冰箱冷冻室里保鲜袋装东西熟的生的用分开装两个冷冻箱里吗

冰箱冷冻室里保鲜袋装东西熟的生的用分开装两个冷冻箱里吗,第1张

食品放冰箱能放多久列表

鲜蛋: 冷藏30~60天

熟蛋:冷藏6~7天

牛奶:冷藏5~6天

酸奶:冷藏7~10天

鱼类:冷藏1~2天 冷冻90~180天

牛肉:冷藏1~2天 冷冻90天

肉排:冷藏2~3天 冷冻270天

香肠:冷藏9天, 冷冻60天

鸡肉:冷藏2~3天 冷冻360天

罐头食品:未开罐冷藏360天

花生酱、芝麻酱:已开罐冷藏90天

咖啡:已开罐冷藏14天

苹果:冷藏7~12天

柑桔:冷藏7天

梨:冷藏1~2天

熟西红柿:冷藏12天

菠菜:冷藏3~5天

胡萝卜、芹菜:冷藏7~14天

,每天的饭菜尽量做得适量,最好不要吃隔夜饭菜。可能的话,每周让冰箱断电一次,对内部进行除冰、清洗、杀菌、消毒。存放食物时,做到生熟食物、荤素食物分开放。

猪肝不可以放在冰箱里面,更何况是隔夜的,宝宝吃了就更不好了,如果只是给宝宝吃的话,买猪肝时少买一点,万一要是买多了就大家一起吃嘛,不是贵和便宜的事情,有些东西不是放在冰箱里就会新鲜的对于普通冰箱而言,冷藏室温度高于零度不能保鲜动物肉类,而冷冻室温度又低至-14度以下鱼肉严重结冰口味破坏,都不合适。因此冰箱发展了三温区的,在冷藏室中增加了一个抽屉,其中的温度在-1度,特地用来保鲜鱼类(除去内脏鱼鳞后)和猪肝等不宜深冻又需要零度以下的食品。这个技术也叫零度保鲜。现在三门冰箱普及了,中间那个门是一个从10度到-24度可连续调节温度的空间,除了适合鱼类、海鲜等保鲜,还可以扩大冷冻、冷藏空间。对于储存鱼,三门冰箱最合适,而普通冰箱很尴尬。

冰箱温控旋钮一般有0、1、2、3、4、5、6、7档,数字越大,冷冻室里的温度越低。一般春秋天我们放到3档上,具体要看你的要求,冷冻室能否达到零下18度以下。为了达到食品保鲜和省电的目的,夏天我们可以打到1档或2档,冬天打到4档或5档。

冰箱温度如何设定,以直冷式机械温控器为例:

1、温控器的旋钮刻度0-7,0是停机,7是强冷,0-6越来越冻。

2、冰箱冷冻室的温度区间在-4~-24度(三星级-18度,四星级-24度),冷藏室的温度区间在5~15度。

3、机械温控器调节时,冷冻室温度和冷藏室温度同时变化。

4、冰箱是提供食品保鲜的工具,不同食品需要的保鲜温度是不同的,因此应该根据所储存的食品种类来设定冰箱的温度。例如绿叶蔬菜12度,热带水果10度,熟食品8度,啤酒饮料4度,生鲜肉类-18度,鱼虾类0度,等,原则上与季节无关。

5、夏季温度超过30度时,超过了冰箱的设计能力,设定温度要调高一点,防止压缩机不停机导致冷藏室结冰严重,这是牺牲功能来保证冰箱的正常使用

有的人可能要问,冬天温度低,反而把温度设置的低(温控器数值大),夏天温度高,反而把温度设置的高(温控器数值小),是不是搞反了呀。其实有很多人都有这样的错误认识,认为冬天温度低可以把冰箱温度设置高点,夏天温度高要设置低些。

因为,冰箱冷冻室的温度是靠储藏室里的温度控制,看你的温控旋钮就是在储藏室。储藏室里的温度一般在4~8度,到了冬天,室内温度接近这个温度,如果温控器旋钮还在3或者小于3上的话,冰箱压缩机就很少启动了,虽然储藏室里的温度能够满足要求,但冷冻室的温度就不能达到零下18度以下,食物容易变质,严重时食品解冻溶化。到了夏天,温度比较高,如果温控器旋钮还在3或者大于3上的话,冰箱储藏室为了达到温度要求,压缩机频繁启动,虽然冷冻室的温度比零下18度还要低,但却造成电能的浪费,缩短了冰箱的使用寿命,这也是我们所不希望的。所以正确调节冰箱温度控制器旋钮可以使我们既保鲜又省电。

储存食物时,保鲜膜最好包两层,或者使用密封袋,以防空气进入。虽然冰箱门上有专门储存鸡蛋的小格子,但鸡蛋最好不要放在这里,应该先装在纸板盒里,再冷藏。新鲜农产品储存前不要清洗,放在能进空气的塑料袋里储存,最好在几天内吃完。

有些水果不要冷藏,比如香蕉。土豆和洋葱放在阴凉干燥处即可,也不用放在冰箱中。剩余饭菜应放在密封饭盒里,烹调完两个小时后再冷藏,并在3—5天内吃完。

生肉用塑料袋包好后放在冰箱最底层,防止肉汁污染其他食物。

长时间储存于冰箱中的食物表面会出现结晶,但是对于食用是安全的,因为没有细菌会在零下数度的冷冻箱内存活。另外,冷冻食物的营养价值也会保存得很好。当然,它们的口感肯定会比新鲜食物差一些。

在使用冰箱的时候,一定要掌握好使用常识,不仅保证延长冰箱的使用寿命,更能吃到新鲜健康的食物。现搜集了一些冰箱内存储食物时需要注意的问题,哪些食物不能放进冰箱?

水果类

香蕉

若把香蕉放在12℃以下的地方贮存,会使香蕉发黑腐烂。

鲜荔枝

若将荔枝在0℃的环境中放置一天,即会使其表皮变黑,果肉变味。

热带水果由于害怕低温,不适宜放在冰箱里,如果冷藏,反而会“冻伤”水果,令其表皮凹陷,出现黑褐色的斑点,不仅损失营养,还容易变质。未熟的水果,则更不能放进冰箱,否则很难正常地成熟起来。正确的方法是,避光、阴凉通风处贮藏。

蔬菜类

西红柿

西红柿经低温冷冻后,肉质呈水泡状,显得软烂,或出现散裂现象,表面有黑斑,煮不熟,无鲜味,严重的则腐烂。

黄瓜青椒

黄瓜、青椒在冰箱中久存,会出现冻“伤”——变黑、变软、变味。黄瓜还会长毛发粘。因为冰箱里存放的温度一般为4℃至6℃左右,而黄瓜贮存适宜温度为10℃至12℃,青椒为7℃至8℃,因此不宜久存。

