸纤维膜为载体纳米金显色的寡核苷酸芯片技术，为在分子水平快速简便的鉴别致病菌提供了可能，甚至可以检出致病菌的耐药性变异。该芯片技术对大肠埃希氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌、变形杆菌、单核细胞增生李斯特菌、蜡样芽孢杆菌、肉毒梭菌和空肠弯曲菌等10种(属)具有高灵敏度和特异性，检出水平可达10CFU/mlt251。殷涌光等在使用集成化手持式Spreeta TM SPR传感器快速检测大肠杆菌时，引入胶体金复合抗体作为二次抗体大幅度增加质量，进一步扩大了检测信号，同时延长胶体金复合抗体与微生物的结合过程，使检测信号进一步稳定与放大，从而显著提高了检测精度，使该传感器对大肠杆菌的检测精度由10 6 CFU/ml提高到10 1CFU/ml。金免疫渗滤法重要的食源性致病菌之一大肠埃希氏菌0157：H7，目前的检测通常先以山梨醇麦康凯琼脂(sMAC)进行初筛，然后用生化和血清学试验做鉴定，一般需要24～48h，而采用胶体金免疫渗滤法检测却非常的简便，在很短时间即可得到结果。

在致病菌快速检测中金标试纸条的研究越来越广泛。谢昭聪等应用胶体金免疫层析法检测水产品中霍乱弧菌的研究中，增菌液霍乱弧菌含量为1CFU/ml，通过增菌12h后，即可应用胶体金免疫层析法诊断试剂检出，而一般水产品霍乱弧菌检测所采用的传统常规方法，检测时限长，增菌培养需8～16h，分离培养需14～20h，初步报告需30h以上，实际操作中，需要3d以上才能出报告。肠杆菌科的大属沙门氏菌可引起人的沙门氏菌性食物中毒，王中民等人采用免疫渗滤法可检出85%的引起食物中毒的沙门氏菌，灵敏度为2．4×107CFU/ml，对最常见的鼠伤寒、猪霍乱和肠炎沙门氏菌，检出率达100%，而采用胶体金免疫层析法的灵敏度为2．1×106CFU/mlt30j。被美国列为七种主要食源性致死病菌之一的李斯特菌，如果按照传统的分离培养和鉴定技术需要l～2周时间，而采用免疫胶体金层析法只需10min就能得到检测结果，灵敏度达到87．5%。

2．5 真菌毒素的检测

真菌毒素(Mycotoxin)是由真菌(Fungi)产生的具有毒性的二级代谢产物，广泛存在食品和饲料中，人类若误食受污染的食品，就会中毒或诱发一定疾病，甚至癌症。检测食品中的真菌毒素常用理化方法或生物学方法。但理化法需要较昂贵的仪器设备，操作复杂。而运用免疫技术检测真菌毒素敏感性高，特异性强，非常适用于食物样品的检测。D．J．Chiao等使用金标免疫层析法在10min之内即可检测50ng/ml的肉毒杆菌毒素B(BoNT/B)，如果使用银增强则其检测限可以达到50pg/ml，而且对A、E型肉毒杆菌毒素没有交叉反应。貉曲霉毒素是曲霉属和青霉属产生的一类真菌毒素，其中毒性最大、与人类健康关系最密切、对农作物的污染最重、分布最广的是赭曲霉素A(OTA)，赖卫华等研制的赭曲霉毒素A快速检测胶体金试纸条，检测限达到了10ng/mlt331，远远低于目前我国对赭曲霉毒素的限量要求5μg/L。黄曲霉毒素B z的快速检测国内也有很多研究，孙秀兰研制的黄曲霉毒素B，金标免疫试纸条，其最低检测限达到2．5ng/ml，而且能定性或半定量检测食品中的黄曲霉毒素B，含量。

小 结

随着科学技术的不断发展，食品分析检测技术也在不断地更新、完善和迅速发展，尤其是快速检测技术更能适应现代高效、快速的节奏和满足社会的要求。仪器分析法可以保证数据的精确性和准确性，但其流程仍比较烦琐。尽管以纳米金为标记物的免疫分析法及其它速测技术的开发过程需投入较多资金和较长时间，但具有简单、快速、灵敏度高、特异性强、价廉、样品所需量少等优点，其灵敏度与常规的仪器分析一致，适合现场筛选，而且其中的金免疫层析技术正在向定量、半定量检测和多元检测的方向发展，更加体现出金标技术的优势。总之，快速检测技术的快速、灵敏、简便等优点，使之在食品卫生检疫和环境检测中有着广泛的应用价值和发展前景。

