怎样配制母液和培养基?

怎样配制母液和培养基?,第1张

配制培养基是花卉组织培养的首要环节。培养基的成分随着花卉的种类、不同的外植体、不同的培养阶段应当有所不同。一般来说,各种培养基都有大量元素、微量元素、维生素、激素、糖和琼脂等物质,有时还要在培养基里添加有机附加物,如活性炭、香蕉汁、椰子汁等。在生产上,首先选用已有的培养基配方,它是前人研究的成果,又是经过生产实践验证的。现在几乎各种花卉用的营养基配方都有,可以免去您再研究的麻烦,当然在生产实践中,也可适当改进。如果您找不到合适的配方,可先试用MS培养基,MS是Murashige和Skoog的缩写,他们二人于1962年研究出来了这种培养基。下面以MS培养基为例,介绍怎样配制。

(1)配制母液。把培养基中的必需元素按原配方量的50倍、100倍或1000倍称量后制成一种浓溶液,这种浓溶液叫母液。在配制培养基时按比例分别量取母液稀释到所需的浓度即可。母液配好后贴上标签,放在0~4℃的冰箱中,可使用半年到1年,这样做可节省许多时间。可能产生化学反应的或溶解后产生沉淀的,不能放在同一个容器中。配制母液要用重蒸馏水。药物要使用分析纯或等级较高的化学纯。药物的称量和药液的定容都要准确。

母液①:硫酸镁185克,硝酸铵825克,硝酸钾950克。加水定容到1000毫升,浓度为培养基的50倍,配1升培养基时量取20毫升母液。

母液②:氯化钙220克。加水定容到500毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。

母液③:磷酸二氢钾85克。加水定容到500毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。

母液④:乙二胺四乙酸二钠373克,硫酸亚铁278克。加水定容到1000毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。

母液⑤:硼酸620毫克,硫酸锰2230毫克,硫酸锌860毫克,硫酸铜25毫克,碘化钾83毫克,钼酸钠25毫克,氯化钴25毫克。加水定容到1000毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。

母液⑥:肌醇5克,甘氨酸100毫克,烟酸25毫克,盐酸吡哆醇25毫克,盐酸硫胺素5毫克。加水定容到500毫升,浓度为培养基的100倍,配1升培养基时量取10毫升母液。

(2)配制培养基。配制每1000毫升培养基,称取6~10克琼脂作凝固剂,具体按配方要求称量,放在水浴锅上慢慢溶解。先在量筒内放入一定量的水,按照母液顺序和规定量,量取母液。当母液加完后,根据需要每升培养基再加入生长调节物质如吲哚乙酸或萘乙酸等,细胞分裂素类004~10毫克,细胞分裂素应用最多的是6-苄基腺嘌呤,加完后倒入已熔化的琼脂中。每1000毫升培养基加入蔗糖30克或根据要求确定,定容到所需的体积。继续加温,直到琼脂完全熔解。用盐酸或氢氧化钠对培养基的pH进行调节,多数培养基的pH在54~60之间,MS培养基的pH为57。

将配好的培养基趁热倒入培养容器中,培养基占容器体积的1/3~1/4。不要将培养基沾到容器壁上,否则容易被杂菌感染。然后及时加盖,进行高压灭菌,灭菌时要按高压灭菌锅的操作规程使用。在121℃、压力111千帕下维持15~20分钟,温度和时间都要严格控制。到时间后立即切断电源,当高压锅内压力降到常压后,开启放气阀,打开锅盖,取出灭菌好的培养基,放在接种室中培养3天,没被感染后才能用来组织培养。

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(1)CaO+H 2 O=Ca(OH) 2 、Ca(OH) 2 CaO+H 2 O

(2)B  (3)⑤ (4)酸 盐 氧化物 氧化物

浓硫酸是H 2 SO 4 与水的混合物,在物质分类中属于酸;无水氯化钙是纯净物;变色硅胶是SiO 2 和CoCl 2 的混合物;P 2 O 5 是纯净物;碱石灰是NaOH、CaO的混合物。

(1)把生石灰加到浓的烧碱溶液z,再加强热蒸干反应,首先发生:CaO+H2O═Ca(OH)2,然后加热发生Ca(OH)2

  △  
 
CaO+H2O,

故答案为:CaO+H2O═Ca(OH)2,Ca(OH)2

  △  
 
CaO+H2O;

(2)纯净物应只含有y种物质,题z无水氯化钙和五氧化a磷符合,

故答案为:B;

(3)碱性气体不能干燥氯化氢,只有碱石灰不能用来干燥氯化氢,

故答案为:⑤;

(m)浓H2SOm是H2SOm与水的混合物,在物质分类z属于酸;

无水氯化钙是纯净物;

变色硅胶是SsO2和CoCl2的混合物;

P2O8是纯净物;

碱石灰是NaOH、CaO的混合物,其z硫酸属于酸、氯化钙属于盐,a氧化硅、五氧化a磷为氧化物,

故答案为:酸、盐、氧化物、氧化物.

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