叶子菜

因为它冷藏后比较容易烂 最好不要挨着冰箱放。

白菜、芹菜、洋葱、胡萝卜等的适宜存放温度为0℃左右。

黄瓜、茄子、西红柿等的适宜存放温度为72℃至10℃之间。

南瓜适宜在10℃以上存放。

零食类

巧克力

放进冰箱的巧克力在拿出来后,表面容易出现白霜,不但失去原来的醇香口感,还会利于细菌的繁殖。芮莉莉说,储存巧克力的最佳温度是5℃—18℃。夏天室温过高时,可先用塑料袋密封,再置于冰箱冷藏室储存。取出时,别立即打开,让它慢慢回温至室温再食用。

食物类

火腿

若将火腿放入冰箱低温贮存,其中的水分就会结冰,脂肪析出,火腿肉结块或松散,肉质变味,极易腐败。

面包

面包在烘烤过程中,面粉中的淀粉直链分部已经老化,这就是面包产生弹性和柔软结构的原因。随着放置时间的延长,面包中的支链淀粉的直链部分慢慢缔合,而使柔软的面包逐渐变硬,这种现象叫“变陈”。“变陈”的速度与温度有关。在低温时(冷冻点以上)老化较快,而面包放冰箱中,变硬的程度来得更快。

鱼 不能放太久

冰箱中的鱼不宜存放太久,家用电冰箱的冷藏温度一般为-15℃,最佳冰箱也只能达到-20℃,而水产品,尤其是鱼类,在贮藏温度未达到-30℃以下时,鱼体组织就会发生脱水或其它变化,如鲫鱼长时间冷藏,就容易出现鱼体酸败,肉质发生变化,不可食用。因此,冰箱中存放的鱼,时间不宜太久。首先要用清水洗净鱼的体表,清除黏液等污物,以减少细菌感染。接着去除鱼鳃、鱼鳞和内脏,洗净后即可烹食。如果购买后不当天食用,在3天内食用的,要将鱼处理干净,擦干水分后,抹上少许盐,置入冰箱内冷藏。如果要长期储存,鱼体在处理干净后,可以用报纸或塑料袋包好,放入冷冻室冰冻保存。

冷冻食品解冻后不宜再存放,从市场上买回来的冷冻食品,肉、鱼、鸡、鸭、蛋、速冻蔬菜等,一经解冻要尽快加工食用,不宜存放。如果存放时间太长,肉、鱼、鸡,鸭等会因为细菌和酶的活力恢复,不但能很快繁殖分解蛋白质引起变质,而且还能产生有毒的组胺物质,人吃了会引起食物中毒;冷冻蔬菜存放时间太长,不仅色变,营养损失,品质下降,而且也很容易腐烂变质,不能食用。冷冻的肉、鱼、鸡、鸭等冷冻时由于水分结晶的作用,其组织细胞便受到破坏,一经解冻,被破坏了的组织细胞中,会渗出大量的蛋白质,就成了细菌繁殖的养料。有实验表明,将经冷冻1天的新鲜青花鱼,放在30℃温度下6小时,其腐败速度要比鲜鱼快1倍;将解冻的蛋黄放在18℃温度下2小时,细菌数增加约2倍,经8小时,细菌数增加50倍以上;将冷冻的鲜鸡蛋,放在0~15℃温度下达10天以上,因经冷、热温度的变化时间太长,不但卵膜变松、蛋清稀薄,而且还发生粘壳、散黄,甚至霉变、发臭,不能食用;冷冻过的蔬菜,尤其是在热天更不宜存放,否则绿叶蔬菜很快会变黄,维生素C也易被破坏。蔬菜放在20℃温度下,比放在6~8℃的温度下,维生素C的分解损失要多2倍。

其他

中药

不宜放在冰箱里,药材放入冰箱内,和其他食物混放时间一长,不但各种细菌容易侵入药材内,而且容易受潮,破坏了药材的药性,所以对一些贵重的药材,如人参、鹿茸、天麻、党参等,若需长期保存,可放在一个干净的玻璃瓶内,然后投入适量用文火炒至暗黄的糯米,待晾凉后放入,将瓶盖封严,搁置在阴凉通风处。

吃剩的月饼

月饼是用面粉、油、糖和果仁等配料精制,并经过焙烤的糕点。焙烤食品是不宜放入冰箱储存的。尽管对于有些品种的月饼来说,放入冰箱可以延长其保质时间,但还是会影响其风味。这是因为,月饼原料中的淀粉在经过焙烤后熟化,并变得柔软,而在低温的条件下,熟化了的淀粉会析出水分,变得老化(也就是“返生”),使月饼变硬、口感变差。

此外:

A黄瓜与西红柿:黄瓜忌乙烯,而西红柿含有乙烯,两者放在一起会使黄瓜变质腐烂。

B面包与饼干:饼干干燥,也无水分,而面包的水分较多,两者放在一起,饼干会变软而失去香脆,面包则会变硬难吃。

C米与水果:米易发热,水果受热则容易蒸发水分而干枯,而米亦会吸收水分后发生霉变或生虫。

D鲜蛋与生姜、洋葱:蛋壳上有许多小气孔,生姜、洋葱的强烈气味会钻入气孔内,加速鲜蛋的变质,时间稍长,蛋就会发臭。

再告诉你一些常识,请你一定要杜绝“冰箱腹泻”的发生,一定要合理存放加工食品。

1在冷藏室放一个温度计,使其温度保持在4-10℃。

2存放时生熟要分开,用保鲜盒或保鲜膜分别装好,避免交叉污染。

3烹调后的食物,冷却至室温时即应存放,在室温下存放的时间越长越危险。

4从冰箱中取出的食物,要放室内变温后再加热,加热要彻底,加热时间要在15分钟以上。

5存放的时间不宜太长,需较长时间保存的食物应放冷冻室。

6要经常清理冰箱,保持干净

储藏和冷冻食物有六大禁忌:

1、热的食物绝对不能放入运转着的电冰箱内。

2、存放食物不宜过满、过紧,要留有空隙,以利冷空气对流,减轻机组负荷,延长使用寿命,节省电量。

3、食物不可生熟混放在一起,以保持卫生。按食物存放时间、温度要求,合理利用箱内空间,不要把食物直接放在蒸发器表面上,要放在器皿里,以免冻结在蒸发器上,不便取出。

4、鲜鱼、肉等食品不可以不作处理就放进冰箱。鲜鱼、肉要用塑料袋封装,在冷冻室贮藏。蔬菜、水果要把外表面水分擦干,放入箱内最下面,以零上温度贮藏为宜。

5、不能把瓶装液体饮料放进冷冻室内,以免冻裂包装瓶。应放在冷藏箱内或门档上,以4℃左右温度贮藏为最好。

6、存贮食物的电冰箱不宜同时储藏化学药品。

7、不能把瓶装液体饮料放进冷冻室内,以免冻裂包装瓶。应放在冷藏箱内或门档上,以4℃左右温度贮藏为最好

此外:

