UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测尿中红细胞形态的结果探讨

UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测尿中红细胞形态的结果探讨

　摘要目的：对UF-lO00i全自动尿沉渣分析仪与显微镜检查尿中肾性血尿的结果进行评价。方法：住院病人新鲜的尿夜标本，用UF-1000i测定，对其中报告为肾性血尿阳性的标本425例以离心法对沉渣进行显微镜检查。结果：UF-1000i系统对血尿来源的检测与显微镜检查的结果有较高的相关一致性。结论：UF-1000i全自动尿沉渣分析仪对红细胞形态有很好的识别力，能为临床诊疗提供有价值的依据。

　关键词UF-1000i尿沉渣分析仪；红细胞形态；肾性血尿

　UF-1000i检测原理是采用红色半导体激光的流式细胞分析方法，对尿中有形成分（红细胞、白细胞、上皮细胞、透明管型、细菌、结晶、酵母样真菌、小圆上皮细胞、病理性管型、粘液丝、精子、电导率）进行定量分析，提供定量参数。在红细胞检测方面，除了对红细胞的识别和计数外，还提供了许多红细胞的信息（RBC-Info）参数，即RBC-70FCSC(70%红细胞前向散射光),RBC-FCS-DW(红细胞前向散射光分布宽度),Large-RBC（大红细胞），Small-RBC(小红细胞)等，从而使仪器鉴别血尿的来源成为可能。本试验通过镜检UF-1000i提示肾性血尿的标本，以镜检为标准，计算UF-1000i符合率。

　1材料和方法

　1．1仪器和试剂:uF-1000i及配套试剂、质控品均由日本sysmex公司提供。0Iympus生物显微镜，低速离心机(北京医用仪器厂)。

　1．2材料:一次性专用清洁容器留取2009年12月至2011年2月间在我院肾内科住院的病人新鲜尿液标本，尿量15-20ml，用于UF-1000i尿沉渣计数分析和显微镜检查。

　1．3方法

　13．1UF-1000i分析仪测定：严格按仪器说明书进行操作，测定过程中对仪器进行室内质控监测。

　132离心法：对仪器报告为肾性血尿阳性的标本425例，按《全国临床检验操作规程》的要求[1]，取充分混匀尿液10ml于有凸头专用塑料离心管中，以相对离心力(RCF)400g离心沉淀5分钟；取出，倾去上层尿液9．8ml，留下尿沉渣0．2ml，充分混匀，倾倒在洁净载玻片上进行显微镜检查。

　2结果

　UF-1000i分析仪测定：以≥80%的尿RBC-70FCSC(70%红细胞前向散射光)≤126ch（ch是仪器检测到的脉冲信号的强度和宽度单位符号）,＜80%的尿RBC-70FCSC(70%红细胞前向散射光)≥84ch为仪器法检测肾性血尿组；显微镜下：红细胞畸形率≥75%为显微镜检测肾性血尿组。UF-1000i全自动尿沉渣分析仪与显微镜检查结果见表1。

　3讨论

　尿液红细胞是病理性尿液中的有形成分，对泌尿系统疾病的诊疗有重要意义[4]。日本东亚医用电子公司Sysmex生产的UF-1000i型全自动尿沉渣检测仪，是最新的尿沉渣分析产品，采用红色半导体激光的流式细胞测量技术，具有红细胞、白细胞等有形成分检测通道和尿中细菌检测专用通道。上对尿中的红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌、结晶体、精子及酵母菌等细胞成分进行核酸荧光染色并迅速检测，并可对红细胞作形态分类(分为均一型、非均一型及混合型三种)，有助于判别血尿出血部位[2]。

　uF一1000i自动化程度高，快速准确，操作简便，用于成形成分快速筛选，进行标本常规定量是适合临床应用的。由于采用了该仪器，作者所在单位的临床检验科室的工作效率得到很大提高，劳动强度大幅降低。作者的复查结果也说明，分析仪报告为肾性血尿阳性的标本以离心法对尿沉渣进行显微镜复查时的结果，有较好的重复性（见表1，符合率达96%）。因为仪器检测提示为非肾性血尿及混合性血尿的标本在我院并不多见，本文作者无法在此对其作出比较，有待积累数据。

