天麻的种植要求严格,天麻对湿度有哪些要求?

天麻的种植要求严格,天麻对湿度有哪些要求?,第1张

天麻属腐生草本植物。兰科植物,是一种名贵的中药材,一般用作块茎类药物,具有驱风、镇眩、安神的功效。它曾经是皇室的专属。张跃进教授根据其花色、茎色、块茎形状等指标将其分为六个变种:红天麻、绿天麻、黑天麻、黄天麻、毛天麻、绿天麻。野生天麻在我国分布广泛,商品天麻的主要种植区域为以陕西汉中为中心的秦巴山区、湖北宜昌、安徽大别山区、云南昭通等。秦巴山区野生天麻90%以上属于红梗天麻,少量青梗和黑梗质量。在人工栽培中,黑红杂交已经成为一种新的趋势。

天麻是多年生草本植物,根部完全降解,不能从土壤中吸收水分和矿质元素,叶片高度降解,几乎有鳞片,不能进行光合作用,因此不具备自养能力。种子-鳞茎-无性繁殖茎-麻-白麻-箭麻。它的种子很小,结构只覆盖原胚细胞一次,没有胚乳,所以没有自然萌发能力。在其生活史中,其营养供应基本上处于三个阶段:从种子到圆球茎阶段,萌发细菌即迈锡尼真菌菌丝侵染胚提供营养,促进种子萌发形成圆球茎。属于蜜环菌属,主要分解木质素和纤维素,为其提供营养来源。从红麻阶段到生殖生长和种子生产阶段,主要依靠种子贮藏的营养,块茎只吸收部分水分进行补充。因此,天麻种子发芽与否和发芽率取决于发芽细菌,大麻种子能否长成商品大麻取决于蜜环菌的质量和生长。

在栽培分类中,一般称为有性繁殖,通过授粉从天麻中获得种子,无性繁殖种植稻麻或白麻。从种植到采收,天麻应避免阳光直射。当阳光照射时,应设置棚降温,以保证天麻的正常生长。同时,应喷洒双智能因子膜或双药材保护叶壮茎王,增强植物生态生长的正能量,拓宽营养导向系统,增强药材的抗病性、抗逆性、抗旱性和抗药害性。温度直接影响天麻的生长、产量和品质。天麻的最佳生长温度为15-25℃。当温度超过30℃时,蜜环菌和天麻的生长会受到严重抑制。当温度低于15℃时,天麻的块茎生长速度会减慢并停止;当温度低于5℃时,天麻的块茎会被冻坏腐烂。因此,温度控制是天麻栽培成功的关键。

种植天麻所需的平均相对湿度约为80%。在旺季,湿度小于60%不利于天麻的生长,超过80%易造成块茎腐烂,需特别注意。同时叶面每7~15天喷一次,既能保暖保湿,又能智能过滤植物呼吸杂质,防止空气污染,抑制病毒感染。

微生物在中药中的应用

摘要:中药是中华民族的瑰宝,几千年来中医药为我国人民的健康做出了巨大的贡献,形成了系统的中医药理论和大量经实践检验的成药验方。中药作为天然药物正逐步引起世界的关注。微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物,包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物、显微藻类等在内的一大类生物群体,它个体微小,却与人类生活关系密切。利用微生物广泛涉及健康、食品、医药、工农业、环保等诸多领域。微生物在中药领域有着广泛的运用。微生物可运用于中药菌体发酵、中药炮制等。

关键词:微生物 中药 发酵技术 发酵中药

中国是中医中药的起源,几千年来中医药为我国人民的健康做出了巨大的贡献,并逐渐积累,形成了系统的中医药理论和大量经实践检验的成药验方。中药行业是我国具有比较优势的少数几个产业之一,在自然科学领域,我国最有实力、最有优势、最有后劲的就是中医药。它是中华民族的瑰宝,也是世界传统医学中重要的组成部分,在预防和治疗疾病方面发挥着重要的作用。正受到各国人民和研究人员的关注和重视。目前各国都在从中药等天然产物中寻找有效药源。

微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物,包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物、显微藻类等在内的一大类生物群体,它个体微小,却与人类生活关系密切。涵盖了有益有害的众多种类,广泛涉及健康、食品、医药、工农业、环保等诸多领域。微生物学是生命科学中发展较快的学科之一,在生命科学中地位越来越重要,成为各门学科都离不开的重要工具。在制药药现代化进程中,微生物显示出了越来越重要的作用,充分利用现代微生物学成果可以更好地促进制药的现代化,也为微生物学的发展开辟了新领域。