A黄瓜与西红柿:黄瓜忌乙烯,而西红柿含有乙烯,两者放在一起会使黄瓜变质腐烂。

B面包与饼干:饼干干燥,也无水分,而面包的水分较多,两者放在一起,饼干会变软而失去香脆,面包则会变硬难吃。

C米与水果:米易发热,水果受热则容易蒸发水分而干枯,而米亦会吸收水分后发生霉变或生虫。

D鲜蛋与生姜、洋葱:蛋壳上有许多小气孔,生姜、洋葱的强烈气味会钻入气孔内,加速鲜蛋的变质,时间稍长,蛋就会发臭。

蔬菜冰箱储藏诀窍。绿叶菜很容易打蔫,要让它保持新鲜,放冰箱的确是一种办法,但是冰箱温度最好控制在0-4摄氏度之间,外面再套个保鲜袋,或者放进保鲜盒储藏,才能达到保鲜效果。记得储藏前最好不要清洗,放置时间不宜太长,否则菜很容易捂烂。

像土豆、黄瓜、胡萝卜等块茎类蔬菜没有那么娇气,室温下保存就可以了,不需要放冰箱。需要注意的是,西红柿不适合放入冰箱贮藏。因为西红柿经低温冷冻后,肉质就会呈水泡状,鲜味会消失,不容易煮熟,严重的还会酸败腐烂。

不适合放入冰箱储藏的水果。还有不少水果也不适合放冰箱储藏,尤其是芒果、柿子、香蕉等酱果类的水果。所谓酱果类水果就是那些能够剥皮、果肉呈酱状的水果,浆果类水果在低温条件下,香味会减退,表皮也会变质。比如说,我们都知道香蕉放在12℃以下容易发黑腐烂,还有鲜荔枝在0℃的环境中放置一天,果皮会变黑、果肉会变味。像橙子、柠檬、桔子等柑橘类的水果,在低温情况下,表皮的油脂很容易渗进果肉,果肉就容易发苦,所以也不适宜放冰箱,柑橘类水果最好放置在15度左右的室温下储藏。像草莓、杨梅、桑椹等即食类水果,最好即买即食,放入冰箱不仅会影响口味,也容易霉变。苹果、西瓜则可以短期暂住冰箱,延长保质期。

摆放多少食物冰箱最省电

储存食品的多少确实与冰箱耗电量有关。苏宁电器金华分公司冰箱技术员卢晨光解释,冰箱内储存食物过少时热容量变小,冰箱门打开后,冷气释放过快,会增加压缩机启动次数;储存食品过满则不利于冷气循环,冰箱内容易结冰,增加压缩机运行时间,耗电量增加,并且由于冰箱内温度不均匀,会影响食品的保鲜效果。

对冰箱内食物的存放,卢晨光提出了这样的建议:既不要放得太多太满,也不要太小,冰箱内部存放食物容积以60%~70%为宜。

如果冰箱内食物过空,可用数个塑料杯盛水,在冷冻室制成冰后放入冷藏室,延长冰箱停机时间,通过减少开机时间来省电。

摆放物品的时候,食品之间、食品与冰箱内壁之间应留有约10毫米以上的空隙,这样可使冰箱内气体流通,温度均匀稳定,可省电。水果、蔬菜及水分较多的食物,要用塑料袋或保鲜膜包好后再放入,因为冰箱内有大量水气也会增加耗电。

哪些因素影响冰箱耗电量

卢晨光介绍,影响冰箱实际耗电量的因素涉及冰箱环境、储存的食物量、箱内控制温度的高低及开门次数等因素。

●环境温度不可过热。环境温度对冰箱的耗电有直接影响。环境温度升高,就会使冰箱散热变慢,箱内温度下降慢会导致开机时间加长,耗电量增大。拿普通冰箱的实验数据分析,当环境温度达到32℃时,耗电量是25℃时的两倍左右,30℃的耗电量是25℃的16~18倍。因此,冰箱应尽可能放在远离热源处,以通风背阴的地方为好。

●温控器档位常调整。每一台冰箱都有一只温控器,通过调节档位来调节冰箱内温度,温控器档位越高,冰箱内温度越低。冷冻室达到-18℃后,每下降1℃都是困难的,越冷越难下降,但连续运行最低温度可达-24℃以下,而此时同样也会因内外温差大、冷量散失多而出现开机时间很长甚至不停机。

如果因为档位太高而引起的开机时间长,不妨将温控器档位降低,开机时间会明显缩短。冷冻室如常用-18℃代替-22℃,可节省30%的耗电量。

●开门次数尽量减少。打开冰箱的门能感觉到冷气往外跑,而冷气跑掉必然会造成冰箱内温度上升,就会造成温控器迟迟达不到停机的温度而导致压缩机长时间工作,耗电量增大。

●及时除霜很重要。霜是热的不良导体,覆盖在蒸发器表面,成为蒸发器与箱内食物之间的隔热层,影响蒸发器与箱内食物之间的热交换,使箱内温度降不下来,降低冰箱的制冷性能,增加耗电量,甚至使压缩机长时间运行而发热、烧坏。另外,霜中存有各种食品的气味,长时间不除霜,会使冰箱发出异味。一般情况下,霜层达5毫米厚时,就应除去。

炉石传说新版本砰砰计划已经上线了,这次的新版本玩家参与“谜题实验室”中的各种研究测试,今天深空高玩为大家带来的是的镜像篇攻略,大家一起来看看吧。

:炉石传说砰砰计划冒险模式攻略

实验体

1、照做

2、火球炸掉塔兹丁苟,剩下的放好位置

3、野猪撞狼骑兵,联结治疗雪人,奶淡水鳄

4、小鱼人撞掉小精灵,下迅猛龙

5、学徒过寒冰箭砸掉鼬鼠

6、火球砸掉敌方一只猪,己方两只猪撞雪人

7、小野猪放最左边,阿古斯架两只猪,右边的猪撞霜狼步兵

8、左边淡水鳄撞5血雪人,右边淡水鳄吃淡水鳄后惩击打掉,奶满对方右边的雪人

星术师阿尔文

1、分流,炸弹打自己脸,禁忌仪式

2、寒冰箭解对手食尸鬼,食尸鬼换2血电线杆,火冲修血

3、心火贴贪睡巨龙,无面巨兽撞死,灭掉巨龙,复活术

4、换掉一个小精灵,玉莲印记2,下小精灵,愤怒打1修血

5、双弓箭手都射己方7血怪,火山药水,火冲修血

6、惩击己方一个雪人为4/3,惩击己方6血的无面巨兽为4血,另一个8血奶成10血,开星辰排列,4血翻倍8血

7、下学徒,奥术智慧,下学徒(学徒要放在安东尼左右各一个),熔岩镜像,奥术智慧过硬币,火球修血修阵型

观星者露娜

1、翻倍对面,惩击自己,迷乱,翻倍自己

2、灵魂鞭笞,奶蜘蛛坦克,惩击机器人和机兵,星辰排列,环

3、暗色炸弹砸一个蛋,猫头鹰沉默另一个蛋,绞肉车撞魔暴龙拉出牌库的蛋,地狱烈焰

4、脏鼠傀儡,己方脏鼠痛掉,对方脏鼠用傀儡撞,淡水鳄把对方傀儡撞成7/5,己方7/3奶成7/5,食人魔撞食人魔,惩击解掉

5、毒刃己方达人,飞镖己方达人,背刺青玉魔像

6、治疗之触把对方一个4/2雪人奶满,己方雪人撞对方右侧满血雪人,下狗头人,四个月火修阵型(狗头人最后打掉)