应用领域

食品、玻璃、生物体的著色剂。

用于遗传基因的鉴定技术。

用于环境净化产品的提炼。

用于食品、化妆品的防腐剂。

加入到化妆品中起到美白、抗衰老、润肤的作用。

生产抗菌、抑菌、消炎类药品，医疗器械，保健用品，美容护理器械。

生产与人们生活息息相关的各类生活日用品、食品、饮品等。如纳米金香皂，牙刷，各种美容面膜。

       正如许多文章中所说的那样，人总是喜欢追求新鲜事物，也正如每年的年计划，为什么完成的程度总是不如人意，可能自己要想清楚一点，如果你的能力还达不到能够纵览未来的高度时，思考的想法维度都会随着时间的推移，而不断改变。

        因此在新的一年，这次尝试一个新的完成全年计划的Idea，这也是受到大发发的启迪，当下先写上自己想完成的20个小目标，然后，设有一个收集箱，待隔一段时间后，确定这也是自己的小目标之一，则放入2018年计划之小目标里面，每15天完善一次，无论是增加删除，如果是删除要写上为什么删除的理由。而完成的项目用“✔”标记，这也是让自己享受完成时的短暂快感，也是给予自己在每走的一小段路中的加油剂。

  1• 学历  ▎完成2018年1月自考理财学考试

  2• 学历  ▎参加2018年北师大教育入学考试。

  3• 提升  ▎每读完一本书后三天完成读书笔记。

  4• 日语  ▎每天听喜马拉雅《新标准日本语 中级》并背诵文章。

  5• 日语  ▎每周翻译一篇天声人语。

  6• 提升  ▎观看每期NationalGeo

  7• 提升  ▎一天学习一点拍照技巧。

  1 • 关注自身成长，不与别人作比较，专注自己喜欢的事。

  2 • 制定2018年的趁早手账使用的方法坚持到年底。

  3 • 发现自己城市美食餐厅20家并写美食文章。

  4 • 出国旅游&国内旅游各一次。

  5 • 认识更多有趣的人。

  6 • 维持人际关系，每月和朋友聚餐。

  7 • 养成11点半前睡觉、不刷手机kindle的习惯。

  1 • 一周舞蹈训练3次、瑜伽训练1次。

  2 • 减少甜份的摄入。

  3 • 一周做3次面膜、2次yaman。

  4 • 记录养生打卡。

  1 • 每月至少存30%工资。

  2 • 研究购买重疾险。

  3 • 到澳门打HPV疫苗。

  4 • 控制购物欲，追求少而精，将现有衣柜盘点成清单，有计划性购买。

  5 • 研究投资理财。

  1 • 培养书写公文的能力。

  2 • 学习如何更好与人沟通。

  3 • 升职加薪或换工作。

  4 • 学会五笔打字。

写于20171231

纳米金

金的微小颗粒

纳米金即指金的微小颗粒，其直径在1～100nm，具有高电子密度、介电特性和催化作用，能与多种生物大分子结合，且不影响其生物活性。由氯金酸通过还原法可以方便地制备各种不同粒径的纳米金，其颜色依直径大小而呈红色至紫色。

中文名

纳米金

外文名

AuNPs

直径

1～100nm，

类别

金的微小颗粒

作用

高电子密度、介电特性和催化

发展历史检测技术发展检测应用优点制备方法TA说

发展历史

自从16世纪欧洲现代化学的奠基人、杰出的医师、化学家Paracelsus制备出“饮用金”用来治疗精神类疾病以来，纳米金就开始登上了科学的舞台。1857年英国科学家法拉第在研究道尔顿的理论时，利用氯化金还原出含纳米金的溶液，发现在其中加入少量电解质后，可使溶液由红宝石色变为蓝色，并最终凝集为无色，而加入明胶等大分子物质便可阻止这种变化。尽管当时并不知道原因，但他的发现为纳米金的应用奠定了科学基础。1885年纳米金溶液在美国常作为治疗酗酒的主要成分；1890年Koch医生发现结核杆菌不能够在金的表面存活；1890年纳米金被用来治疗关节炎；1935年芝加哥外科专家Edward等人发现纳米金溶液能有效的减轻患者病痛，强健体质。1939年Kausche和Ruska用电子显微镜观察金颗粒标记的烟草花叶病毒，呈高电子密度细颗粒状。1971年Faulk和Taylor首次采用免疫金染色(immunogold staining，IGS)将兔抗沙门氏菌抗血清与纳米金颗粒结合，用直接免疫细胞化学技术检测沙门氏菌的表面抗原，开创了纳米金免疫标记技术。

