这个在书上都有!考察的知识是蛋白质用不同方法解离的产物有什么特点。
酸解离会打开所有肽建,但同时也会打开所有酰胺键,意味着谷氨酰胺和天冬酰胺会变成谷氨酸和天冬氨酸,所以产物最终只有18种。
sanger法的DNFB可以抓到游离的氨基,所以事实上是告诉你N端的第一格氨基酸。
那么接下来涉及到酶,
1胰蛋白酶属肽链内切酶,能把多肽链中Lys和Arg残基中的羧基侧切断。
2胰凝乳蛋白酶(亦称糜蛋白酶)属肽链内切酶,主要切断多肽链中的芳香族氨基酸(Phe、Trp、Tyr)残基的羧基一侧。
3羧肽酶(分A和B型),一般的题目中没有特别指明的话就是两种类型的功能都具备,可以从羧基端切除氨基酸(若羧基端的第1个或第2个氨基酸为Pro的则不能切除)。 4溴化氰处理,专一性的切割甲硫氨酸羧基端的肽键,然后甲硫氨酸变成高丝内酯。
根据最后一个条件,可以定位成(从N到C)ala-…………Met-(切割位点)-Leu-phe
根据胰蛋白酶处理结果,可以定位成ala-THr-Arg-(切割位点)-Val-……(你拍照把这个题目没有拍全哦,不过不影响大神我发挥)然后把这两个序列贴合到一起,可以得到
ala-thr-arg-val-……-met-leu-phe,现在还剩下一个val,所以填到省略号上,
ala-thr-arg-val-val-met-leu-phe,然后看看是不是符合题意?
关键要准确记忆不同处理方式的处理结果!
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