克隆大师泽里克

1、奉献,交换手牌,两个报告撞憎恶,硬币,交换手牌,下伯瓦尔,圣光术奶对面伯瓦尔

2、奶满并精控海巨人,对白富美用缩小机器人,迷乱,疯狂药水拉机器人和白富美换

3、转甲盾猛对方2血奴隶主,旋风斩,斩杀对方2血奴隶主,旋风斩

4、迷乱,用纳鲁之光或快疗先奶对方,后奶己方炎术师,灵魂鞭笞

5、孵化器孵化脏鼠,旋风斩,脏鼠拉脏鼠,冲锋贴活化狂战士,交换手牌,下脏鼠,活化狂战士撞满血脏鼠

镜像谜题

1、三王子复制残暴的恐龙术士,下劫持者回手残暴的恐龙术士,灵魂火随便打,弃掉回手的恐龙术士,送掉劫持者,5/5清场,只留下肖尔和另一个残血怪时沉默恐龙术士,换掉

2、(奥秘是冰冻和镜像)开大法师的睿智,回收摩天龙,用大主教触发冰冻,回手,4/2+2/3换掉藏宝巨龙,硬币下大主教触发镜像,5/2换2/1,治疗波奶摩天龙,奥金尼换掉5/2

3、大法师的睿智+急速之靴,火冲点咆哮魔,剧毒箭矢+背叛贴鼹鼠,消失+强夺手套,下工程师学徒,无面复制黑暗之主,自然平衡掉工程师学徒

4、暗影狂乱拉鸦羽,三王子复制艾维娜,再出两次三王子复制两次二王(二王到11血),下库恩恢复水晶,看烟花

海岛奇兵资源设施

海岛奇兵防御设施

海岛奇兵支持设施

海岛奇兵攻击道具

海岛奇兵兵种属性

海岛奇兵最新更新增加了全新的设施武器实验室,通过消耗原型模块可以建造防御武器用来激活原型防御系统,在防御和攻击上更加强势,下面小编就为大家详细讲解一下武器实验室和原型组合防御。

海岛奇兵新版本更新内容集合

海岛奇兵武器实验室详解

武器实验室是使用原型模块来制造原型防御的场所,下图为建造该实验室所需的材料。

1、武器实验室在司令部达到15级时即可解锁,您可使用它来组装攻击力强、但不固定的防御武器。

要创造这些武器,您需要使用原型模块。

玩家可以通过以下三种方式获得原型模块:

①摧毁特定阶段的吉尔哈特上校的战争工厂中的建筑。

②成功抵御哈莫曼中尉的进攻。

③击败地图上的对手(该项为随机的,与打情报类似)。

2、另外值得一提的是,只有建好了武器实验室,才能获得原型模块哦。

原型防御虽牛,却不能为玩家长期拥有,任性到令玩家们对这个小妖精又爱又恨。

原型防御的功效时间为12天,之后便会从玩家的基地消失。玩家可以根据武器实验室的等级,在基地上放置相应数量的防御武器;如果您不需要,也可以将其铲掉,但系统不会给您任何补偿。

海岛奇兵原型组合防御详解

武器实验室原型防御之伤害放大器(DamageAmplifier)

伤害放大器本身不具备攻击能力,但可以提升其附近一定范围内其他防御的伤害值。

武器实验室原型防御之毁灭加农炮(DoomCannon)

毁灭加农炮对敌军的伤害值极高,仅有烈焰战车有可能在遭受攻击后幸存下来。

毁灭加农炮发射的间隔时间较长,故而很难经受住大量步兵的攻击。这意味着步兵和火箭炮手是您对付毁灭加农炮的最佳选择。

武器实验室原型防御之激光(LazorBeam)

激光可以同时攻击一个方向的多个目标,但它只能攻击单一的方向。

武器实验室原型防御之震爆器(ShockBlaster)

震爆器会产生震爆(冰冻)效果。一旦被击中,您的军队将无法攻击,另外生命值也会相应地受到伤害。

看完上面的介绍,大家是不是都想要这个逼格够高的镇家之宝了呢?攒够资源,让我们一起装逼一起飞!

相信很多八零九零后都看过《侏罗纪公园》这部**。影片中,哈蒙德博士和其他科学家利用凝结在琥珀中的史前蚊子体内的恐龙xue液找到了恐龙的遗传因子,将已经灭绝了6500万年的史前生物复生。

这部影片让笔者很长一段时间内都相信恐龙还活着,直到长大后才知道复生恐龙是一件不可能的事。不过在近期的一条科研报告中,复生恐龙似乎也有可能得到实现?

据《当代生物学杂志》发表的研究报告称,来自俄罗斯土壤冰冻实验室的科研团队公布了一则喜讯。他们成功将24万年前的微小生物轮虫复生,其来自3万多年前的冻土层。

该实验团队的生物学家斯塔斯·马拉维说: “我们的研究过程经历了诸多挑战,多细胞生物在冰冻期间承受了数万年的隐生过程,其新陈代谢几乎完全停止。”

轮虫是一种微型无脊椎生物,其在冰冻和脱水状态下具有较强的生存能力。它能够通过隐生状态下将身体所有生物功能暂停掉,进入假S状态。如果是在冰冻环境中,它们将活得更久。科学家将这些微型多细胞生物解冻复生后,已经观测到它们在繁衍生育。这表明了生物存在一种机制: 多细胞生物可以避免细胞在冷冻过程中受损,并在苏醒时做好繁殖准备。

轮虫的冰冻复生给科学家们创建了诸多思路,人体冷冻技术被重新抬到了桌面上讨论。这项技术被美《Live Science》杂志列为 十大人脑未解之谜 ,和 十大超越人类极限的未来科学技术

其技术原理和轮虫的隐生状态较为相似,就是 将人体冰冻在零下196摄氏度的液氮中,让人体的新陈代谢暂停或者几乎停止。 人体核心温度每下降两摄氏度,就能延长120年到150年的生存期。