检测技术发展

作为现代四大标记技术之一的纳米金标记技术(nanogold labelling techique)，实质上是蛋白质等高分子被吸附到纳米金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是纳米金颗粒表面负电荷，与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合，而且吸附后不会使生物分子变性，由于金颗粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中。由于球形的纳米金粒子对蛋白质有很强的吸附功能，可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白等非共价结合，因而在基础研究和实验中成为非常有用的工具。

纳米金溶胶

作为显微镜示踪物

1978年，Geobegan等将纳米金标记抗体用于普通光镜下检测B淋巴细脑表面膜免疫球蛋白，建立了光镜水平的免疫金染色(immunogold staining，IGS)。1981年 Danscher用银显影方法增强金颗粒的可见度，并提高了灵敏度。Holgate等人于1983年建立了用银显影液光镜下金颗粒的可见性的免疫金银染色法(immunogold-siliver staining，IGSS)，利用银的增强作用，加大单独金粒子在光镜下可视粒子的半径，增加了小颗粒金粒子的标记密度，提高了灵敏度。1986年Fritz等人又在IGSS法基础上成功地进行了彩色IGSS法，使得结果更加鲜艳夺目。尽管如此，由于亚硝酸银化合物是光敏性的，需要在暗室里进行标记，实验操作非常的不便，改用非光敏的醋酸银化合物，价格又过于昂贵，所以纳米金在光镜中的应用日渐减少。而利用纳米金的高电子密度，能在电镜下清晰的分辨颗粒，作为在透射电镜(TEM)、扫描电镜(sEM)和荧光显微镜的示踪物在电镜免疫化学和组织化学中得到了广泛应用。

应用于均相溶胶颗粒免疫测定技术

均相溶胶颗粒免疫测定法(sol particle immunoassay， SPIA)是利用免疫学反应时金颗粒凝聚导致颜色减退的原理，将纳米金与抗体结合，建立微量凝集试验检测相应的抗原，如间接血凝一样，用肉眼可直接观察到凝集颗粒。已成功地应用于PCG的检测，直接应用分光光度计进行定量分析。

应用于流式细胞仪

应用荧光素标记的抗体，通过流式细胞仪(Flow CytoMeter，FCM)计数分析细胞表面抗原，是免疫学研究中的重要技术之一。但由于不同荧光素的光谱相互重叠，区分不同的标记很困难。Boehmer等研究发现，纳米金可以明显改变红色激光的散射角，利用纳米金标记的羊抗鼠Ig抗体应用于流式细胞术，分析不同类型细胞的表面抗原，结果纳米金标记的细胞在波长632nm时，90度散射角可放大10倍以上，同时不影响细胞活性。而且与荧光素共同标记，彼此互不干扰。因此，纳米金可作为多参数细胞分析和分选的有效标记物，分析各类细胞表面标志和细胞内含物。

应用于斑点免疫金银染色技术

斑点免疫金银染色法(Dot-IGS，IGSS)是将斑点ELISA与免疫纳米金结合起来的一种方法。将蛋白质抗原直接点样在硝酸纤维膜上，与特异性抗体反应后，再滴加纳米金标记的第二抗体，结果在抗原抗体反应处发生金颗粒聚集，形成肉眼可见的红色斑点，此称为斑点免疫金染色法(Dot-IGS)。此反应可通过银显影液增强，即斑点金银染色法(Dot-IGS/IGSS)。

应用于免疫印迹技术

免疫印迹技术(immunoblotting，IBT)也称为免疫转印技术，其原理是根据各种抗原分子量大小不同，在电泳中行走的速度不同，因而在硝酸纤维素膜上占据的位置也不同；把含有特异性抗体的血清和这一薄膜反应，那么特异性的抗原抗体反应就显色。而纳米金免疫印迹技术相比酶标记免疫印迹技术具有简单、快速、具有相当高的灵敏度。而且应用纳米金将硝酸纤维素膜上未反应抗体进行染色，评估转膜效率，校正抗原一抗体反应的光密度曲线，即可进行定量免疫印迹测定。

