这是毛细管色谱柱常用的表示规格的方式,柱长15m,内径025mm,固定相涂层液膜厚度025um
常用的色谱柱柱长15m,30m,60m,内径01mm、025mm、032mm、053mm,液膜厚度01um、025um、05um、10um
建立色谱柱使用管理规程。根据查询人人文库网显示,色谱柱使用管理规程的目的是:建立色谱柱使用管理规程,适用于仪器分析(HPLC、GC)前对检测条件适用性的确认和HPLC分析结束后对色谱柱的清洗。
液相色谱柱就填料来说,可分为C18、C8
、氰基 等反相柱以及硅胶等正相柱,其中以C18和硅胶柱最常用;
就粒径来说有5u、3u、17u等,又以5u最为常用; 就长度来说大致可以分为:
50 、100、150、200、250、300等多种规格,其中150和250mm两种规格是最常用。
什么是液相色谱的色谱柱?
液相色谱法就是用液体作为流动相的色谱法。
原理和分类
液相色谱法的分离机理是基于混合物中各组分对两相亲和力的差别。根据固定相的不同, 液相,色谱分为液固色谱、液液色谱和键合相色谱。应用最广的是以 硅胶为填料的液固 色谱和以微硅胶为基质的键合相色谱。根据固定相的形式, 液相 色谱法可以分为 柱色谱法、纸色谱法及 薄层色谱法。按吸附力可分为吸附 色谱、 分配色谱、 离子交换色谱和 凝胶渗透色谱。近年来,在 液相柱 色谱系统中加上 高压液流系统,使 流动相在高压下快速流动,以提高分离效果,因此出现了高效(又称高压)液相 色谱法。
柱色谱的分离原理
所用色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装有吸附剂。色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱时的流速,均按各单体中的规定。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果,除另有规定外通常多采用直径为007-015mm的颗粒。
1、色谱分离技术又称层析分离技术或色层分离技术,是一种分离复杂混合物中各个组分的有效方法。它是利用不同物质在由固定相和流动相构成的体系中具有不同的分配系数,当两相作相对运动时,这些物质随流动相一起运动,并在两相间进行反复多次的分配,从而使各物质达到分离。
基本内容:
吸附剂的填装干法:将吸附剂一次加入色谱管,振动管壁使其均匀下沉,然后沿管壁缓缓加入开始层析时使用的流动相,或将色谱管下端出口加活塞,加入适量的流动相,旋开活塞使流动相缓缓滴出,然后自管顶缓缓加入吸附剂,使其均匀地润湿下沉,在管内形成松紧适度的吸附层。
操作过程中应保持有充分的流动相留在吸附层的上面。湿法:将吸附剂与流动相混合,搅拌以除去空气泡,徐徐倾入色谱管中,然后再加入流动相,将附着于管壁的吸附剂洗下,使色谱柱表面平整。
1、主要是硅胶柱。
2、色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。
3、色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。
4、色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。
5、色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7,10μm等,柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效;对于同系物分析,只要500即可;对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子,因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。
6、柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到最佳效率,除柱外死体积要小外,还要有合理的柱结构(尽可能减少填充床以外的死体积)及装填技术。即使最好的装填技术,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的,靠近管壁的部位比较疏松,易产生沟流,流速较快,影响冲洗剂的流形,使谱带加宽,这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。在一般的液相色谱系统中,柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。
25046mm色谱柱柱体积为42ml,新色谱柱平衡至少用10倍体积的流动相,以1ml/min的流速需要平衡42min。
色谱柱规格:
填料:常见的C18、C8、氰基柱、苯基柱、氨基柱等等
规格:这些数据通常写在一起。比如5um,46mm250mm。其中5um是填料的孔径。46mm是柱子的内径,250mm是柱长。通常柱长就是50mm、100mm、150mm、250mm几种。而柱子的内径大多都是46mm。所以色谱柱的体积,就是314 23 23 250 了,πrrh。
扩展资料:
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类,尺寸规格也不同:
①常规分析柱(常量柱),内径2~5mm(常用46mm,国内有4mm和5mm),柱长10~30cm;
②窄径柱(narrow bore,又称细管径柱、半微柱semi-microcolumn),内径1~2mm,柱长10~20cm;
③毛细管柱(又称微柱microcolumn),内径02~05mm;
④半制备柱,内径>5mm;
⑤实验室制备柱,内径20~40mm,柱长10~30cm;
⑥生产制备柱内径可达几十厘米。柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定,目的是为了避免管壁效应。
-色谱柱
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