1 微生物学理论促进了微生物相关中药的发展

对传统微生物中药的生物学研究加深了传统微生物中药的应用和产品开发,特别是多种中药微生物纯培养物代替原药材的研究尤其引人注目,如灵芝、猴头等各种药用菌的栽培, 对保护环境、保护资源、满足人民群众用药需求起到了十分巨大的作用。以金水宝为代表的从冬虫夏草中分离的真菌纯培养物代替冬虫夏草的研究取得了巨大的经济和社会效益, 掀起了以蝙蝠蛾拟青霉、蝙蝠蛾多毛孢、蛹虫草、等虫生真菌的研究热潮。对一些微生物和植物相互作用形成的中药也有了更深入的认识, 如龙血竭的形成与真菌有密切的关系, 是龙血树抵抗微生物侵染而产生的一种植物抗毒素;僵蚕中的一些有效成分是微生物、蚕、桑叶相互作用形成的。对天麻、茯苓等中药的生物学研究促进了这些中药品种栽培技术的发展。

微生物相关中药形成方式,可以分为以下几种情况:1)以腐生生活方式形成的大型药用真菌,如灵芝、猴头、木耳、香菇等。这些真菌基本上都可以实现人工栽培。2)天然微生物发酵植物性中药材料形成,如神曲、红曲等,主要是酵母和丝状真菌。3)植物和微生物共生形成的中药, 如天麻是蜜环菌和天麻植物的共生体,天麻植物依靠蜜环菌提供营养;猪苓也是由于蜜环菌侵入猪苓菌核形成的共生体,由蜜环菌提供营养。4)寄生真菌侵染活体昆虫形成的虫菌复合体,其实质是昆虫的致病菌。如冬虫夏草、僵蚕、蛹虫草等。5)微生物侵染植物后,植物抵抗微生物的侵染而形成的植物抗毒素,如龙血竭、沉香等[1]。

微生物相关中药活性成分的研究为这些中药的质量标准化起到了重要的作用,也加深了对这些中药药理作用的认识。药理学研究促进了传统微生物中药在治疗现代社会的高发病如癌症、心脑血管疾病、病毒性疾病中的应用。多数微生物中药都具有滋补保健的效果,如灵芝、冬虫夏草成为保健食品开发的热点。大多数药用真菌都含有真菌多糖, 真菌多糖能增强免疫力、没有直接的细胞毒作用,成为抗癌、抗病毒产品开发热点。

2 微生物发酵在中药中的应用

发酵工程是指采用工程技术手段,利用生物(主要是微生物)和有活性的离体酶的某些功能,为人类生产有用的生物产品,或直接用微生物参与控制某些工业生产过程的一种技术。

发酵工程微生物发酵制药是指利用微生物技术,通过高度工程化的新型综合技术,以利用微生物反应过程为基础,依赖于微生物机体在反应器内的生长繁殖及代谢过程来合成一定产物,通过分离纯化进行提取精制,并最终制剂成型来实现药物产品的生产。

中药发酵制药技术是在继承中药炮制学发酵法的基础上,吸取了微生态学研究成果,结合现代生物工程的发酵技术而形成的高科技中药制药新技术,是从中药(天然药物) 制药方面寻找药物的新疗效。传统的中药发酵多是在天然的条件下进行的,而现在的中药发酵制药技术是在充分吸收了近代微生态学、生物工程学的研究成果而逐渐形成的。其先进发酵工艺特点是:以优选的有益菌群中的一种或几种、一株或几株益生菌作为菌种,加入中药提取液中,再按照现代发酵工艺制成产品,它是一种含有中药活性成分、菌体及其代谢产物的全组分发酵液的新型中药发酵加工制剂。

21古代中药发酵技术应用历史与现状

我国人民远在 4000多年前就学会利用发酵来酿酒,此后又相继利用发酵来生产酱、醋、豆豉和臭豆腐等食品。《本草经疏》曰:“古人用曲,即造酒之曲,其气味甘温,性专消导,行脾胃滞气,散脏腑风冷。”说明中药临床应用之曲是在酿酒业发展的基础上出现的,曲与酒相维系。后来人们在酒曲中加入其他药物制成专供药用的各类曲剂。《本草纲目》云:“古人用麴,多是造酒之麴。后医乃造神麴,专以供药,力更胜之。”可见古人早已将微生物发酵应用于中药炮制。即将药材与辅料拌和,一定温度和湿度下通过微生物的发酵达到提高药效、改变药性、降低毒副作用等目的。直到现在,临床仍在应用的发酵(制品)中药,如六神曲、淡豆豉、建曲、沉香曲、半夏曲、红曲、豆黄等,均是利用炮制环境中的野生微生物(多为霉菌、酵母、细菌等)进行多菌种固体发酵而成[2]。