应用于斑点金免疫渗滤测定技术

斑点金免疫渗滤测定法(dot immuno-gold filtration assay，DIGFA)是斑点免疫测定法(dot immunoboding assay，DIBA)中的一种，是1982年由Hawkes等人在免疫印迹技术基础上改良发展起来的一项免疫学新技术。其原理完全同斑点免疫金染色法，只是在硝酸纤维膜下垫有吸水性强的垫料，即为渗滤装置。在加抗原(抗体)后，迅速加抗体(抗原)，再加金标记第二抗体，由于有渗滤装置，反应很快，在数分钟内即可显出颜色反应。与斑点免疫渗滤测定法(d o t immunotietration assay，DIFA)相比，所不同的是免加底物液，直接由红色胶体金探针显色，结果鲜艳，背景更清楚，可以在室温下保存。该方法已成功地应用于人的免疫缺陷病病毒(HI)的检查和人血清中甲胎蛋白的检测。使用的有HCG试剂盒，AFP试剂盒，消化道肿瘤筛检试剂盒。

应用于免疫层析技术

免疫层析法(gold immunochromatography assay， GICA)是将各种反应试剂以条带状固定在同一试纸条上，待检标本加在试纸条的一端，将一种试剂溶解后，通过毛细作用在层析条上渗滤、移行并与膜上另一种试剂接触，样品中的待测物同层析材料上针对待测物的受体(如抗原或抗体)发生特异性免疫反应。层析过程中免疫复合物被截留、聚集在层析材料的一定区域(检测带)，通过可目测的纳米金标记物得到直观的显色结果。而游离标记物则越过检测带，达到与结合标记物自动分离之目的。GICA特点是单一试剂，一步操作，全部试剂可在室温长期保存。这种新的方法将纳米金免疫检测试验推进到～个崭新的阶段。

生物传感器

生物传感器(biosensor)是指能感应(或响应)生物、化学量，并按一定规律将其转换成可用信号(包括电信号、光信号等)输出的器件或装置。在生物传感器方面，纳米金主要设计为免疫传感器，是利用生物体内抗原与抗体专一性结合而导致电化学变化设计而成。另外由于纳米金的氧化还原电位是+168V，具有极强的夺电子能力，能大大提高作为测定血糖的生物传感器葡萄糖氧化酶膜的活性，金颗粒越细，活性越大。

生物芯片

生物芯片是以膜、玻璃、硅等固相介质为载体，其最大的优点在于高通量、并行化、微型化。一次实验可同时检测多种或多份生物样品。生物芯片包括基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片。生物芯片用于食品安全检测领域的应用主要包括农药、兽药残留检测，食品微生物检测、动物疫病监测、转基因动物植物检测等。2002年Park等在《Science》杂志上介绍了一种以纳米金为探针的基于电荷检测的新型基因芯片，该芯片具有非常好的灵敏度及特异性，可以在十万分之一比率中检测出单碱基突变的基因片段。

检测应用

食品检测分析一般采用化学分析法(CA)、薄层层析法(TLC)、气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)，但需要繁琐、耗时的前处理，样品损失也较大。相对于灵敏度较低的CA和TLC方法，GC、HPLC的灵敏度较高，但操作技术要求高、仪器昂贵，并不适合现场快速测定和普及，而以纳米金为免疫标记物的检测技术正弥补了这些技术的缺点，在现代食品分析检测中的运用也越来越多。

兽药残留

所谓兽药残留是指动物产品的任何可食部分所含兽药的母体化合物及，或其代谢物，以及与兽药有关的杂质的残留。兽药残留既包括原药也包括药物在动物体内的代谢产物。主要的残留兽药有抗生素类、磺胺药类、呋喃药类、抗球虫药、激素药类和驱虫药类。兽药通常是通过在预防和治疗动物疾病用药、在饲料添加剂中使用以及在食品保鲜中引入药物而带来对食品的污染。人长期摄入含兽药的动物性食品后，不但会对人体产生毒性作用，出现过敏反应，而且动物体内的耐药菌株可传播给人体，当人体发生疾病时，就给临床上感染性疾病的治疗带来一定的困难，延误正常的治疗。另外有些残留物还具有致畸、致癌、致突变作用。