　总之，作者认为，在大工作量环境下，uF-1000i尿沉渣分析仪能保证检验速度和检测质量，为临床诊断提供可靠依据，是较理想的全自动尿沉渣分析仪，真正做到了标准化、自动化，提高了尿沉渣检验的质量。

　参考文献

　[1]叶应妩,王毓三全国临床检验操作规程[M]南京:东南大学出版社,1977,134～135

　[2]丛玉隆尿液细胞成分定量分析方法学研究中华检验医学杂志,2006;29(2):11～14

　[3]张云虎尿液沉渣实录彩色图谱[M]济南:山东科学出版社,2003,43;222

　[4]曹研,陈玲等尿液整体化分析与尿沉渣图谱[M]昆明:云南民族出版社,2006,51～57

　[5]李徽,黄旭东UF-100尿沉渣分析仪检测病理性管型的探讨[J]汕头大学医学院学报,2001,14(1):44～45

　[6]丛玉隆,马俊龙当代尿液分析技术与临床[M]北京:中国科技出版社,1998,85～105 ;

　　尿液有形成分（urine formed element）是指来自泌尿道，并以可见形式渗出、排出、脱落和浓缩结晶所形成的物质的总称。

　　尿液中显微镜检查可见的有形成分种类非常多，可分为有机成分和无机成分两大类。一些成分具有明确的病理意义，如细胞、管形、寄生虫等具有明确诊断价值；另一些为生理性排出的成分，如各种生理性结晶、上皮细胞等，这些成分在某些情况下具有辅助诊断价值。

　　尿有形成分染色方法及其选择

国内外有的作者不提倡沉渣染色检查。或提出将染色作为特殊检查与“常规”沉渣检查分列；染色方法少则2种，多的可达10多种。为便于叙述，现将染色法归纳为单染、复合染色、活体染色、鉴别染色及特殊染色等五种。

21 单染法 即单一染色液染尿中有形成分的方法，如在湿的尿沉渣片（简称湿片）中加入2%醋酸1滴可破坏红细胞，鉴别酵母菌孢子外，还可清楚见到白细胞核。湿片中加一滴Lugor碘液，上皮细胞染淡黄而白细胞深染，管型也着色。以蓝色染料有05%～ 1%亚甲蓝、2%考马斯亮蓝、品蓝等，我们感到蓝染料单一而后者细胞不易着色，但粘液丝蓝色可辨。欧洲尿液检查文件推荐应用05%甲苯胺蓝认为有对胞核结构染色清晰的优点，崔建和用2%孔雀绿观察了36例小儿急性肾炎发现红细胞管型清晰。其他的单染值得注意的是胆汁，因在严重肝病黄疸尿中，尿中各种染色结构分明易于识别，因而没想用天然的胆汁染“湿片”是否可取？

以上列举的几种单染法有试剂单纯、易得、低廉且易于配制，染色简便、易于推广等优点，但缺点为染色单一，对核、胞质不易鉴别，分色及渗透性差，高浓度染料放置后形成沉渣，因此最好用小包装，分装染色前滤过残渣以免干扰染色视野。

22 复合染色 用两种或两种以上染色法或加助染剂的染色法。最常用的尿沉渣在玻片干燥后（简称干片）使用瑞-吉氏联合染色，由于与血片染色同步，各实验室易于实施及推广。北医大一院1987年用本法计数尿沉渣中性粒细胞的百分比以70%为界区别感染及非感染。但干片需时长，干燥片时细胞易变性及形态变化，与湿片比较细胞、管型易溶解和变形；在有形成分少的干片上如不加血清固定，则易因冲洗不易看到其中有形成分。瑞氏染色还受pH值、温度等因素影响，不易看清肾小管上皮细胞结构。据多种文献介绍，认为巴氏（Papanicolaou）染色为最佳复合染色法，不仅分色良好，有形成分结构清晰，且对尿中异形细胞如肿瘤细胞易于分辨；Schumann在肾细胞病理染色为首选方法，但因染料品质要求高，采用多种染料、多次脱水手续繁杂，因而很难普及。

