有关IDA树脂的问题

有关IDA树脂的问题,第1张

Novagen的蛋白亲和纯化产品

(2005年6月30日前75折促销)

HisBind 纯化试剂盒

通过金属螯合层析纯化 HisTag 融合蛋白

HisBind 家族产品提供了用于通过固定化金属亲和层析( IMAC )快速一步纯化 HisTag 序列蛋白的广泛填料选择。 HisTag 序列( 6 、 8 或 10 个连续的组氨酸残基)与固定在基于 NTA- 和 IDA- 的 HisBind 树脂上的二价阳离子 Ni 2+ 结合,洗去未结合蛋白后,用咪唑或 pH 稍低的缓冲液洗脱并回收目标蛋白。该通用系统使得可在温和、非变性条件,或存在 6M 胍或尿素条件下纯化蛋白。

下表所列的不同 HisBind 填料满足了许多融合蛋白纯化的应用:方便处理多个小量样品的纤维素柱和筒,用于成批制备和重力流柱子的大包装的操作简易的琼脂糖,处理时间短、快速纯化多个样品的 HisBind 磁性琼脂糖珠,以及适合生产级纯化的高流速 Superflow TM 和 Fractogel 树脂。还有多种带 Ni 2+ ( NTA 或 IDA 化学基团)的填料可供选择。

HisBind 基质选择指南

产品

类型

载量

特点

应用

Ni-NTA HisBind Resin

带 Ni 的 NTA 琼脂糖

5-10 mg/ml

最小的 Ni 2+ 浸出

与 20mM b -ME 相容

小到中量

重力流柱

推荐用于真核抽提物

Ni-NTA HisBind Superflow

带 Ni 的 NTA 超流速琼脂糖

5-10 mg/ml

最小的 Ni 2+ 浸出

与 20mM b -ME 相容

高流速和压力

小量到生产级

FPLC 或重力流柱

推荐用于真核抽提物

HisBind Resin

无 Ni 的 IDA 琼脂糖

8 mg/ml

可重复使用多次

与 HisBind 缓冲试剂盒兼容

小到中量

重力流柱或批量模式

HisBind Cloumn

带 Ni 的 IDA 琼脂糖

125 预装柱

10 mg/ 次

预装柱

与 HisBind Quick 缓冲试剂盒兼容

方便的纯化

重力流柱

HisBind Fractogel (S)

无 Ni

IDA 触须

甲酰化

>10 mg/ml

20 -40 m M 颗粒大小

高流速和压力

小量到生产级

FPLC 或重力流柱

高分辨率分离

HisBind Fractogel (M)

无 Ni

IDA 触须

甲酰化

>10 mg/ml

40 -90 m M 颗粒大小

高流速和压力

小量到生产级

FPLC 或重力流柱

HisBind Quick 300 Cartridge

带 Ni 的 IDA 纤维素

预装筒

05 mg/ 次

每端锁紧接口

与 HisBind Quick 缓冲试剂盒兼容

注射器操作

真空多支管操作

快速纯化

HisBind Quick 900 Cartridge

带 Ni 的 IDA 纤维素

预装筒

2 mg/ 次

每端锁紧接口

与 HisBind Quick 缓冲试剂盒兼容

注射器操作

真空多支管操作

快速纯化

HisBind Quick Cloumn

带 Ni 的 IDA 纤维素

预装柱

5 mg/ 次

每端锁紧接口

与 HisBind Quick 缓冲试剂盒兼容

真空多支管操作

快速纯化多个样品

HisBind Magnetic Agarose Beads

带 Ni 的 IDA 磁性琼脂糖

5 mg/ml

3 m 磁性琼脂糖珠

快速小量纯化

磁性分离

高通量操作

注:与任何纯化填料一样, HisBind 树脂在接近结合载量时使用,可获得最好的分离效果

HisBind 纯化试剂盒

NTA 和 IDA 化学基团

HisTag /HisBind 技术是根据与 HisTag 序列相邻组氨酸和固定化金属离子(通常为 Ni 2+ )的亲和力来进行纯化。金属离子被螯合到固相支持物共价结合的反应性基团上。最常用的螯合物包括氮川乙酸( NTA )和亚氨二乙酸( IDA ),它们分别具有四个和三个与金属离子相互作用的位点。在天然和变性条件下,这两种化学基团为亲和填料和目标蛋白的结合、洗涤和洗脱条件提供了不同特性。实际应用中, NTA 的额外螯合位点使纯化过程中金属浸出最小,并与还原二硫键的 20mM b - 巯基乙醇相容。而存在其它螯合或还原成分时, IDA 树脂的高金属浸出率可导致纯化结果不甚理想;然而 IDA 填料具有可循环使用多次并不损失性能的优点。对于每种填料系统,可改变条件以优化特定系统表达的目标蛋白的纯化。通常做法是调整天然条件下洗涤和洗脱缓冲液的咪唑浓度,尽量减少非特异结合蛋白的共纯化。