Verheijen利用胶体金标记纯化的抗链霉素单克隆抗体，对链霉素的检测限为160ng/ml，检测方便快速，不需要其他试剂和仪器，时间仅需lOmintl41。而使用胶体金免疫层析试纸条，在检测虾肉等组织试样中残留氯霉素(chloramphenicol，CAP)残留时，灵敏度可达到 lng/ml，只需5～10min，并且与类似物没有交叉反应。Yong Jin等也使用金标法来检测动物血浆和牛奶中的新霉素残留，其检测限为10ng/mltl6J。盐酸克伦特罗即β2受体兴奋剂，俗称“瘦肉精”能增强脂解和减慢蛋白质分解代谢，若在畜牧生产中使用，可明显提高饲料转化率和瘦肉率；但使用剂量过大，则会对动物和人(间接)的肝脏、肾脏等器官产生严重的毒副作用。尽管欧盟于1996年禁止在畜牧生产中使用该药(EC Direc． tive 96/22/EC)，我国农业部也于1997年明令禁止，但国内“瘦肉精”中毒事件时有发生。刘见使用金标试纸法快速检测检测盐酸克伦特罗，最小检测量达到40ng/ml。商品化的试纸条产品也比较成熟，比利时UCB Bio-products公司开发的Tlhe Beta STAR检测法就是将特定的β-内酰胺受体固定在试纸条上，用胶体金有色微粒作为标记物，5min内可以检测到青霉素和头孢霉素残留。而国内的刘平在用生物电化学传感器检测牛奶中残留的青霉素时，认为使用纳米金将有助于提高传感器的检测限。

动物传染病

动物传染病不但会影响动物养殖经济，也对人类健康构成威胁，联合国粮农组织和世界卫生组织已把预防和控制严重的动物流行病作为其工作重点之一。虾白斑病毒(white spot syndrome virus，WSSV)是阻碍虾养殖业发展的主要因素，至今还没有有效的药物，所以及早检测出病毒，显得尤其重要。Wang Xiaojie等已成功研究了斑点免疫金渗滤法(DIGFA)t19~和金标试纸法来检测虾白斑病毒，其中金标试纸法的检测限为1 μg/ml，而使用银增强，可以达到001μg/ml。赖清金等使用金标试纸条来检测猪瘟病毒，10～15min就能检出结果，并可根据检测结果合理指导猪瘟免疫和建立适宜的免疫程序。禽流感病毒(AIV)是引起禽类急性死亡的烈性、病毒性传染病，而且能感染人，我国许多地区也先后报道有高致病性禽流感的发生，给养禽业造成了重大的经济损失，也严重威胁了人类的健康。刘永德等将兔抗禽流感H5、H9亚型病毒抗体纯化后，分别与制备的胶体金研制成免疫金探针，用改良的渗滤法安全快速地检测被检材料中禽流感H5、H9亚型病毒，3min即可得到结果，检测灵敏度分别为162ug/ml和125μg/ml。

农药残留

农药残留分析的困难包括：样品基质背景复杂、前处理过程繁琐，需要耗费较多的时间、被测成分浓度较低、分析仪器的定性能力受到限制、仪器检测灵敏度不够等一系列问题，但使用金标记的快速检测可以很好的解决以上问题。国内的王朔分别使用纳米金免疫层析和纳米金渗滤法检测西维因的残留，整个检测过程只需5min，检测限也分别达到100ug/L和50μg/L。国内的生物技术公司也开发出了成熟的商品化产品，如克百威农残速测试纸条等。

致病微生物检测

基于金标记的快速检测研究在致病微生物方面比较多，检测的种类也比较多。最早Hasan以免疫磁性分离技术为基础的免疫胶体金技术已成功应用于01群霍乱弧菌(Vibriocholerae)的检测。国内洪帮兴等人研究了以硝酸纤维膜为载体纳米金显色的寡核苷酸芯片技术，为在分子水平快速简便的鉴别致病菌提供了可能，甚至可以检出致病菌的耐药性变异。该芯片技术对大肠埃希氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌、变形杆菌、单核细胞增生李斯特菌、蜡样芽孢杆菌、肉毒梭菌和空肠弯曲菌等10种(属)具有高灵敏度和特异性，检出水平可达10CFU/mlt251。殷涌光等在使用集成化手持式Spreeta TM SPR传感器快速检测大肠杆菌时，引入胶体金复合抗体作为二次抗体大幅度增加质量，进一步扩大了检测信号，同时延长胶体金复合抗体与微生物的结合过程，使检测信号进一步稳定与放大，从而显著提高了检测精度，使该传感器对大肠杆菌的检测精度由106 CFU/ml提高到101CFU/ml。金免疫渗滤法重要的食源性致病菌之一大肠埃希氏菌0157：H7，检测通常先以山梨醇麦康凯琼脂(sMAC)进行初筛，然后用生化和血清学试验做鉴定，一般需要24～48h，而采用胶体金免疫渗滤法检测却非常的简便，在很短时间即可得到结果。

