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细胞培养中血清的作用
提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物
2 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力
3有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用
4是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源
5起酸碱度缓冲液作用
6提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害
胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。显然，胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。AlphaCell——RWD澳洲进口胎牛血清生产工艺如下图，生产程序和设备经过严格的审核。采用世界先进的除菌过滤系统——先粗过滤后，再通过三个连续的01μm大小的孔径过滤器精过滤。确保血清无支原体、细菌等污染。生产过滤系统为仅一次使用，绝不重复利用，极大降低污染风险。国内的话，瑞沃德有在代理，口碑不错的
任何做过哺乳动物细胞培养的人都知道典型的细胞培养基配方：1瓶DMEM，10%的血清，其他一些成分，混合一起用于培养细胞，保持其活力。那么，这些成分分别都有什么功能呢？
1 能量来源
每一个生长培养基都需要碳源，以供细胞新陈代谢。碳源通常是葡萄糖，但也可以是其他糖类，如半乳糖、己糖、果糖或其他碳源(如丙酮酸，谷氨酰胺)。葡萄糖通常以终浓度为55 mM的含量添加，大约等于人体血液中的葡萄糖水平。然而，你可以购买葡萄糖浓度变化范围很广的培养基来满足你的具体需求。你甚至可以购买不含葡萄糖的培养基，然后自己定制浓度，模拟高糖的糖尿病状况，或者研究低糖应激反应。
2 缓冲液
细胞需要一种特殊的pH值从72到74，否则它们无法最好地发挥细胞功能，以供生长和存活。在二氧化碳含量较高的培养器中，二氧化碳与水发生反应，产生氢离子，使培养基酸化。为了中和二氧化碳产生的酸度，并在培养基中保持最佳pH值，大多数培养基都使用化学缓冲系统。然而，一些缓冲方法会干扰细胞生长。
哺乳动物细胞最常见的缓冲系统是碳酸氢钠，生物影响最小。碳酸氢钠与氢离子反应生成二氧化碳，隔离它们以保持pH值。然而，碳酸氢钠的一个缺点是，它在生理pH值上不是最佳的缓冲效果。为了避免这个问题,研究人员经常使用替代品，如HEPES，增加某些培养基类型的缓冲能力。
3 酚红
由于维持pH值对细胞培养至关重要，许多培养基配方包括一种名为酚红的pH指示剂，其在酸性条件下变黄(< 68)，在基本条件下呈粉红色(> 82)。虽然通常不是问题，但酚红可以模拟雌激素，因此，当培养表达雌激素受体的细胞类型时，通常被排除在外。没有酚红的培养基可以用于比色测定，如MTT细胞增殖实验，苯酚的色谱可能会干扰光谱光度测量的读数，从而使结果混淆。
4 血清
对许多培养体系来说，一个重要组成部分是血清，通常是胎牛血清，称为FBS。血清来自于血液，是糖、盐、脂类、生长因子等许多成分的混合物。由于它的生物来源，很难维持再生性，因为每一批血清都是独一无二的。为了规避这一问题，一些实验室使用化学定义的血清替换物，一些实验室则购买一整批次的特定的血清，以确保一致的结果。
5 代谢物，维生素和矿物质
DMEM的成分列表主要分为三大类：氨基酸、维生素/辅因子和无机盐(包括钙和镁)。许多这些成分在所有细胞培养基中都是常见的，而精确的组合和浓度已经对细胞生长进行了优化。尽管如此，许多实验室还是选择用额外的非必需氨基酸补充他们的培养基，以防止细胞使用葡萄糖或谷氨酰胺来合成。此外，一些公司生产无镁和钙的培养基用于特定的研究，选择时请仔细查看。
6 抗生素
很多实验室都在他们的细胞培养中加入抗生素，以防止不需要的细菌或真菌的生长，即使是无菌工作。最常用的抗菌补充剂是青霉素和链霉素(pen / strep)的组合，在完整细胞培养基中，终浓度为青霉素50-100 IU/ mL和链霉素50 -100 g/ mL。然而，一些实验室选择不使用抗生素，因为抗生素会对细胞产生不必要的影响，或者可以掩盖低水平的细菌污染。根据需要，你可以决定是否在培养基中使用抗生素。
细胞培养基1640和DMEM是有区别的，区别如下：
1、成分不同。
1640培养基含有10%胎牛血清。DMEM培养基是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基。
2、用途不同。
1640培养基主要用于悬浮细胞培养。可适用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养。DMEM培养基适用于贴壁细胞生长，如各种实体瘤贴壁细胞。
3、培养方式不同。