HisBind 柱

为了方便使用, HisBind 柱预装了 125ml 柱床体积的 Ni 2+ 结合 HisBind 树脂。柱子顶部和底部的特殊设计 (frit) 可以确保上样和走柱时缓冲液均匀流动,干扰最小。配合使用 BugBuster 和 Benzonase 核酸酶制备的细菌裂解物可获得较好效果。

HisBind 和 HisBind 快速缓冲液试剂盒

HisBind 缓冲液试剂盒是一套经过预测试的缓冲液,用于 IDA 的 HisBind 树脂金属螯合层析方便快速地一步纯化蛋白。试剂盒提供的溶液可用于 10 根 25ml 柱的 Ni 2+ 螯合、蛋白结合、洗涤和洗脱。除了不包括 8X Ni 2+ 结合缓冲液, HisBind 快速缓冲液试剂盒与 HisBind 缓冲液试剂盒的组分完全相同。(填料树脂以 Ni 2+ 结合形式提供)

Ni-NTA 缓冲液试剂盒

Ni-NTA 缓冲液试剂盒提供了一套方便的缓冲液,优化用于在Ni-NTA HisBind 树脂上纯化 HisTag 融合蛋白。这些磷酸缓冲液与HisBind 缓冲液试剂盒中的基于 Tris 的溶液不同。试剂盒中提供了经过精细制备的 4X 浓缩液,用于特定的结合、洗涤和洗脱程序。

BugBuster Ni-NTA HisBind 和 HisBind 纯化试剂盒

BugBuster 蛋白抽提试剂是从大肠杆菌有效抽提可溶性蛋白的即用型溶液,避免了机械破碎操作。 BugBuster Ni-NTA HisBind 和 HisBind 纯化试剂盒整合了 BugBuster 试剂和用于方便制备可溶性细胞抽提物以及 HisTag 融合蛋白亲和纯化的相应树脂。两个试剂盒都包括 Benzonase 核酸酶,用于降低粘度和 / 或从蛋白制备物中去除核酸。 BugBuster HisBind 纯化试剂盒还包括层析缓冲液。

参考资料:

