1斐林试剂,由质量分数为01 g/mL的氢氧化钠溶液和质量分数为005 g/mL的硫酸铜溶液配制而成的。它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀。因此,斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否
2班氏试剂是斐林溶液的改良试剂,它与醛或醛(酮)糖反应生成Cu2O砖红色沉淀。是由硫酸铜、柠檬酸钠和无水碳酸钠配置成的蓝色溶液
3双缩脲试剂,双缩脲试剂可以验证蛋白质的存在。 先将质量分数为01 g/mL的氢氧化钠溶液加入组织样液,振荡均匀,再加入质量分数为001 g/mL的硫酸铜溶液,振荡均匀。
4苏丹III,可以将脂肪染色为橙**;苏丹IV,可以将脂肪染成红色
5健那绿,可以将线粒体染成绿色
6吡罗红,可以将RNA染成红色
7甲基绿,可以将DNA染成绿色
8龙胆紫,可以将染色体染成紫色
9碘酒,可以将淀粉染成蓝色
10醋酸洋红,可以将染色体染成红色
我没写出配置方法的试剂,在实验室中都是现成的不需要配制
苏丹Ⅲ溶液的配制
称取01
g苏丹Ⅲ干粉,溶于100
mL体积分数为95%的酒精中,待全部溶解后再使用。苏丹Ⅳ溶液的配制
称取01
g苏丹Ⅳ干粉,溶于50
mL丙酮中,再加入体积分数为70%的酒精50
mL,充分混合后即可使用。 苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘**,苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。因苏丹Ⅳ染液与脂肪的亲和力比较强,所以,染色的时间应比较短,一般为1
min左右
1、斐林试剂
配制:1)甲液质量浓度为 01g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml
2)乙液质量浓度为005g/ml,取5gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml
临用时将甲、乙液等量混合
作用:鉴定还原性糖:C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等
还原性糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等
2、班氏尿糖定性试剂
配制 :称取174克无水硫酸铜(CuSO4)溶解于100毫升热蒸馏水中,冷却后,稀释到150毫升称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠(Na2CO3)100克,加蒸馏水600毫升,加热使之溶解,冷却后,稀释到850毫升把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中,搅匀后即为班氏尿糖定性试剂用细口瓶贮存备用(为了防止氢氧化铜沉淀的生成,故加入柠檬酸钠柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂,它能与铜离子形成可溶性络盐)
使用方法同斐林试剂,所不同的是班氏试剂可长期使用
3、双缩脲试剂
配制:A液:质量浓度为 01g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml
B液:质量浓度为001g/ml,取1gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml
使用时,先加A液,后加B液
作用:鉴定蛋白质,蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可产生紫色反应也可用于鉴定多肽
4、苏丹Ⅲ
配制:取01g苏丹Ⅲ,溶解在20ml95%酒精中
作用:鉴定脂肪,脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘**(或被苏丹Ⅳ染成红色)
5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液(1:1)
作用:用于洋葱根尖的解离,即使组织中的细胞相互分离开来能杀死细胞固定
6、质量浓度为001g/mL的或002g/mL龙胆紫溶液(或醋酸洋红溶液)
配制:是将龙胆紫溶解在质量分阶段数为2%的醋酸溶液中配制而成