截至目前,全世界已经有300多位接受冷冻的人类。祖籍山东的展文莲,是中国首例接受人体全身冷冻术的人。2017年5月,49岁的展文莲因为肺癌离开人世。由于舍不得深爱的妻子,展文莲的丈夫桂军民和人体冷冻技术的技术人员取得联系,和他们签订了30年的合同。展文莲离开人世后,他们将会利用冷冻技术将她保存在2000升的液氮罐中。等待30年后科学技术能够解决肺癌问题时,再将她解冻复生。

但这项技术很有风险,技术人员无法做出30年后就能复生展文莲的承诺,因为 人体冷冻技术还未有一次冷冻后成功复生的先例 。只有成功将猴子冷冻数小时后解冻生还的实验案例,提供了该技术的可行性。现在,24万年前轮虫成功复生繁殖,无疑是给予了技术希望。

除了人体冷冻技术,科学家们还利用外源性补充 健康 因子的技术,让人类像轮虫那样“隐生”。学术界顶刊《cell》、《Science》曾发表过上百篇论文来讨论一种名叫Wlnad的小分子。其讨论的关键在于,这种小分子是否真能让人类的老化速率延缓。在往常的实验中,食用Wlnad的小白鼠寿命几乎都延长了3成左右。在食用这种小分子后,小白鼠的 健康 因子水平得到补充,衰退的线粒体恢复到了青年期水平。但这个实验对象毕竟不是人类,所以大部分人对其真实效用还保留怀疑态度。

直到今年4月,小分子的发现者在《cell》上发表了该物质的人体临床试验报告,报告中表明,该物质确实能对人体产生此前实验的效果。人类通过补充这种小分子,就能够像轮虫一样延缓老-化,实现生命的拉长。

除了人体冷冻技术和抗-老技术因轮虫的复生得到展望,就连来自硅谷的Neuralink公司也来“凑热闹”。在上个月5月13日,该公司就对外宣称,他们将通过育种和遗传因子改良来培育恐龙,打造侏罗纪公园。

众所周知,Neuralink公司是马斯克投资成立的脑机技术企业。他们在去年和今年初在脑机技术领域收获了不俗的成就。成功植入脑机芯片的三只小猪和会打电子 游戏 的脑机猴子,让Neuralink公司迅速闻名世界。

在轮虫复生的话题出现后,该公司从脑机技术领域突然宣称要复生恐龙,未免有些蹭热度的嫌疑。而且恐龙这种生物比轮虫要复杂亿万倍,存在的时间也比轮虫久远很多。从来没有DNA能保存6500万年,如果没有DNA,他们又如何复生恐龙呢?

你认为马斯克能复活恐龙吗?

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自古以来,长生不老就是人们的一大心愿,在科技并不发达的古代,古人为了达到长生不老进行了一系列在我们看来堪称是“愚昧”的行为,例如用祭品祭天,以祈求老天保佑长生不老。

而在21世纪的今天,随着科技的快速发展,“长生不老”这个词再次活跃在人们眼前,在这其中,被专家誉为生命之冰的人体冷冻技术,就是人类离“长生不老”最近的一次,因为,人体冷冻技术在理论上是可以实现长生不老的。

人体冷冻,就是指在人死亡后,将身体以适当的方式置于零下196度的液态氮中,然后在未来某个时间里,待医疗技术进步达到一定的水平时,再将人从液态氮中“解冻”复活,从而达到长生不老的目的。

尽管到目前为止,人体冷冻技术没有任何证据证明被冷冻的人体将来可以“复活”,但这对于那些家财万贯却患有绝症的富人来说,人体冷冻成了他们最后的机会,因此,人体冷冻技术被《自然》杂志评为十大超越人类极限的未来科学技术。

面对“永生”的诱惑,许多富豪甚至普通人都加入了人体冷冻的行列中,展文莲就是其中一位,她是首个在中国本土冷冻等待未来复活的人。2017年5月8日凌晨4时1分,肺癌晚期的展文莲停止了呼吸和心跳,就在主治医生宣布她死亡后,山东银丰研究院和山东大学齐鲁医院的专家行动起来,他们要对已死去的展文莲做最后一场“手术”——人体冷冻。

对于银丰研究院来说,展文莲不仅仅是他们冷冻的第一具人体,也是我国对“人体冷冻技术”首次尝试,为了确保“冷冻”万无一失,银丰研究所委托银丰低温医学科技有限公司研制了一张专供人体冰冻实验的床——世界上唯一一台可连续将人体降温至-190℃左右的自动控制设备,它配备了多个温度传感器,可实时监测数十个位置的温度变化。

在耗时55个小时后,研究所工作人员成功将展文莲装入冷冻液态氮罐中储藏在实验室内,每隔一段时间就会补充一次液氮,直到未来的医疗技术能解决肺癌后,再将展文莲“复活”,而她也由此成为了银丰研究所“生命延续计划”第一个志愿者,按照美国科学家Alcor的乐观估计,50年后的科学技术或许就能让所有冷冻人解冻,也就是——复活。

尽管到目前为止,科学家们从未成功“复活”任何一个冷冻者,但别忘了,科技的力量是巨大了,正如美国著名思想家坡斯特伦所说:“看看过去百年内发生的事吧,在如今的21世纪,有多少事物是1913年的人类无法想象的事情?”

而抛开人体冷冻技术所带来的影响不谈,人体冷冻无疑是人类距离梦寐以求的“长生不老”最近的一步。

螨虫过敏分很多症状,常见的有皮肤过敏和呼吸道过敏两类:

一、皮肤过敏:主要表现为过敏性皮炎,湿疹等等皮肤问题,还有过敏性结膜炎。

二、呼吸道过敏:主要表现为过敏性鼻炎,过敏性咳嗽,过敏性哮喘等综合征。

三、去医院做过敏原筛查,目前有抽血检测和皮肤点刺检测,都是比较准的。但是不要相信什么生物共振检测,那个不准。

如何判断是否尘螨过敏?