23 活体染色法 简便易行的有1%灿烂甲酚蓝（煌焦油蓝）易在各单位实施，但也具备上述单染法的问题。Sternheimen-Malbin(S-M)即龙胆紫-沙黄染色染料价廉易得，染色方便，已成为国内外介绍最多的染色方法。早在60年代的专著中对染料配制染色方法已有详细介绍，通过S-M染色红细胞可染成淡蓝色，多形核白细胞染成橙红色，在有的白细胞胞质中见颗粒呈Brown分子运动定名为闪光细胞。据报道如在白细胞中＞10%，对确定肾盂肾炎有助。透明管型呈粉红或淡紫色细胞管型染成深紫色，但本法试剂配制后易产生沉渣，且对尿有形成分鉴别作用不够强，因而欧洲文件建议用Alicianblue 8G-Pyronin B组合即Sternbeimer(S)染色法取代，国内也有SM染色及S染色法染色结果对比表的介绍。其他复合染色如Kage 染色法，采用醋酸酮、8-羟喹啉联苯胺组合鉴别白细胞，但后者为致癌物，不再推荐。还有Lippman染色法用饱和苦味酸、甘油、美蓝、伊红等染料，但染料组合后易产生紫褐色细颗粒干扰染色。

24 鉴别染色 按不同染色法以鉴别尿中不同成分，如用油红-O或苏丹-Ⅲ染脂肪，Hansel染色染嗜酸粒细胞脂酶，Naphy-ASD染色查单核细胞，Gram染色法染细菌，普鲁士蓝染含铁血黄素等，这些染色在国外已列入规程要求达到规范化、程序化及标准化，在尿有形成分染色中发挥鉴别作用，因此在国内建议借鉴应用在实验检查中有利于对尿颗粒的识别。

25 特殊染色法 为近年来在自动尿有形成分检查推广的染色法，土在自动尿有形成分细胞仪（UF-100、UF-50）应用的快速的尿颗粒成分检查。UF系列将染料Uninosearch即含2种类型的荧光染料：羰化青及菲啶使尿颗粒着色后，经激光照射，检测着色颗粒前向散射光和不同荧光强度，提供尿中颗粒大小及染色敏感性的信息。本法有不需离心，方法统一可比性高，易进行质量管理可同时完成红细胞、白细胞、细菌（酵母菌）等多项检测，因而是尿分析的重大改革。采用荧光染料在荧光显微镜下观察肿瘤细胞，用扫描、透射电镜观察细菌管型。另外采用免疫组化染色识别管型来源，便于对急性肾小管坏死，急性间质性肾炎，新月型肾炎特殊肾疾病提供了无需活检的鉴别实验，本法实验需针对肾细胞、管型的各种单克隆抗体，实验难度大，因而报道不多。

Grupp C等报道在丙酮固定后鉴别非鳞状上皮核的凝集素染色法即通过免疫荧光检查提供了一种鉴别尿中有核细胞的可靠方法，Grunewald-R-W等观察了41例肾移植排斥反应病人，用流式细胞仪观察尿中淋巴细胞CD3、CD4、CD8、CD14及单核巨噬细胞，提供了一个对急性肾排斥反应有参考价值的尿有形成分染色法。

尿有形成分虽有一定进展，我们初步介绍了各种鉴别尿中颗粒的染色法，特别是自动分析仪--流式细胞仪，半自动定量分析板等均采用染色技术提高鉴别力证明了染色的重要性。通过上述方法介绍及选择原则，各种染色法各有特点。在基层实验室应用复合染色或活性染色比单染效果好，肾科用免疫荧光提高识别力，而鉴别染色有助于对尿中 不同颗粒的识别。如何进一步完善染色法对染液进行质量管理，并对染色方法规范化、标准化，是今后值得深入探讨的。还有一个重要的问题是如何将尿有形成分染色法用于肾、泌尿道及其他疾病病人的防治工作，加强临床及实验室的联系，为临床服务，也是实验室工作人员应经常考虑到的。