Exosome样本是进行有关外泌体的实验的基础,很多童靴认为这是最简单的。如果你真的这么认为,那么就大错特错了。收集样本有不同的要求,一个比一个重要。那该如何去选择我们的实验样本?取样的时候又该注意些什么?分离好后的外泌体又如何保存呢?
一、外泌体样本的选择和注意事项
实验样本不同在收集的时候需要注意的点不同。你研究的是哪种样本,需要特别注意哪些方面呢?看以下阐述:
1、细胞上清
选用细胞培养上清作为分离外泌体的实验材料不会像血样等存在样本量限制的问题,而且操作简单,直接离心即可。但在细胞培养过程中需注意污染、培养时间、细胞死亡率及FBS的问题。和所有的细胞实验一样,培养过程中不允许有污染,但有些培养细胞本身带有病毒基因组,在培养过程中会释放出病毒颗粒,这就要衡量病毒颗粒是否会影响后续实验。
一般培养24-48h后细胞即可分离外泌体,在特殊情况下,如在培养基中添加特殊的化学物质,培养15-60min即可收集。因细胞死亡会分泌小体,所以在研究外泌体时细胞的死亡率一定要控制 5% 之内。未经处理的FBS中含有大量的外源外泌体,所以细胞培养一定要用经过处理不含外泌体的FBS。
2、唾液
唾液的成分会因取样的位置和时间不同而不同,所以同血样一样需定点定时。唾液主要由舌下腺,颌下腺及腮腺3个腺体分泌,所以不同位置的唾液成分不同,在收集的时候需固定位置或是收集所有的唾液。不同时间段的唾液成分也会不一样,所以也需定时取。其他如吸烟进食都是禁止的,一般建议采样1h之内不能有进食行为,包括饮料,且不要剧烈运动,在平息状态下取样。最后一点,不能刷牙。
3、血液
在第一次外泌体课程的时候,就有许多同学问到关于血清和血浆选择的问题,那到底应该选哪个呢血浆=血液-血细胞 血清=血浆-纤维蛋白原-凝血因子
分不清楚两者的弄清血清的来源就能牢牢记住啦。血清是血液凝固之后收集的液体,所以其中少了纤维蛋白原,凝血因子,以及多了很多凝血产物。纤维蛋白原可转化为纤维蛋白,具有凝血功能。在凝血过程中血小板会分泌大量的外泌体,有研究发现血清中有接近50%的外泌体来自额外的分泌。所以一般实验选择血浆,在特殊情况下,如研究与血小板相关的疾病的时候,当然是血清更适合。
受限于样本,血样一般取2ml。那取血样的时候有什么注意的地方呢?在外泌体的血样研究中,经常被忽略的一个问题就是针头的大小。在抽血过程中,血液流经针头的时候会产生剪切力,若针头太细,剪切力较大,会使细胞破碎或刺激血小板分泌外泌体,从而影响后续的实验。有些文献报道21号针头的大小比较合适作为外泌体研究的血样收集。其他诸如采血的位置,人的生理周期,饮食周期及时间周期(24h)等都会影响样品中的外泌体。所以取样的时候尽量定点定时。最后还需注意,尽量在采血30min内处理样本,因血液收集在收集管中时,血细胞和血小板还会分泌外泌体。
4、鼻涕
研究鼻涕有一个特殊的价值,其可以探索治疗性外泌体。啥是治疗性外泌体?在脑部的疾病治疗中,药物可以外泌体的方式注射到鼻腔,这样药物就可以避开血脑屏障。鼻涕的收集与许多环境因素相关,如年龄、季节、性别 、城市、过敏史及职业风险。鼻涕的收集方法没有统一标准,只需保证所有样本取样方法一致即可。
5、尿液
在尿液的取样中,除性别、年龄、进食等影响外,还有一个特殊的点即是尿液的新鲜程度,这个新鲜度指的是尿液在膀胱中存在的时间。
6、乳汁