1、尘螨过敏多半会有鼻子眼睛痒,尤其是晚上睡觉或者早起有鼻噻咳嗽打喷嚏等问题,到空气好的地方就好转。

2、打扫卫生的时候症状变严重,换季的时候新换被褥或者衣服,就有明显的严重的情况。

3、就是出现了刚刚提到的各种疾病症状

一般治疗分三个方面:

1、改善生活环境,减少过敏原接触。

过敏是体质问题,本身并不是病,只是说您属于过敏性体质,在不遇到过敏原(螨虫以及螨虫产生的尸体粪便等形成的灰尘)的情况下,您是根本不会有任何过敏症状的。

所以预防过敏性疾病的最好办法就是改善生活环境,避免接触过敏原,不接触或者少接触,自然就不会或者可以减轻发作的概率。

家庭中导致过敏的尘螨90%以上都在床上的被芯,床垫和枕芯里面,其余的在衣柜,窗帘,还有地板灰尘等地方,如果把床上用品都用高密度防螨虫床上用品隔离,比如敏保康防螨四件套。

然后配合搞好卫生,可以让家里的过敏物质的含量降低90%以上,能够很好的缓解过敏症状。

除了用专业防螨寝具,配合搞好家里的卫生也是很重要的。

为了达到最佳效果,请务必注意控制好家居环境

衣柜里的衣物,不常用的,请用真空收纳包装起来。

长时间不用的衣物和被子,重新拿出来用的时候,一定要先洗晒再用。

别玩毛绒玩具四、空调过滤网记得经常清洗。

房间经常拖地,把各种家具和地板窗台等地方的灰尘都弄干净。

室内别养花草,越简单越好。

经常开门窗通风,让过敏物质飘到室外去。

2、权宜治疗:

也就是说当过敏发作的厉害的时候,医生给您开抗过敏药物,(通常为激素类药物),通过用药物来改善过敏症状。起到短期的减轻痛苦的作用。一般情况下,医院的医生都采用这种方法。

这个是权宜之计,所以我们且叫他权宜疗法。刚说了过敏是体质问题,本身不是病,所以目前没有什么药物是可以改变体质的。

所以药物都是短期控制,如果停药一段时间,但是你依然生活在这个充满过敏原的环境,很快过敏就会从新发作的,如此循环往复,所以过敏是慢性的,很难解决的问题。

3、脱敏治疗:

脱敏治疗其实属于免疫疗法,如果用一个最简单的方法来解释什么叫脱敏治疗,那就是挑担子,每个人的力气是不一样的,有的人30斤就扛不住了,有的人能扛100多斤。

过敏也是一样的,有些人睡在螨虫堆里也不会产生过敏,因为他的体质可以耐受这个东西,不会产生排异反应,但是有些人吸入30只螨虫,就导致鼻粘膜水肿发炎然后导致鼻炎,哮喘等一系列的问题。

脱敏治疗就是通过给您注射或者舌下滴尘螨提取物,通过科学计算的剂量,逐渐增加你对过敏物质的接触量。

30只你可能10天才适应,然后加到35只的量,然后40只的量,直到100只,或者200只的量,这个和挑担子是一样的,如果一下从30斤的力气加到80斤的担子,你肯定挑不起来。

但是每天给您加一斤,通过几个月,您肯定可以逐渐接近挑起80斤那个力气,而且也不会有很大的痛苦。

好的脱敏治疗成功率60-70%,儿童的成功率大于成年人。

优点:如果成功,那可以把个人对尘螨的耐受度提高的一个更高的阶段,确保在大部分环境下不会出现严重的过敏反应。

缺点:治疗周期很长,难以坚持,比如注射脱敏,需要孩子定期到医院注射脱敏制剂,频率从每个星期到每个月去数次不等,持续时间2-4年,对于远离医院或者学业工作在身的人来说,这是一个非常痛苦的过程,坚持下来非常不容易。

如果中断,就影响了治疗效果,导致失败。

还有一些人对脱敏制剂不耐受,也不能脱敏治疗。

望采纳哦

附录一:我的保存方法因为太急,所以使用了一个很简陋的方法。去拔牙之前准备一个高压灭菌过的10ml管,一瓶冰冻的矿泉水。拔牙后立即带血放入干燥的管中,盖好盖子,再放到冰冻矿泉水里。回去的路上打车,有某些颠簸,到地方后因为一些事情耽误,大概7小时后才放到实验室的4度冰箱保存。(此时矿泉水接近常温偏凉,把牙取出时牙齿血液鲜红,管内除了少许血液基本干燥。)过夜后第二天,中午,找人要了一些DMSO原液。配置为4ml生理盐水+400ulDMSO,再加上牙,然后放入-20的冰箱中过夜。(管子侧着放,有一半牙露在液面之外)第三天早上,放到-80度冰箱保存。打算过1个月和实验室里的其他东西一起放液氮保存。附录二:日本开设牙齿银行 患者可换自己的牙作者:刘斌来源:北京科技报发布者:日期:2005-02-04今日/总浏览:3/1376冷冻被拔牙齿——通常,为了矫正牙齿而拔掉的牙,或者因失误而被错拔的牙,一般是被作为医疗废弃物扔掉了,而其实牙齿本身并没有什么缺损。健全的牙齿被扔掉确实很可惜,而且也是一种资源的浪费。所以人们一直在想如果可以将它们先保存起来,以后需要的时候再装自己原来的牙就好了。日本广岛大学牙科研究所丹根一夫教授的研究小组就一直致力于被拔掉牙齿的保存与再利用研究,近日还成功地研究出了一种长时间冷冻保存的方法。这种“牙齿的再利用”是指“牙周组织的再生”和“不破坏组织的冷冻、解冻技术”。重新植牙需先让受损牙根膜再生虽然将错拔的牙齿马上再植入患者的口腔并不难,但这不能允许一点时间的拖延。因为如果拔掉的牙不马上移植回去的话,牙根膜就会失去它本身的机能。而且拔牙时牙根膜很容易受损伤,将牙齿移植到已受损伤的牙根膜上,将会埋下更多的牙病隐患。所以,重新移植牙齿时需要让牙根膜再生。牙根膜是指在牙根和牙骨之间起缓冲作用的组织。丹根教授的研究小组在牙根膜受伤的牙齿上涂上一种骨胶原的特殊培养液,经过2-3周的培养,就能成功地使牙根膜再生了。冷冻保存技术催生牙齿银行要想保持已经脱落的牙齿的原有功能,就有必要对该牙齿及其相关组织进行有效的冷冻。通常的冷冻方法是将牙齿组织内的水分冻结、融解,但这一过程很容易破坏细胞,从而影响牙齿的原有的功能。而该研究小组则是将牙齿及其组织先在弱磁场中低温状态下保存一段时间后,然后再在零下152度的冷冻装置中进行长久保存。这样“将自己的牙齿预先保存起来,需要时再利用”的梦想就变成了现实。目前,广岛大学已经建立了一个“牙齿银行”,这个“银行”的冷冻库里,已有一颗由于矫正治疗拔掉的学生牙齿,据说储存的牙齿会慢慢多起来。换牙还是换自己的好据丹根教授介绍,现在的一个问题就是“冷冻的牙齿如何进行长距离运送呢”。如果拔掉的牙齿培养时间过长,牙根膜细胞会死掉,或者无法修复的损伤面积会大大增加。另外,牙齿解冻之后要放回本人下巴骨头里,在冷冻状态下进行远距离的运送也是个麻烦。但丹根教授仍然认为,这都不是根本问题,最重要的是牙根膜里有通过牙齿的咀嚼刺激传到大脑起传感器作用的细胞。为了身心的健康利用自己的而非人工制造的牙齿是最理想的。