发酵技术应用历史悠久,也是传统中药加工炮制的重要方法之一,一般主要是起到中药复合炮制的作用。不同的培养基经同样的发酵处理后会产生药性的差异,可利用该特性生产不同适应证的中药。例如,发酵淡豆豉时,以桑叶、青蒿发酵者,药性偏于寒凉,多用于风热感冒或热病胸中烦闷之症;以麻黄、紫苏发酵者,药性偏于辛温,多用于风寒感冒头痛之症。在清代,根据辅料中药及治疗功能的不同,又制出了皂角曲、竹沥曲、麻油曲、牛胆曲、开郁曲、海粉曲、覆天曲等10种药曲。

但是传统的中药发酵仅对自然界的菌种进行利用,且菌种不纯,不能利用现代研究成果定向改变药物的性能或有意识地根据药物之间的特性进行有目的的组合。同时,对那些在自然界中不占优势、生长条件要求比较严格的微生物来说,就不可能在药物上生长起来。这极大地限制了微生物的作用。另外,是否会落入有害菌也不明确,使微生物在药物中的潜在效能没有最大限度地发挥出来。

中药发酵研究开始于80年代,但仅是对真菌类自身发酵的研究,如灵芝菌丝体、冬虫夏草菌丝体、槐耳发酵等,大都是单一发酵。虽有报道加入中药,但也仅是将中药当做菌丝体发酵的菌质,同时研究发现,含有中药的菌质对原发酵物的功效有影响,只是未见深入研究。目前,已有学者呼吁中药发酵制药可按新药审批办法规定开发新药。同时也开展了另一项研究,即生物转化,我们认为它与中药发酵是密不可分的。90年代初,日本人小桥恭一发现中草药成分如番泻叶甙,可借助肠道细菌转化为致泻有效成分而起到治疗作用。又有报道,在中药有效成分与细菌的生物转化过程,许多甙类、黄酮类、黄酮醇、黄烷酮类、香豆素类等均经过肠道菌进行了化学修饰。有作者指出 ,在中药成分生物转化的研究过程中 ,对代谢物提纯、确定结构模式固然需要,但更应当推出微生物发酵。中药成分的生物转化是中药创制新药研究的重要方面。正在修订中的我国新药申报指导原则,已决定将生物转化列入创新(一类) 药的研究。董玫等研究发现,六味地黄丸发酵液可显著抑制小鼠肝癌 H22的生长,而等量的六味地黄丸煎剂则无明显抑瘤作用。六味地黄发酵液还可以对抗环磷酸酰胺所致白细胞减少,且升高报细胞的作用明显高于六味地黄煎剂。香港中医博士吴志勇成功发酵出黄芪液,经福建中医学院测定,发酵的黄芪所含的黄芪多糖是普通煎、煮、熬水提法的504~0365倍之间。据悉,卫生部药品检验所动物试验结果:发酵中药只需1/28的量,即可与一般煎、煮、熬的水提物一份的量发挥同等的药效。据报道,含有中药成分的培养基对原发酵中药的影响和多菌种混合发酵的研究将有望成为未来的研究热点。

国外对于中药发酵的研究报道较少,主要在食品、酶工程,如日本的纳豆,用Bacillus菌发酵大豆。由于Bacillus菌酶系丰富(包括淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶),并能增加维生素K的含量,Bacillus subtilis菌环能消除小肠内致病菌,其提取物具有明显的抗癌活性和降压作用。中草药发酵的研究有必要借鉴上述成功的经验[4]。

22中药发酵制药的特点

中药发酵制药技术的典型特点就是生物转化。可概括如下几点:1)药物的有效组分、活性物质最大限度的得以提取、利用;2)药物进入人体后不能直接被利用的有效活性组分,因在体外得以完成而被直接利用,迅速发挥应有效能;3)优选的人体有益菌种本身具有补充或增强原有药物的功能;4)中药发酵制药与原有药物相比产生了新的活性物质,从而具有新的保健、预防或治疗功能;5)是实现中药现代化、具有高科技水平的又一新技术,生产工艺可控,所得产物精确,制剂方便,便于与国际接轨[4]。