乳汁中存在的外泌体、抗体等会影响新生儿的发育,具有较大的研究价值。泌乳的阶段、 胎次、膳食、泌乳量、是否是母乳喂养、母亲的健康状态、精神状态等都会影响外泌体的分泌。需要注意的是乳汁中含有大量的脂蛋白,会对后面分离外泌体产生影响。
7、脑脊液
脑脊液研究面临的困难主要在样本的获取及样本中外泌体丰度少,有木有一种雪上加霜的感觉。那这个问题如何解决?国外可购买商业正常样本或者使用其他疾病样本作为对照。
二、外泌体的保存
对于外泌体的保存,和其他分子样品一样,提取的外泌体低温保存即可,短时间(一周之内)可放4度,长时间放-20或-80。也有人认为放4度更好,怕低温冻融会影响外泌体的完整性,但目前还没有一个定论,而且大部分文献认为没有影响。那到底放几度呢?有一招,分装放-20或-80,是不是妥妥的。
问题一:大便干燥喝什么茶 不一定要喝茶的,如果你十分喜欢喝茶那就喝绿茶吧,里面多放一些金银花和白菊花吧,如果您愿意采纳我的意见,那就在每天起床以后,倒上一杯白开水,洗涮后趁热,一口气都喝了,重要的是坚持,如果您照我说的做,不出一个月就会好的,空腹喝水是起到一个清理肠道的作用而且这个办法是对人体最健康无害办法,平时上班的时候也要多喝水,少吃一些油腻的东西,多吃蔬菜,希望您能有一个良好的生活习惯健康生活
问题二:秋天干燥喝什么茶好 大麦茶,红茶,花果茶都可以的
问题三:秋天干燥最好喝什么茶 那么
呢下面就做一详细介绍。
饮茶讲究四季有别,有夏饮绿,冬饮红,一年到头喝乌龙的说法。夏季推荐饮用绿茶,绿茶性味苦寒,可以清热、消暑、解毒、止渴、强心。但对于喜爱选购冰镇茶饮料的消费者,以及女性与胃寒的消费者,建议以乌龙茶为佳。
秋天天气干燥,燥气当令,常使人口干舌燥,宜喝乌龙、铁观音等青茶。青茶性适中,介于红、绿茶之间,不寒不热,适合秋天气候,常饮能润肤、益肺、生津、润喉,有效清除体内余热,恢复津液,对金秋保健大有好处。青茶汤色金黄,外形肥壮均匀,紧结卷曲,色泽绿润,内质馥郁,其味爽口回甘。
进入秋季饮食应以清淡为主,油腻的食物可以配茶食用,茶中又以大麦茶与乌龙茶较为适宜。特别是喜爱吃麻辣食物的食客们,可以选购不同口味的冰镇乌龙或大麦茶去热降火,如韩式大麦茶、乌龙茶等。因为,乌龙茶中的茶多酚能吸附油脂排出体外,还含有脂酶能够分解油脂,因此乌龙茶有能够溶解脂肪的说法。
秋季也是黑色素沉淀的高峰期,女孩子脸上的斑点也是度假结束后最扰人的烦恼之一。
问题四:天气比较干燥,应该喝什么茶比较好 绿茶好 是所有茶叶中抗辐射最厉害的。受到核辐射后,幸存者喝绿茶的抗辐射能力强的多。而不喝的受辐射就厉害。建议常用电脑的人喝绿茶。茶叶可以去火,调解内分泌。喝茶就绿茶而言,早春的高档茶叶,完全没有农残的。 对于天气干燥引起的缺水,可以根据自己爱好自由选择,只要是茶水都能补充水份。
问题五:秋冬季节干燥上火,喝点什么茶 秋天气候干燥、凉爽,日照时间减少,气温逐渐下降,由于气候变化对人体的影响,毛发脱落增多、汗水分泌减少、口苦咽干、皮肤干燥和皱纹增多等现象。
建议喝点花茶:如金花茶、菊花茶、金银花茶等。金花茶在民间被用于清热解毒、利尿利湿、止痢和止血等,很适合秋冬季节饮用。更多详情请关注国茗金花茶,公众号:gmjhc123
问题六:冬天皮肤干燥 喝什么茶对皮肤好 多喝水,纯水喝不下去可以泡蜂蜜。喝茶之类的效果不明显的,毕竟也不能喝太多,只能当做长期的调理,还不一定能坚持喝下去。