求采纳

wifgw

石蜡切片免疫组化染色步骤

石蜡切片免疫组化染色步骤

1、载玻片的处理: 抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。为保证试验的正常进行,可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂,对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下:

11 APES:现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中,停留20~30秒钟,取出稍停片刻,再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的APES,置通风橱中晾干即可。用此载玻片捞片时应注意组织要一步到位,并尽量减少气泡的存在,以免影响染色结果。

12 HistogripTM:将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的Histogrip液中,停留1~2分钟,然后用双蒸水快速清洗三次,室温干燥或60oC烤箱烘烤一小时,装盒备用。

13 Poly-L-Lysine:将洗净、干燥的载玻片放入以1:10比例去离子水稀释的多聚赖氨酸溶液中,浸泡5分钟,60oC烤箱烘烤一小时或室温过夜干燥。装盒备用。试验中使用的器具均为非玻璃制品。 2、常用酶消化: 21 胰蛋白酶:一般使用浓度为005%~01%,消化时间为37℃、10~40分钟,主要用于细胞内抗原的显示。

22 胃蛋白酶:一般使用浓度为04%,消化时间为37℃、30~180分钟,主要用于细胞间质抗原的显示,如:Laminin(层粘蛋白),Collagen IV(IV型胶原)等。

g/ml的saponin溶液,消化时间为室温孵育30分钟。 23 皂素(Saponin):一般使用浓度为2~10 3、抗原热修复: 可根据实验室的具体条件,选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液,如TBS、PBS、重金属盐溶液等,但实验证明,以001M枸橼酸盐缓冲液(pH60)效果最好。请选用我公司提供的ZLI-9064 枸橼酸盐缓冲液(粉剂)配制,取该粉剂一包溶于1000ml的蒸馏水中,混匀,其pH值在60 01,如因蒸馏水本身造成的pH值偏差,请自行调整。

31 石蜡切片微波炉抗原修复操作方法:切片脱蜡至水后,3%H2O2处理10分钟,蒸馏水洗2分钟×3。将切片放入盛有枸橼酸盐缓冲液(工作液)的容器中,置微波炉内加热使容器内液体温度保持在92℃~98℃之间并持续10~15分钟(注意:无论是使用医用或家用微波炉,请根据具体机型酌情设置条件,务必满足以上步骤中对温度和时间的要求)。取出容器,室温冷却10~20分钟(注意:不可将切片从缓冲液中取出冷却,以便使蛋白能够恢复原有的空间构型)。PBS洗,下接免疫组化染色步骤。

32 石蜡切片高压抗原修复操作方法:切片脱蜡至水。将1500ml~3000ml的枸橼酸盐缓冲液(工作液)注入不锈钢压力锅中加热至沸腾。切片置于金属架上,放入锅内,使切片位于液面以下,盖锅压阀。当压力锅开始慢慢喷气时(约加热5~6分钟后),计时1~2分钟,然后将压力锅端离热源,冷水冲至室温后,取下气阀,打开锅盖,取出切片,蒸馏水洗后,PBS洗2分钟×3,下接免疫组化染色步骤。

33 石蜡切片电炉煮沸抗原修复操作方法:切片脱蜡至水后,放入盛有枸橼酸盐缓冲液(工作液)的容器中,并将此容器置于盛有一定数量自来水的大器皿中,电炉上加热煮沸,从小容器的温度到达92℃~98℃起开始计时15~20分钟,然后端离电炉,室温冷却20~30分钟,蒸馏水冲洗,PBS洗,下接免疫组化染色步骤。 4、免疫组化染色步骤: (以美国ZYMED公司SP试剂盒为例)

石蜡切片脱蜡至水。

3%H2O2室温孵育5~10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。

蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。

5~10%正常山羊血清(PBS稀释)封闭,室温孵育10分钟。倾去血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。

PBS冲洗,5分钟×3次。

滴加适当比例稀释的生物素标记二抗(1%BSA-PBS稀释),37℃孵育10~30分钟;或滴加第二代生物素标记二抗工作液,37℃或室温孵育10~30分钟。

PBS冲洗,5分钟×3次。

滴加适当比例稀释的辣根酶标记链霉卵白素(PBS稀释),37℃孵育10~30分钟;或第二代辣根酶标记链霉卵白素工作液,37℃或室温孵育10~30分钟。

PBS冲洗,5分钟×3次。

显色剂显色(DAB或AEC)。

自来水充分冲洗,复染,封片。

冰冻切片免疫组化染色步骤

m,室温放置30分钟后,入4℃丙酮固定10分钟,PBS洗,5分钟×3。用3%过氧化氢孵育5~10分钟,消除内源性过氧化物酶的活性。PBS洗,5分钟×2。冰冻切片4~8

免疫组化非特异性染色的消除方法

一、非特异性染色的主要因素

组织的非特异性染色的机理很复杂,其产生的原因主要可分为以下几点:

(1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去

(2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合。

(3)除去检查的抗原以外,组织中还可能存在类属抗原(如Forssman氏抗原),可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。

(4)从组织中难于提纯抗原性物质,所以制备的免疫血清中往往混杂一些抗其他组织成分的抗体,以致容易混淆。

(5)抗体分子上标记的荧光素分子太多,这种过量标记的抗体分子带过多的阴离子,可吸附于正常组织上而呈现非特异性染色。

(6)荧光素不纯,标本固定不当等。 二、消除非特异性染色的方法

消除荧光抗体非特异性染色的方法应根据产生的原因采取适当的方法,常用的方法有以下几种:

(一)动物脏器粉末吸收法

常用肝粉(猪、大白鼠或小白鼠),其次是骨髓粉、鼠脑粉和鸡胚粉等。每毫升荧光抗体中加入肝粉50~100mg,在离心管中充分混匀,在室温中振动2h,4℃中过夜,再搅拌10min,高速离心(3000~15000r/min)30min,1~2次后,即可使用其上清液。吸收一般应在临用前进行,吸收后之荧光抗体保存冰箱中勿超过2周。染色应作吸收前后之比较,吸收时可先用缓冲盐水将组织干粉浸湿,离心(3000~15000r/min)30min,除去上清液,再加入荧光抗体进行吸收,以免消耗过多的抗体。

肝粉或新鲜细胞吸收是一种非特异性的消除方法,对荧光抗体的荧光色素和蛋白都有吸附作用。如检查组织中的病毒抗原时,也可用相同的组织干粉或匀浆沉淀物吸收之。

用脏器肝粉吸收对荧光抗体损失较多,如果根据Hiramotos氏等的方法将组织的20%生理盐水匀浆液,用生理盐水洗2~3次,12000r/min

10min离心沉淀,用其沉淀物吸收其荧光抗体即能完全达到目的,京极方久氏认为这样吸收对荧光抗体几乎没有损失,他们常用此法,效果甚佳,吸收后放置一周左右,用时有必要再吸收一次。

