第四代。电化学装置:由两个电极和电解质构成,电化学装置是一种将外界的能量转化为电能并将其储存于其内部,以在需要的时刻对外部电子装置,属于第四代产品,第四代HIV检测方法,是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物。
二氨基对苯二甲酸(EDPA)是一种化学发光底物,可以用于电化学发光(ECL)分析。EDPA在氢氧化钠(NaOH)溶液中具有良好的ECL信号,可以通过与一些金属络合物(如铑或钌络合物)配合使用,在电化学分析中得到强烈的ECL信号。因此,EDPA可以被用作电化学生物传感器及免疫传感器等领域的底物。
C肽电化学发光法测定主要用于胰岛细胞功能的评定。C肽电化学发光法可以评价内源性胰岛素的分泌能力,判断2型糖尿病患者的胰岛功能。测定C肽的方法有电化学发光法、酶联免疫分析法等,目前主要是使用电化学发光法检测,因为此法比其他方法更灵敏、快速、稳定且准确。
化学发光法。
化学发光法准确率比电化学发光法高,目前,检测CCP抗体化学发光法准确率,可以高达864,所以,ccp定性用的化学发光法。
ccp是抗环瓜氨酸肽抗体。是类风湿关节炎的一个高度特异性指标,此项目的开展为风湿免疫病提供了可靠的诊断依据。但单纯的ccp抗体升高不能作为诊断依据,还需借助实验室及其他相关辅助检查。
在化学发光,生物医药实验中,我们通常会遇到荧光探测和收集的问题,在这些实验中发出的光非常非常微弱,那么该如何探测和收集呢?
首先我们需要知道检测内容来确定荧光物质,确定是自发荧光还是激发荧光,如果是激发荧光则需要根据荧光物质的激发特性选择适合的LED(光源)和响应的滤光片组,然后选择合适透镜 搭建光路,把光耦合至光电探测器。
一般情况下光电探测器会有一个响应的光波长范围,比如说300nm-850nm。也就是说这个探测器只能探测这个范围的光波。您需要确定您的实验产生的荧光是不是这个范围。光电探测器的输出一般是mv的模拟信号,也许只有几mv。这个时候 您需要一个采集卡来采集,进行A/D转换,把转换好的数值输出,并保存数据至电脑的文件中,方便您对数据进行二次分析及查看,以及导入第三方软件。
电化学发光,荧光探测专用光电探测器
我们针对荧光探测这种微弱光的探测场景做了一款专用的光电探测器,同时搭载了采集模块跟采集软件。您可以根据您的实验,只需要选择光源(自发荧光不需要激发光源了),把光照到探测器的光敏面即可(可以根据情况选择透镜)。
酶促反应的发光底物
酶促反应的发光底物是指经酶的降解作用而发出光的一类发光底物,目前化学发光酶免疫技术中常用的酶有辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)。HRP的发光底物为鲁米诺或其衍生物和对-羟基苯乙酸。AP的发光底物为3-(2-螺旋金刚烷-4-甲氧基-4-甲基-4-(3-磷酸氧基)-苯基-1,2-二氧乙烷(AMPPD)和4-甲基伞形酮磷酸盐(4-MUP,荧光底物)。
(1)鲁米诺或其衍生物。 鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行,通常以01mol/L pH86Tris缓冲液作底物液。要注意是:首先,鲁米诺和H2O2在无HRP催化时也能缓慢自发发光,而在最后光强度测定中造成空白干扰,因而宜分别配制成2瓶试剂溶液,只在用前即刻混合;其次, HRP发光增强剂如某些酚试剂(如邻-碘酚)或萤火虫荧光素酶可增强HRP催化鲁米诺氧化的反应和延长发光时间,提高发光敏感度。
(2)对-羟基苯乙酸(HPA)。 对-羟基苯乙酸(HPA)在H2O2存在下被HRP氧化或氧化二聚体(荧光物质),在350nm激发光作用下,发出450nm波长的荧光,可用荧光光度计测量。
(3)AMPPD。 AMPPD在碱性条件下,被ALP酶解生成相当稳定的AMP-D阴离子,其有2-30min的分解半衰期,发出波长为470nm的持续性光,在15min时其强度达到高峰,15-60min内光强度保持相对稳定。
(4)4-MUP。 4-MUP被ALP催化生成4-甲基伞形酮,在360nm的激发光的作用下,发出448nm的荧光,用荧光光度计进行测量。
直接化学发光剂
直接化学发光剂不需酶的催化作用,只需改变溶液的pH等条件就能发光的物质,如吖啶酯(acridinium, AE)在有过氧化氢的稀碱溶液中即能发光。
电化学发光剂
电化学发光剂是指通过在电极表面进行电化学反应而发出光的物质。化学发光剂三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+(图16-7)和电子供体三丙胺(TPA)在阳性电极表面可同时失去一个电子而发生氧化反应。二价的[Ru(bpy)3]2+被氧化成三价,成为强氧化剂,TPA失去电子后被氧化成阳离子自由基TPA+,它很不稳定,可自发地失去一个质子(H+),形成自由基TPA,成为一种很强的还原剂,可将一个高能量的电子递给三价的[Ru(bpy)3]3+使其形成激发态的[Ru(bpy)3]2+。激发态的三联吡啶钌不稳定,很快发射出一个波长为620nm的光子,回复到基态的三联吡啶钌。这一过程可在电极表面周而复始地进行,产生许多光子,使光信号增强。
化学发光法是分子发光光谱分析法中的一类,它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量的一种痕量分析方法。
电化学发光分析法具有灵敏度高、仪器设备简单、操作方便、易于实现自动化等特点,广泛地应用于生物、医学、药学、临床、环境、食品、免疫和核酸杂交分析和工业分析等领域。
在21世纪中必将继续为解决人类面临的各种重大问题发挥更加显著的作用。
化学发光与其它发光分析的本质区别是体系产生发光 (光辐射) 所吸收的能量来源不同。
体系产生化学发光,必须具有一个产生可检信号的光辐射反应和一个可一次提供导致发光现象足够能量的单独反应步骤的化学反应。
扩展资料依据供能反应的特点,可将化学发光分析法分为:
1)普通化学发光分析法(供能反应为一般化学反应)。
2)生物化学发光分析法(供能反应为生物化学反应;简称BCL)。
3)电致化学发光分析法(供能反应为电化学反应,简称ECL)等。
根据测定方法该法又可分为:
1)直接测定CL分析法。
2)偶合反应CL分析法(通过反应的偶合,测定体系中某一组份)。
3)时间分辨CL分析法(即利用多组份对同一化学发光反应影响的时间差实现多组份测定)。
4)固相、气相、液相CL分析法。
5)酵联免疫CL分析法等。
-电化学发光
-化学发光法
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