作用:使细胞核内的染色体着色,便于观察
7、质量浓度为03g/ml的蔗糖溶液
作用:观察成熟植物细胞质分离时用经此处理细胞仍具活性
8、质量浓度为01mg/ml的亚甲基蓝溶液
配制:将亚甲基蓝溶于蒸馏水中配制而成
作用:(1)用于观察根对矿质元素离子的交换吸附观察;
(2)用于检测水中细菌情况,根据亚甲基蓝褪色情况,判断水质被细菌污染情况
是活体染色剂
9、丙酮
是有机溶剂,在叶绿体中色素提取时,用于溶解叶绿体中的色素可用酒精替代,不过提取色素时将绿叶放入酒精中隔水加热
10、层析液
配制:由20份石油醚(在60~900C下分馏出来的)、2份丙酮和1份苯混合而成是一种脂溶性很强的有机溶剂,叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同:溶解度高的随层析液在滤纸上扩散很快;溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢
代用品:93号汽油、四氯化碳
11、SiO2、CaCO3
加入少许SiO2是为了研磨得充分;加入少许CaCO3是为了防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏
12、碘液
配制:取2gKI ,溶解在5ml蒸馏水中,再加1gI,待溶解后用蒸馏水稀释至300ml溶液在光亮处容易变成紫色,必须保存在暗色玻璃瓶里
作用:用来测定淀粉,淀粉遇碘后,形成紫色的复合物
13、二苯胺
配制:称取15g二苯胺,溶于100mL冰醋酸中,再加15mL浓硫酸,用棕色瓶保存临用前,在10mL的上述溶液中再加入01mL体积分数为02%的乙醛溶液
作用:DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色
14、NaOH:用于吸收CO2(验证光合作用需要CO2)或改变溶液的pH,
15、Ca(OH)2:鉴定CO2(验证呼吸作用产生CO2)
16、NaHCO3:提供CO2等
没有。
氨基黑染色液主要成分是氨基墨10B,氨基墨10B作为一种安全无毒、反应灵敏的生物染色剂,由于其对犯罪现场遗留的血手印、血足迹具有良好的显现效果,而经常被用于犯罪现场血手印、血足迹的显现。
常温下,染色体用醋酸洋红溶液或龙胆紫溶液染色;低温时,低温会影响龙胆紫溶液或醋酸洋红液的作用,所以在低温时会选择改良苯酚品红染液对染色体染色。
染色体的成分就是是细胞内具有遗传性质的物体,易被碱性染料染成深色,所以叫染色体(染色质);其本质是脱氧核甘酸,是细胞核内由核蛋白组成、能用碱性染料染色、有结构的线状体,是遗传物质基因的载体,用醋酸洋红溶液、龙胆紫溶液、改良苯酚品红染液等进行染色。
染色体:
染色体的超微结构显示染色体是由直径仅100埃(Å,1埃=01纳米)的DNA-组蛋白高度螺旋化的纤维所组成。每一条染色单体可看作一条双螺旋的DNA分子。有丝分裂间期时,DNA解螺旋而形成无限伸展的细丝,此时不易为染料所着色,光镜下呈无定形物质,称之为染色质。有丝分裂时DNA高度螺旋化而呈现特定的形态,此时易被碱性染料着色,称之为常染色体。
1970年后陆续问世的各种显带技术对染色体的识别作出了很大贡献。中期染色体经过DNA变性、胰酶消化或荧光染色等处理,可出现沿纵轴排列的明暗相间的带纹。按照染色体上特征性的标志可将每一个臂从内到外分为若干区,每个区又可分为若干条带,每条带又再分为若干个亚带,例如“9q341”即表示9号染色体长臂第3区第4条带的第1个亚带。由于每条染色体带纹的数目和宽度是相对恒定的,根据带型的不同可识别每条染色体及其片段。
80年代以来根据DNA双链互补的原理,应用已知序列的DNA探针进行荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)可以识别整条染色体、染色体的1个臂、1条带甚至一个基因,因而大大提高了染色体识别的准确性和敏感性。染色体是遗传物质—基因的载体,控制人类形态、生理和生化等特征的结构基因呈直线排列在染色体上。2000年6月26日人类基因组计划(HGP)已宣布完成人类基因组序列框架图。2001年2月12日HGP和塞雷拉公司公布了人类基因组图谱和初步分析结果。人类基因组共有3~35万个基因,而不是以往认为的10万个。由此可见,染色体和基因二者密切相关,染色体的任何改变必然导致基因的异常。
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