肝粉的制法

(1)将若干只小白鼠或大白鼠放血杀死,取出肝脏,用生理盐水洗2~3次,除去血液,剥掉表面的结缔组织的脂肪。

(2)剪碎,用生理盐水反复洗涤至无血色止,然后再加生理盐水少许,用组织捣碎机或匀浆器作成匀浆。

(3)将肝匀浆装入离心管内(1/3左右),交换地用2~3倍量生理盐水和丙酮反复洗涤各三次,至上清无血色止,每次完毕先用2000r/min离心沉淀15 min后,再除去上清液。

(4)最后用丙酮洗涤肝浆,再用布氏漏斗过滤,或离心沉淀,将沉淀物平铺在洁净的玻璃板上,37℃烤干(过夜)。

(5)在乳钵中充分研磨,用120目铜筛筛选过后,分装,密封,低温干燥保存。

2006-12-22 13:24 wifgw

二)透析法

荧光素如FITC分子可以通过半透膜,而蛋白质大分子不能透过,可将未与蛋白结合的荧光素透析除去。

(1)将标记完毕的荧光蛋白液装入一透析袋或玻璃纸袋内,液面稍留空隙,紧扎。

(2)浸入002mol/pH

71~74的PBS中(悬于大于标记物体积约50~100倍的PBS内),在4℃中透析,每日更换3~4次PBS,约5~7天,透析液中无荧即可(在荧光光源照射下)。

(三)葡聚糖凝胶G-50柱层析法

除游离荧光素可用2×46cm柱层析法,详细方法参阅第二章。加入荧光抗体15~18ml(按床体积的5%~10%加样),使其缓慢渗入柱内,待即将全部入柱时,加入PBS少许,关闭下口,停留30~40min ,使游离荧光充分进入细筛孔中,然后再接通洗脱瓶开始滴入洗脱液。加入洗脱液一定量后,荧光抗体即向下移行,逐渐与存留于上端的游离荧光素之间拉开明显的界线,随着大量洗脱液的不断加入,二者分离距离越来越大,荧光抗体最先流出,分前、中、后三部分收集,测F/P比值,合格者合并,浓缩,分装。洗脱液用20%磺基水杨酸测定蛋白(发生沉淀反应),继续洗脱,游离荧光素则相继被洗脱下来,至洗脱液中无蛋白和荧光素后,此层析柱即可再用。

若用以除去荧光抗体中的游离荧光素和硫酸铵等盐类,可先在过柱前透析一夜,否则,NH4+太浓,在蛋白未完全洗脱时即出现NH4+,因而影响提纯与回收蛋白,一般待洗脱液出现蛋白时,即进行收集,之后出现SO4++(用1%BaCl2检查发生白色沉淀)。最后是NH4+,(用纳氏试剂检查呈黄棕色沉淀),待洗脱液无SO4++及NH4+后可再用。

如仅用小量荧光抗体,可用1×20cm的柱层析柱,取2g Sephadex G-50装柱,即可过滤2~35ml荧光抗体。

(四)DEAE纤维素柱层析法

标记过多或过少荧光素的抗体分子可用DEAE-纤维素柱层析法除去。方法如下: DEAE-纤维素柱的装柱,洗脱、再生方法等与提纯IgG方法相同。装柱所需DEAE-纤维素量以干重每克交换20~50mg标记蛋白量为宜

。常用梯度洗脱法如下:

(1)层析柱用001mol/L、pH72PB平衡,标记物上柱后,先用001mol/L、pH72PB洗脱,洗出无色或淡绿色液体,洗脱液量(根据床体积大小每梯度乘3),然后依下列各种离子强度洗脱液,

分别洗脱和收集:

001mol/L、pH72PBS(005mol/L NaCl)……洗脱部分1。

001mol/L、pH72PBS(001mol/L NaCl)……洗脱部分2。

001mol/L、pH72PBS(002mol/L NaCl)……洗脱部分3。

将此三部分收集液(每管5ml)分别测定其F/P比值,005mol/L NaCl pH72PB洗脱液280nm光密度高峰管合并,浓缩保存备用。因这部分非特异性染色荧光最少,是比较好的荧光抗体。其他两部分可以废弃。

(2)柱上吸附的过度标记蛋白可继续增加NaCl的浓度至

20mol/L洗脱完。

经过DEAE-纤维素层析后的标记抗体,其抗体量一般约损失50%,因此有些要求不太高的抗体,如抗细菌荧光抗体,不一定要这样处理,可用染色效价测定的稀释法除去非特异性染色。

(五)荧光抗体稀释法

先测定荧光抗体特异性染色与非特异性染色的效价,若二者效价相差较大,则可将荧光抗体稀释至一临界浓度,使特异性染色呈阳性,而使非特异性染色保持阴性,稀释方法和染色效价测定方法相同。

(六)纯化抗原法

用各种方法提纯单一成分的抗原是产生单价特异性抗体的最主要条件。近代免疫化学技术(免疫吸收法)和柱层析法等提供了很大的可能性,可参考有关专著。

(七)纯化抗体法---免疫吸收法

例如抗IgA血清的纯化方法---免疫吸收法。如分泌型IgA( SIgA)抗原纯度不高,所制的抗血清常与IgG呈交叉反应,为此需要吸收,常采用纯化的人IgG戊二醛聚合物加以吸收纯化。方法如下:

1.人IgG聚合物的制备 在5ml含40mg/ml人IgG的01mol/L pH70磷酸缓冲溶液中,加入25%戊二醛溶液1ml,边加边搅,5min即出现混浊,逐现大块胶块,放置30min后,用研钵将凝胶磨细,继用10mol/L pH70磷酸缓冲溶液反复洗涤3次,末次加蒸馏水至20ml,即为人IgG聚合物悬液。

2.免疫吸收法 将待吸收的抗SIgG血清加入待量IgG聚合物悬液,置室温搅拌60min,离心沉淀,上清液即稀释1倍的纯化抗SIgA血清。如用IgG聚合物作少量分次吸收,其效果更好。

(八)伊文氏蓝(Evans blue)衬染法

用001%伊文氏蓝的001mol/L pH72PBS稀释荧光抗体,可将背景细胞和组织染色,呈红色荧光,与特异性黄绿色荧光形成鲜明的对比,减少了非特异性荧光,宜作常规应用。伊文氏蓝一般先配成1%溶液,保存于4℃,用前再稀释至001%用以

和然释荧光抗体。

此外,还可以用胰酶消化组织切片或用10%牛血清蛋白封闭法等消除非特异性染色,提高特异性染色。

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