23 中药发酵的分类

中药发酵分为液体发酵和固体发酵。液体发酵是在借鉴抗生素生产工艺的基础上,把菌丝体加入培养基中,将之与药材混合后放置于适温下进行发酵。液体发酵具有较高的物质传递效率,易于实现发酵工艺的自动化控制。固体发酵是以富含多种营养成分的农副产品如麦麸、甘蔗渣、玉米芯等作为发酵营养基质,用一种或多种真菌作为发酵菌种,在一定的温度、湿度条件下进行发酵。固体发酵在发酵过程中既生长菌体,又形成各种次生代谢物质,难以将其分离,南京中医药大学庄毅教授将它们统称为“菌质”。按应用方式又可将其分为“无渣式”和“去渣式”,前者不用经过提取可直接用药,后者要经过有效成分的提取和制剂后才可用药[3]。

24发酵在中药研究中的应用

241利用中药培养基发酵药用真菌

菌物界估计逾十万种,可供药用的高等真菌约20余种,利用潜力巨大。国内20世纪60年代兴起深层培养(或发酵),2世纪80年代中国医学科学院药物研究所进行的冬虫夏草大规模发酵培养研究,也仅是对菌类自身发酵的研究,如灵芝、冬虫夏草、香菇发酵等,且大多是单一发酵。目前对灵芝、云芝、冬虫夏草、灰树花、密环菌、金针菇、香菇、姬松茸、茯苓等很多菌种的发酵技术已日趋成熟。

庄毅曾提出了菌质的概念,即用一定的药用菌菌种接种在一定的固体基质上,在一定环境条件下,经过一定时间发酵(发酵周期),在特定的质量指标控制下达到发酵终点而产生菌质。可采用现代技术将有效真菌与中草药组成的不同发酵基质构成各种发酵组合,在一定条件下进行发酵,产生各种性质不同的菌质。可以利用中药作为培养基的组成部分,构建药性菌质,比较发酵前后中药相关成分的变化,为中药与药用真菌的结合寻找突破点,并开发具有良好功效的药物。王玉红等在发酵培养基中添加适量的黄芪以促进灵芝的生长和灵芝多糖的产生,结果其多糖的组分发生了变化,有可能产生了新的物质。尤建良等将中药抗癌复方“康复灵”(主要含党参、麦冬、薏苡仁、猪苓、淮山药等)以灵芝菌进行生物发酵,结果表明灵芝中药制剂发酵液的抑瘤率达4787%比单独的灵芝发酵液、单味中药制剂和灵芝发酵液中药制剂混合液均有明显提高。

242中药发酵用于药材的炮制

发酵法一直是中药炮制方法之一,它借助微生物的作用,改变中药原有药性,提高疗效,降低毒副作用,扩大适应症。微生物在生长过程中产生的各种酶,将药物的成分分解转化为新的活性成分或将毒性成分分解而降低药物的毒副作用。现代中药加工中用发酵法炮制中药,如五倍子,这种中药具有收敛止泻、止血的功能,但其主要成分鞣酸在肠道中与蛋白质结合会降低其活性。研究人员用含根毒菌等物质的酵曲发酵五倍子,能显著提高其收敛作用,降低副作用。

香港中医吴志勇博士与内地教授林陆山合作,运用生物工程技术发酵中药获得成功。它彻底改变了煎、煮、熬、炼、蒸、浸的传统加工工艺,并使药效提高,发酵黄芪所含的黄芪多糖最多为传统工艺的5倍,且动物实验证明发酵黄芪的用量为传统方法制成的药的1/28,即可产生相同的药效。

(1)提高有效成分提取率

中草药中植物类药材占90%,药材有效成分多存在于胞浆中,植物细胞壁是由纤维素、半纤维素、果胶质、木质素2 发酵在中药研究中的应用21中药发酵用于药材的炮制等物质构成的致密结构。在中药有效成分提取过程中,当胞浆中的有效成分向提取介质扩散时,必须克服细胞壁及细胞间质的双重阻力,使有效成分浸出受阻。微生物可利用中药中的成分为营养进行分裂、生长、繁殖和代谢,在代谢过程中分泌蛋白酶、纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶等几十种胞外酶进入培养基,使细胞破裂,细胞间隙增加,减小细胞壁、细胞间质等传质屏障对有效成分从胞内向提取介质扩散的传质阻力。体外试验证明对盾叶薯蓣采用预发酵,有效组分薯蓣皂苷元的产率明显提高。

(2)中药发酵可提高中药药效

在发酵的过程中,对中草药细胞进行破壁使有效物质溶出,提高了活性成分的浓度。并且,将许多人体不能直接吸收利用的大分子有效活性物质降解成小分子的活性物质,使发酵中药在人体中可以较快的被吸收,且吸收较完,治疗效果好。

王林等人用麻黄、莱菔子、金银花、连翘四味中药发酵灵芝菌,发现这四味中药对灵芝菌的生物量有明显的促进增加作用,且使灵芝发酵液的止咳、祛痰作用高于其与中药混合发酵前。