1640培养基是日常细胞培养最常用的培养液，含有细胞培养所需的基本营养成分。DMEM培养基是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量，同时又分为高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长，适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。
扩展资料：
对于日常的肿瘤细胞株而言，大多数两种培养液都是可以的，但是有一点，就是在同一个细胞株中间不要频繁的切换两种培养液，因为毕竟两种培养液的成分有不同，在切换的过程中细胞有一个适应的过程。
绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。
而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规含有无机盐和代谢添加剂（例如核苷酸）。MEM/F12 这两种培养基各取1/2，形成神经生物学最通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM，现应用于快速生长的细胞，同MEM含有相同的营养成分，但浓度高出2~4倍。
-RPMI-1640培养基
-DMEM培养基
细胞培养的各种各样的人工培养基可以分为以下四种类型：
含血清的培养基：胎牛血清是动物细胞培养基最常见的补充成分。它用来作为一种成本相对较低的补充成分，提供动物细胞培养最佳的培养基。这些补充剂能够为不稳定或不溶于水的营养物质提供载体或螯合剂，提供激素和生长因子，蛋白酶抑制剂，并结合并中和有毒部分。
无血清培养基：培养基中含有血清存在有很多缺点，可能会成为免疫学研究中潜在的严重误解的原因。为了克服使用血清的这些缺点，一些无血清培养基中已经开发出来了。这些培养基通常是专门配制的，用以单一类型细胞的培养，包含确定量的纯化的生长因子、脂蛋白和其它蛋白质，而这些物质本来是由血清提供的。这些培养基也被称为“确定的培养基”，因为这些培养基中的物质是精确可知的。
确定化学成分的培养基：这些培养基包含无污染的超纯无机和有机成分，也可能含有纯蛋白质添加剂，如生长因子。这些成分通过基因工程细菌或酵母生产，添加维生素、胆固醇、特定氨基酸和脂肪酸。
无蛋白质培养基：无蛋白质培养基含有任何蛋白质，仅包含用于细胞培养所必需的非蛋白成分。相比血清培养基，无蛋白培养基促进较好的细胞生长和蛋白表达，并有利于下游的表达产物纯化。MEM，RPMI-1640等配方不含蛋白质，需要时可补充蛋白质。 不同类型的天然和人工培养基在表一中介绍。
一、外观
拿到血清，最先接触的是血清外观，对于缺少细胞培养经验的人来说，外观的判断尤为重要
1、颜色
根据血红蛋白含量的不同，胎牛血清可表现出**或红色，我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl，实际上，血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响，这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度，良好的操作能降低血清的溶血。
国产血清的采血点很分散，大多是由屠户采血后马上离心收集，所以很少会有溶血，表现出明亮的蜡**，当然，国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。
进口胎牛血清或多或少总有点溶血，因为真正的胎牛血清凝血功能差，红细胞容易破裂。
总的来说，国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清，质量最好的呈现出谈黄、微红色，差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然，热灭活血清或保存不当的血清，由于血红蛋白的破坏氧化，会呈现出暗红，甚至咖啡色。
2、沉淀
很多血清客户，会发现进口血清有沉淀，从而怀疑血清的质量问题，这是没有根据的。
血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生，对血清质量没有任何影响，沉淀的产生原因很多，和厂家的加工生产方式密切相关。
国产的血清，大多来自北方，由于价格低廉，保存环境都不好，从采血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融，每次冻融过程，就会析出部分纤维蛋白沉淀，这样，血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”，很少有沉淀产生。
进口的胎牛血清，过滤分装前很少会反复冻融，生产后的成品也是清澈的，但随着时间的推移，血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。当然，进口的新生牛血清，一般牛龄都在2周左右，血清中的各种蛋白含量明显偏高，生产后血清可能会浑浊，甚至有大量沉淀。
当然，购买回来的血清都是冰冻状态，使用时需要融化，融化过程最好在温度较低的状态下慢慢进行，否则沉淀相对较多，虽然沉淀并不直接影响血清的质量，但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
3、澄清度
