高中生物卡诺氏液作用

高中生物卡诺氏液作用,第1张

作用:

卡诺氏液适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖、花药压片及子房石蜡切片等,有极快的渗透力。

特点:

卡诺氏液的重要特性是能迅速穿透细胞,将其固定并维持染色体结构的完整性,还要能够增强染色体的嗜碱性,达到优良染色效果。

简介:

卡诺氏液有极快的渗透力,根尖材料固定15—20min即可,花药则需1h左右,固定后用95%酒精冲洗至不含冰醋酸为止;如果材料不马上用,需转入70%酒精中保存。

扩展资料

注意事项:

1、卡诺氏液对人体有一定的损害,请小心操作,不宜用于固定脂类染色的组织。

2、实验组织取材的厚度不同,固定时间也不同。 

3、固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。 

4、温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。 

5、取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。

6、操作实验时请穿实验服并戴一次性手套操作。

-卡诺氏液

用于一般植物组织和细胞的固定,组织切片的固定,对人体有害,不可食用,危害大。

Carnoy固定液:固定液的重要特性是能迅速穿透细胞,将其固定并维持染色体结构的完整性,还要能够增强染色体的嗜碱性,达到优良染色效果。单纯的固定液一般难以达到这些要求,因此在实验中使用两种混合的固定液。由于Carnoy首先使用的甲醇和冰乙酸混合液而称其为卡诺氏固定液。Carnoy固定液(甲醇∶冰乙酸=3∶1)每次使用前需临时配制,长时间放置影响固定效果,固定时间15min至24h,冰箱、室温均可。必要时可改变甲醇和冰乙酸的比例,冰乙酸比例增加,利于细胞膨胀、染色体铺展,但易导致细胞破裂、染色体散失。低渗液(hypotonic solution)低渗液是指渗透压和离子强度均低于正常细胞生理条件的溶液,渗透压低于组织液,与外周血混在一起时,水分迅速进入细胞,使其膨胀,甚至破裂,获得分散良好的染色体分裂象。常见的低渗液:水、低渗的柠檬酸钠或氯化钠、甘油磷酸钾(065mol/L)、氯化钾(0075mol/L)等。低渗效果取决于低渗液的化学组成、低渗的温度和处理时间。低渗处理是凭借反渗透作用使细胞膨胀染色体铺展,同时可使黏附于染色体的核仁物质散开,以便能在一个平面上观察所有染色体形态。实验室中一般选用0075mol/L KCl为低渗液,其优点有:①染色体轮廓清楚,可染色性强,染色时间短。②用于显带染色时能充分显示带型特点。低渗处理为37℃,25~30min,以预实验条件为准。Giemsa染液Giemsa原液配制:称Giemsa粉末05g,加几滴甘油研磨,再加入甘油(使加入的甘油总量为33ml)。56℃中保温90~120min。加入33ml甲醇,置棕色瓶中保存。使用时按要求用PBS稀释,一般稀释10倍。

解离液:15%HCl和95%酒精

无水乙醇:

作用:提取色素

70%酒精

作用:医用消毒

卡诺氏液

95%酒精和32%冰醋酸混合

作用:做根尖固定液

DNA的粗提取:至少在5℃以下冷却24 h以上的无水乙醇

是。常用盐酸酒精混合液处理根尖,用改良苯酚品红染液染色,实验中,盐酸酒精混合液的作用是解离,改良苯酚品红染液属于碱性染料,能够使细胞中的染色体着色。卡诺氏固定液适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖、花药压片及子房石蜡切片等,有极快的渗透力。

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