马铃薯卷叶病毒病是怎样检验与检疫的？_美容护肤

鉴别寄主：

①曼陀罗：脉间褪绿，老叶产生黄斑，叶变小植株矮化。

②洋酸浆：脉间褪绿黄化，叶变小，卷，矮化。

③辣椒：无症带毒。

④白菜：不侵染。

枯斑寄主：辣椒。

体外稳定性：

①钝化温度：70～80℃。

②稀释限点：10-3～10-4。

③体外存活期：5～10d（2℃），1年（-70℃）。

血清学检测：ELISA较适宜筛选大量样品，近年来，我国报道过：DAS-ELISA、DOT-ELISA和DTBA法等；早在1991年张国柱报道用DOT-ELISA检测；白艳菊等（2000）报道，用DAS-ELISA同时检测和筛选马铃薯卷叶等5种马铃薯病毒；朱国春等（2000）用DTBA从茎或块茎中检测病毒，比常规ELISA更灵敏、简便、成本低，缺点是不能定量。

马铃薯卷叶病毒同Luteovirus属的一些病毒如：烟草坏死矮缩病毒、甜菜西方黄化病毒、甜菜轻型黄化病毒、菜豆卷叶病毒、大麦黄矮病毒血清学相关。

与联邦德国的马铃薯卷叶病毒分离物有血清关系，可用免疫电镜检测病株，但不能用免疫扩散法检测组培苗（Lertsmitivanta，1986）。

分子生物学检测：RT-PCR检测PLRV又优于ELISA，近年，我国用RT-PCR一步法检PLRV（吴志明等，2000；周国辉等，2004）；而二重RT-PCR，快速检测PLRV等四种马铃薯病毒，更为简单高效。本法是采用RNA简易浸提法和优化二重RT-PCR技术，设计四种病毒的专化引物，PLRV的引物336bp，扩增产物加含溴酚蓝的缓冲液，于2%琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色成像，可从薯块、茎秆、叶柄和叶中检测病毒（袁青等，2005）。

电镜观察：病毒只存在于病韧皮部、韧皮部薄壁细胞和伴细胞的细胞质中，有大量病毒粒子或粒子排成的结晶体。

检疫危险性评价：本病的病原马铃薯卷叶病毒，可由马铃薯种薯远距离传播，和蚜虫持久性传毒，对马铃薯生产可构成严重经济损失，季良进行危险性评价时危险度值10分，为高危有害生物。国内虽有局部发生，但鉴于对马铃薯生产的潜在危害性，应列入进境植物检疫潜在危险性有害生物名单。

地理分布：中国（黑龙江、内蒙古）、韩国、泰国以及全世界大多数马铃薯产区。

检疫国家地区：保加利亚、冰岛、南斯拉夫、挪威、欧盟、斯洛伐克、匈牙利、澳大利亚、印度尼西亚、阿尔及利亚、冰岛、摩洛哥、斯洛伐克等。

应检植物：马铃薯种薯。

检疫措施：因我国将马铃薯列为禁止进口植物，进口时须经国家质量监督检验检疫总局特许审批，限量进口，并要求附有出口国《检疫证书》，保证不带有此类病毒。入境后须经指定的隔离检疫站进行一年以上生育期检验，确认无病者，交还进口货主，并在隔离条件下繁殖无病毒种苗，才可允许用于生产种植。

我对于elisa试剂盒不是很了解，我是做化学发光试剂盒的。只能给你一个参考的数值，具体的还要你根据这个对于浓度自己用2倍法进行多次尝试。肿瘤标志物如甲胎蛋白，癌胚抗原的包被量大概在5微克每毫升左右。你可以1，2，4，8，16。。。这样去包被尝试，最后确定包被量。

不同方法拟合的曲线会对检测结果造成很大差异。如何判断曲线拟合的优劣是大家关心的问题。本文以癌胚抗原(CEA)、胎儿甲球蛋白(AFP)、乙型肝炎表面抗原(HBsAb)定量测定为例，用Point

Point、

Cubic

Spline、

Akima、