wwwpufeicom

→2011年

→1月份获得《药品生产许可证》。

2010年

→12月份获得《药品GMP证书》。

→12月份获得卫生部全国采供血机构病毒核酸检测检验室间质量评价证书和全国核酸检测(病毒学)检验室间质量评价证书。

→8月份获得专门为血站血液核酸筛查设计的PCR检测试剂新药证书,证书标号:国药证字S20100004。

→上海浩源客户血站使用上海浩源血液核酸筛查试剂检测出中国首例窗口期漏检HIV感染者。这对我国开展血液核酸筛查提高血液安全起到了积极的促进作用。

2009年

→12月份获得“乙型肝炎病毒核酸检测试剂盒(荧光定量PCR法)”医疗器械注册证。

→1月份获得《医疗器械生产企业许可证》。

2008年

→ 获得“HIV-1核酸诊断试剂盒”医疗器械注册证。

→ 通过《国家食品药品监督管理局》体外诊断试剂生产质量管理体系认证。

→ 获得2008年度“上海市高新技术企业”证书。

2007年

→ 浩源NAT试剂正式进入生物制品企业,半自动样品制备仪、全自动加样仪、高灵敏度的实时荧光PCR检测试剂盒研制成功。

→ 与台湾基亚公司及核酸检测专业领域的美国TBG公司建立策略联盟。

→ 获得“重复使用微流芯片的方法”发明专利。

2006年

→ 浩源NAT试剂正式进入中国采供血系统。

2005年

→ 成功研发第一套血筛用PCR检测试剂盒。

2004年

→ “核酸扩增(PCR)微流芯片检测试剂盒”获上海高新技术A级成果转化项目认定。

2003年

→ 成功研发第一套PCR微流芯片检测试剂盒。

→ 通过《国家食品药品监督管理局》药品GMP认证。

→ 获得“一种不需要反转录步骤的RNA分子扩增法”发明专利。

→ 获得“脱氧核糖核酸分子的通用捕集法”发明专利。

→ 获得“PCR扩增、杂交同步法”发明专利。

→ 获得“以病毒裂解液及沉淀法对临床样品同时进行RNA和DNA提取的方法”发明专利。

2002年

→ 获得“乙型肝炎病毒核酸扩增(PCR)酶免定量检测试剂盒”生产文号。

2001年

→ “乙型肝炎病毒核酸扩增(PCR)酶免定量检测试剂盒”获上海高新技术成果转化项目认定。

2000年

→ 获得国内第一张PCR定量试剂新药证书“乙型肝炎病毒核酸扩增(PCR)酶免定量检测试剂盒”。

1999年

→ 成功研发国内第一套PCR定量检测试剂盒。

1998年

→ 国内首家引入UNG/dUTP防污染系统。

→ 国内首家引入PCR内对照系统(PCR internal Control System)。

→ 获得“分离磁性颗粒”实用专利。

1997年

→ 浩源成立。

一套完整的的动物解剖用手术器械。

2几十套大鼠、小鼠饲养笼、代谢笼、干湿温度计、秒表。

3大小鼠、兔子灌胃器、研钵。

4称动物体重用的天平,称动物脏器用的电子分析天平,扭力天平。

5心电图机。

6电冰箱、恒温干炒箱、离心机、显微镜、恒温水浴锅、高压消毒锅、超净工作台、分光光度计等。

7一般常用消耗品如量桶、烧杯、注射器等。

8、细胞培养箱

9、无菌操作台

10、-80℃冰箱供保存细菌用

11、做Aems试验,还需要各种菌株,保存菌株、细胞用的液氮罐  

还有

小动物行为记录分析系统

Hateeras无创血压测量系统

大动物脑立体定位仪

 一。治疗药物监测(TDM)

  临床治疗药物监测的目的是通过测定血液中或其它体液中药物的浓度并利用药代动力学的原理使给药方案个体化,以提高药物的疗效,避免或减少毒副反应,其中对于化疗药物及免疫抑制剂的使用,治疗药物监测显得尤为重要。现国内大多采用免疫法进行检测,该法对试剂的依赖程度高,试剂盒昂贵,检测药物种类有限,尤其不能区分原型药及代谢药,特异性及结果准确性较差。

  为提高检测灵敏度及结果的准确性,为临床个体化用药提供更可靠的依据,我们采用高效液相色谱-质谱法(LC-MS/MS)进行血液中目标药物浓度的监测,采用先进的AB Sciex 4000QTRAP质谱仪进行检测。与传统的光谱法、免疫法相比,高效液相色谱-质谱法(LC-MS/MS)灵敏度及专属性高、重现性好,用目标离子特征性碎片定量,特异性强,干扰降低,更能准确反映目标药物的血药浓度,为临床应用治疗窗窄、毒副作用大、个体代谢差异大的药物提供了可靠的依据,减少因药物过量造成的毒副作用以及药量过低导致的疗效不佳,指导临床个体化用药。

  二。 CYP450药物代谢酶基因多态性检测

  为辅助个体化用药,我们现开展“CYP2C93、CYP2C192基因型DNA序列测定分析”项目,采用基于测序方法分析患者是否为纯合型、杂合型CYP2C93或CYP2C192基因型。细胞色素氧化酶P450(CYP450)是人类肝脏中一种重要药物代谢酶系统,能代谢多种内源性底物、药物和外源性化合物,主要包括三种超家族:CYP1、CYP2和CYP3。

  CYP2C9是CYP2C亚家族中的一种同功酶,大约10%的临床常用药经由CYP2C9氧化代谢,包括甲苯磺丁脲、S-华法林、苯妥因、格列甲嗪、格列本脲、托拉噻咪、络沙坦、厄贝沙坦和许多非甾体类抗炎药物(如布洛芬、氯诺昔康、双氯芬酸和萘普生等药物)。迄今已发现CYP2C9存在30 种等位基因,CYP2C91 为具有强代谢活性的野生型基因,CYP2C93是中国人中最常见的弱代谢基因型,CYP2C93能显著地损害CYP2C9的催化功能,但对不同的底物药物催化代谢的影响不同,具有显著底物依赖性。弱代谢型CYP2C9导致酶活性降低,其药物代谢能力呈“正常基因纯合子 >; 正常基因与弱代谢基因杂合子>;弱代谢基因纯合子或杂合子”的趋势。

  在血液病化疗和骨髓移植中,常用的抗癌药物如环磷酰胺、异环磷酰胺、依托泊苷等的代谢速度和CYP2C9的基因型相关。CYP2C9的基因型及共同服用的调节CYP2C9活性的药物均会影响这些药物的代谢速度。