进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低，表现为稀薄、清淡，而国产血清，因为绝大多数是新生牛血清，相对而言更加粘稠，颜色略深，这对于初步接触血清的人很难判断，但把两者进行对比，可容易分辨。
二、主要技术指标
目前国内血清的质量标准是2005版的《中华人民共和国药典》，主要指标有以下几点：
1、内毒素
标准为不高于5EU/ml。内毒素是细菌破碎后细胞壁的成分，因此内毒素含量的高低可表现出采血到生产一系列过程中的无菌操作情况。目前，国产血清基本都能达到这一要求，很多进口胎牛血清内毒素含量反而更高，只要求不高于50EU/ml，高出我国标准10倍。可见，内毒素含量偏高不影响质量，除非含量极高，预示着已经污染。
2、总蛋白含量
胎牛血清一般范围是30-40mg/ml，数值偏高，说明采血的牛龄偏大，不是胎牛，数值偏低，表明血清可能掺水了。
3、血红蛋白
标准为不高于20mg/dl，颜色越红，数值越高，反之，数值越低。
4、pH
国产血清，大多高于75，进口胎牛血清，大多低于75，具体原因未知，可能和牛龄有关，这也能用来初步鉴别血清的来源。
5、微生物
包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等。随着国内血清厂家生产条件的改善提高，细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制，支原体经过01um过滤，大多也能清除。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的，主要是生产环境过程中带入，又无法过滤，很难彻底清除，但对血清质量影响不大。病原性病毒，特别是BVDV，在国产血清中几乎90%以上都存在，这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一，而进口胎牛血清中基本都控制的很好。
6、免疫球蛋白
国产血清的只是定性检测，结果也很不准确，进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能完全体现出采血的时的牛龄情况，国产血清，基本都是新生牛的，血清中容易产生IgM，IgG的含量也偏高，进口胎牛血清，不含IgM，IgG的含量也较低。
7、其它
不管是国产还是进口血清，都是不测抗生素的(无四环素胎牛血清除外)。国外，抗生素的使用很严格，用量也很少，每头奶牛的产品包括血清都可以溯源的，因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量极低;国内，抗生素的滥用已成了普遍现象，血清中残留很高，对细胞培养极为不利，这是国产血清质量差的根本原因。
你好，很高兴为你解答：
动物细胞培养必需的溶液
平衡盐水（BSS）：Hanks 液和Earle液是常用的BSS基础溶液。PH调整液：37%、56%、74%的NaHCO3溶液、HEPES溶液（二羟乙基哌嗪乙烷磺酸）
细胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、胶原酶溶液。
抗生素溶液：
1)青、链霉素，每毫升培养液含100U青霉素和100ug链霉素。
2)卡那霉素：终浓度为50ug/ml培养液。
3）制霉菌素：浓度25U/ml，小瓶分装，每瓶一次用完。
常用的动物血清主要有牛血清和马血清。牛血清分为胎牛血清和犊牛血清，前者来源少，价格高；后者要求刚产下尚未哺乳的小牛，因为哺乳后的小牛血清中可能含有更复杂的成分。血清中已知的成分主要有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等。蛋白质主要是白蛋白和球蛋白。
氨基酸是细胞合成蛋白质的基本成分，氨基酸中有12种是细胞本身不合成的，必须由培养液提供。激素有胰岛素、生长激素和多种生长因子如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、增殖刺激因子(MSA)、类胰岛素生长因子(IGFl、IGF2)等。
水解乳蛋白、胶原是另外两种较好的天然培养基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解产物，呈蛋**粉末状，富含氨基酸。一般配制成0．5%溶液，微酸性。胶原是从动物真皮中提取的，具改善细胞表面特性促使其附着生长的作用。
合成培养基
1951年厄尔开发了供动物细胞体外生长的人工合成培养基(MEM)。合成培养基的种类相当多。合成培养基成分已知，便于对实验条件的控制。但与天然培养基相比，有些天然的未知成分尚无法用已知的化学成分所替代，因此，细胞培养中使用的基础合成培养基还必须加入一定量的天然培养基成分，以克服合成培养基的不足。最普遍的作法是加入小牛血清。
动物血清成分复杂，各种生物大小分子混合在一起，有些成分至今尚未搞清楚。血清对细胞生长很有效，但后期对培养产物的分离、提纯以及检测造会成一定困难。另外高质量的动物血清来源有限，成本高，限制了它的大量使用。
无血清培养基不加动物血清，在基础培养基中加入细胞生长有效因子，激素等。
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