一定要用补水保湿的产品。内外一起补。
问题七:喝什么茶叶能防止喉咙干燥 绿茶,菊花茶
问题八:嘴唇干燥起皮喝什么茶? 1、乌龙茶
属半发酵茶,介于绿、红茶之间,色泽青褐,因此又得名“青茶”。在味道上,乌龙茶既有绿茶的清香和天然花香,又有红茶醇厚的滋味,不寒不热,温热适中,因此有润肤、润喉、生津、清除体内积热的作用,可以让机体适应自然环境的变化。而冬天里室内大多空气干燥,人们容易口干舌燥、嘴唇干裂,这时泡上一杯乌龙茶,可以缓解干燥的苦恼。此外,乌龙茶对蛋白质及脂肪有较好的分解作用,能防止肝脏脂肪堆积。
2、花茶
种类包括茉莉花茶、玉兰花茶、桂花茶、玫瑰花茶等,是以绿茶为茶坯加入不同香花熏制而成的。一般来说,花茶可以养肝利胆、强健四肢、疏通经脉。以茉莉花茶为例,可以清热解暑、健脾安神,对治疗痢疾和防止胃痛有良好效果。而金银花茶则可以清热解毒、提神解渴,并对咽喉肿痛等有较为理想的疗效,对预防流感效果亦佳。因此在冬季不妨适当选择,
问题九:冬天皮肤干燥喝什么茶比较好 以季节来分饮茶,根据不同茶类的特性,一般冬季宜喝点花茶、红茶及乌龙茶、铁观音等青茶。因为冬季气候寒冷、气候干燥,尤其是北方地区,冬季室内有暖气、易干燥,人们常感到口渴、咽干、皮肤干燥等。因此,人们需要通过多喝水或喝茶水来补水防皮肤干燥。冬季喝上一怀热茶,还可以驱寒暖身。
花茶是指用茶叶和某种鲜花拼和窨制而成的再加工茶。如我国常见的花茶,茉莉花茶;北方人尤为喜爱,《本草纲目》载其:“辛热无毒”,可“蒸油取液,作面脂光泽,长发润燥香肌”。而且具有使平滑肌收缩和降血压等药理作用,对冬季预防心血管疾病有特殊功能。茉莉味辛甘、性温,能帮助胃的式消化吸收、缓和胃痛,对腹泻腹痛有很好的疗效。以茉莉花茶素有胃部保护茶之称。秋冬季后因寒冷、夜长昼短等原因,人易得“季气性情绪失调(SAD)”,即抑郁症。茉莉具有安定精神的效果,可以认人情绪镇定、舒缓紧张、心情清新、舒畅。尤其是女性在更年期及经期前后容易心情抑郁,性情烦燥,不妨用喝花茶的方法来消解郁闷。茉莉花茶具有:茶味花香交融一体,既有花的芳香,又有茶的功效。品质以“伏花”窨制的香气最为鲜灵、浓郁,清雅芬芳,滋味甜美、沁人心脾,秋冬季尤宜妇女饮用,既补水润肤又防干燥和安神。
青茶类(习称乌龙茶)具有红、绿茶的优点,既有红茶的色香,又有绿茶爽口感,但没有绿茶的苦味和红茶的涩味,茶味 性小、醇平,如铁观音其香气如空谷幽兰,清高隽永,灵妙鲜爽;汤色浓铯清澈,滋味醇厚甜鲜,蜜底甜香,回味无穷,耐冲泡,俗称“七泡有余香”。尤其是“秋香”品质,特别适合秋冬季饮用。此外,乌龙茶对蛋白质及脂肪有较好的分解作用,能防止肝脏脂肪堆积,对于怕冬季里贴膘的人来说,青茶也有一定的减肥功效。
冬季适宜喝红茶,红茶是一种发酵茶,通过红茶的特殊工艺而成为特有的色、香、味的品质特征。红茶富有更多的咖啡碱,有提神利尿、可以帮助胃肠消化、促近食欲,消除水肿,强壮心肌,预防辐射造成皮肤癌等功效。红茶性温和, 性小,特别适合肠胃和身体比较虚弱的人。红茶具有红色红汤特点,给人以温暖的感觉,冬季饮用有和胃、暖身效果显著。在茶汤中加奶和糖冲饮,有助于消炎和保护胃黏膜,既养胃、又滋补。(茶道中仁^^ 编)
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