在致病菌快速检测中金标试纸条的研究越来越广泛。谢昭聪等应用胶体金免疫层析法检测水产品中霍乱弧菌的研究中，增菌液霍乱弧菌含量为1CFU/ml，通过增菌12h后，即可应用胶体金免疫层析法诊断试剂检出，而一般水产品霍乱弧菌检测所采用的传统常规方法，检测时限长，增菌培养需8～16h，分离培养需14～20h，初步报告需30h以上，实际操作中，需要3d以上才能出报告。肠杆菌科的大属沙门氏菌可引起人的沙门氏菌性食物中毒，王中民等人采用免疫渗滤法可检出85%的引起食物中毒的沙门氏菌，灵敏度为24×107CFU/ml，对最常见的鼠伤寒、猪霍乱和肠炎沙门氏菌，检出率达100%，而采用胶体金免疫层析法的灵敏度为21×106CFU/mlt30j。被美国列为七种主要食源性致死病菌之一的李斯特菌，如果按照传统的分离培养和鉴定技术需要l～2周时间，而采用免疫胶体金层析法只需10min就能得到检测结果，灵敏度达到875%。

真菌毒素的检测

真菌毒素(Mycotoxin)是由真菌(Fungi)产生的具有毒性的二级代谢产物，广泛存在食品和饲料中，人类若误食受污染的食品，就会中毒或诱发一定疾病，甚至癌症。检测食品中的真菌毒素常用理化方法或生物学方法。但理化法需要较昂贵的仪器设备，操作复杂。而运用免疫技术检测真菌毒素敏感性高，特异性强，非常适用于食物样品的检测。D．J．Chiao等使用金标免疫层析法在10min之内即可检测50ng/ml的肉毒杆菌毒素B(BoNT/B)，如果使用银增强则其检测限可以达到50pg/ml，而且对A、E型肉毒杆菌毒素没有交叉反应。貉曲霉毒素是曲霉属和青霉属产生的一类真菌毒素，其中毒性最大、与人类健康关系最密切、对农作物的污染最重、分布最广的是赭曲霉素A(OTA)，赖卫华等研制的赭曲霉毒素A快速检测胶体金试纸条，检测限达到了10ng/mlt331，远远低于我国对赭曲霉毒素的限量要求5μg/L。黄曲霉毒素B z的快速检测国内也有很多研究，孙秀兰研制的黄曲霉毒素B，金标免疫试纸条，其最低检测限达到2．5ng/ml，而且能定性或半定量检测食品中的黄曲霉毒素B，含量。

优点

随着科学技术的不断发展，食品分析检测技术也在不断地更新、完善和迅速发展，尤其是快速检测技术更能适应现代高效、快速的节奏和满足社会的要求。仪器分析法可以保证数据的精确性和准确性，但其流程仍比较烦琐。尽管以纳米金为标记物的免疫分析法及其它速测技术的开发过程需投入较多资金和较长时间，但具有简单、快速、灵敏度高、特异性强、价廉、样品所需量少等优点，其灵敏度与常规的仪器分析一致，适合现场筛选，而且其中的金免疫层析技术正在向定量、半定量检测和多元检测的方向发展，更加体现出金标技术的优势。总之，快速检测技术的快速、灵敏、简便等优点，使之在食品卫生检疫和环境检测中有着广泛的应用价值和发展前景。

制备方法

配制浓度为244×10-3 mol/L 的HAuCl4·4H2O溶液、浓度为343×10-2 mol/L 的Na3C6H5O7·2H2O 溶液、浓度为100×10-4 mol/L 的 PVP 溶液, 以及浓度为0391 mol/L 的NaBH4 溶液备用。在烧杯中加入10 mL 氯金酸溶液, 10 mL 或不加保护剂溶液, 80 mL 三蒸水, 将烧杯置于数显测速恒温磁力搅拌器上, 边加热边搅拌, 搅拌的转速设置为600 r/min, 加热至75℃, 恒温2 min, 用移液管移取一定体积的还原剂(Na3C6H5O7 或NaBH4)溶液,迅速一次加入到上述混合液, 开始计时, 使液体颜色恒定并持续加热一段时间共9 min, 停止加热, 继续搅拌5 min 后, 停止搅拌, 冷却至室温, 所得液体为纳米金溶胶。