  CYP2C19是CYP2C亚家族中的一种同功酶,它参与多种药物的代谢,包括质子泵抑制剂、三环类抗抑郁药、抗癫痫药、抗精神病药、降糖药、抗凝药、抗疟疾药以及一些抗癌药物,如美芬妥英、安定、苯巴比妥、普耐洛尔、奥美拉唑、氯胍以及兰索拉唑、泮妥拉唑等。CYP2C19至少存在18种等位基因,CYP2C191 为具有强代谢活性的野生型,而其余基因型均导致代谢活性降低。CYP2C192在中国人群中的频率较高,与药物代谢关系最为密切,其它等位基因发生的频率很少。CYP2C19药物代谢能力呈现为“强代谢型基因纯合子 >; 强代谢型与弱代谢型基因杂合子 >; 弱代谢型基因纯合子或杂合子”的变化趋势。

  在血液病化疗和骨髓移植中,常用的抗真菌药伏利康唑的代谢酶主要是CYP2C19,次要代谢酶为 CYP2C9和CYP3A4。15-20%的亚洲人群是CYP2C19弱代谢型,其中主要为CYP2C192基因型。CYP2C19的基因型及共同服用的调节CYP2C19活性的药物均会影响伏立康唑的血药浓度。

  AB Sciex 4000QTrap质谱仪简介

  AB Sciex 4000QTRAP四级杆-线性离子肼复合型质谱仪能在同一质谱上同时提供超高灵敏度的定量分析和定性分析功能,串联四级杆的扫描方式和线性离子肼的扫描方式相结合,使其在药物发现、毒理研究、代谢组学、法医学、临床研究等诸多领域发挥重要作用,它是超低含量组分的快速、自动化定量定性分析的最理想工具。它具有诸多优点:

  1。串联四极杆和线性离子阱技术相结合,同一台质谱能同时提供超高灵敏度的定量和定性分析功能;

  2。 m/z范围:5~2800 amu(四极杆模式);50~2800 amu(线性阱模式);

  3。具有串联四极杆的母离子扫描、中性丢失扫描、MRM等独有的功能,从而保证了高灵敏度和特异性;

  4。高灵敏度的全扫描MS、CID-MS/MS、多级质谱扫描(MS3)、增强多电荷扫描功能(EMC)、时间延迟碎裂功能(TDF)扫描功能,增强了定性分析能力;

  5。线性离子阱技术具有更大的离子容纳能力和空间,因此克服了传统离子阱由于阱的体积小而带来的“空间电荷效应影响,离子容量和捕获效率比传统离子阱高;

  6。 TurboV离子源,灵敏度高,适应流速范围宽,方便易用;

  7。 Q2 LINAC高压碰撞室技术提高离子从接口到检测器的传输效率,有效消除记忆效应,降低MRM每个离子对的驻留时间,重现性好,适合于高通量、多组分分析。

 

一家澳大利亚冠状病毒快速抗原检测制造商在美国面临法律诉讼,此前数百万套检测试剂盒因假阳性结果而被撤回。

据称,Ellume在客户对产品进行错误检测后,未能向客户提供退款。

位于布里斯班的生物技术公司Ellume生产了首个获得美国食品和药物管理局(FDA)批准的非处方冠状病毒抗原快速检测试剂盒。由于该问题,该公司于2021年10月和11月被迫在美国召回约200万试剂盒。

Source: Getty Images

FDA表示,此次召回的Ellume Covid-19家用检测试剂盒属于最严重的召回(第一类)。它说,可能会出现假阳性;在延迟诊断或治疗中,接受治疗的人不需要接受治疗,也不需要与工作、学校、家庭或朋友隔离。

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你买到抗原检测试剂盒了吗?

36k人表态

买到了

没有

一个卖到18块[惊讶]我真是谢谢这些发国难财的人

不做不就行了,感觉顶不住就去医院,反正我是不会做

又给发国难财的骗子门找到了发财的机会,国家要严力打击。

它妈的,什么买不到,抗原检测试剂没有,N95口罩没有,感冒药,退烧药都买不到。

为什么医院做核酸要预约?为什么网络买不到抗原?为什么药店也没不到?发烧几天,肌肉疼,喉咙疼。就是找不到测试的渠道。没法测班也上不了,迷茫中。

十几块钱,够我吃顿饭了,感觉没必要花这个钱了。

上海之前发了那么多

又给发国难财的骗子们找到了机会,国家应严厉打击

我现在急需抗原检测试剂盒

坑爹的疫情三年了活着就不错了!要钱不要命你们选择吧

31条观点

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