董枚等也报道,将传统方六味地黄汤发酵,其发酵液对小鼠肝癌具有显著的抑制作用。六味地黄发酵液03g/kg连续给药两周,可显著抑制小鼠肝癌Hzz的生长,抑瘤率为30,而同等剂量的六味地黄煎剂无明显的抑瘤作用,而且六味地黄发酵液组的白细胞数比煎剂组多(P<001)。在免疫调节方面,六味地黄发酵液的功效明显优于六味地黄煎剂。

陈永强等经实验发现,甘草经微生物产生的β-葡萄糖醛酸酶水解后甘草酸转化为甘草次酸,甘草次酸可被肠道直接吸收,短期内在血液中达到较高的药物浓度,迅速作用于靶部位,并且通过微生物的作用,甘草的细胞间质及细胞壁得到分解,促进甘草其它有效成份的释放。通过微生物对甘草的转化作用,甘草的急性抗炎、镇痛效果都显著增强。

(3)中药发酵产生新的活性物质

有些中药经过多菌种混合发酵后还可产生新的活性物质,产生新的功能,为活性物质的筛选提供新的途径。云南大学与昆明植物研究所李国红等人,联合采用枯草芽孢杆菌对三七根进行发酵后,在对其中的皂苷成分的研究中发现,从发酵后的三七中分离到了人参皂苷RH4。这种化合物未在发酵前检测到,说明这种化合物是通过发酵产生的,可能是在发酵的过程中,三七须根的某些皂苷被微生物转化为人参皂苷RH4。

(4)减毒增效

微生物有可能将中药中的有毒物质进行分解,从而降低药物的毒副作用。大黄生用泻下作用峻烈,易引起腹痛、恶心等胃肠道反应。大黄泻下成分主要是结合型蒽醌衍生物,其中以二蒽醌番泻苷的作用最强。在中医临床中,为了缓和大黄的泻下作用及对胃肠道的不良反应,常用不同的炮制方法,使结合型蒽醌分解或破坏,从而缓和泻下作用和其它副作用。云南中医学院的学者戴万生等人,用发酵法炮制大黄,改变了大黄的蒽醌类成分的含量。蒽醌类成分经酵母发酵后,总蒽醌含量仅略有降低,较传统方法保存了更多的大黄总蒽醌,而起泻下作用的结合型蒽醌含量降低。另外,作为抗菌、抗肿瘤的主要有效成分的游离型蒽醌的含量增加了6倍左右,起到减毒增效的作用[5,6]。

25 发酵中药的优势

试验证明,发酵的中药与煎、煮、熬、灼、蒸、浸法提取的中药有以下几点不同:(1)中药发酵是在常温、常压条件下进行的生物转化过程,最大限度地保护了中药的活性成分,如对热敏感的挥发油和维生素等成分,如薄荷、当归等。(2)中药中有效成份不被破坏并充分利用,如蛋白质、氨基酸,维他命、微量元素等。经检验:发酵中药中含有18种氨基酸、大量的亚麻酸、多肽类小分子活性蛋白、20多种维他命和微量元素等。(3)发酵中药的分

子量较小,吸收较快、较完全、治疗效果较好。如临床中治疗跌打损伤,若筋骨无断裂,98%能1~2次治愈;痔疮98%一次根治。经中央卫生部药物检验所试验证实:发酵中药的药效是普通水提法中药的4~28倍。(4)目前很多中药不能进入国际市场的主要原因之一是重金属超标,而发酵中药所含的重金属不会产生毒性,如朱砂不会释放出水银(汞),(5)发酵法既环保又可“废物”再用,通常中药提取有效成分后药渣弃掉,污染环境。发酵法经过反复发酵,约95%被利用,中药渣(即纤维)经过纤维素酶的水解及多酶体的裂解代谢,大部分变成单糖(葡萄糖),可被机体利用,未被利用的纤维素可润肠通便,起到肠道清道夫的作用,有的便秘患者服用了发酵中药后意外地解决了便秘的问题[5]。

26中药发酵技术中的关键技术

目前中药发酵技术无论在基础理论方面还是在方法上的研究仍处于起步阶段,对单味药材发酵和传统复方发酵开发得都很少,故少有投入生产的发酵新药。同时中药发酵技术也面临一些问题,如中医药自身体系的模糊性、中药成分的复杂性、中药发酵机理的不明确性、微生物生长特性的多样性以及在中药发酵过程中如何贯彻中医理论的指导等。因此,对中药发酵关键技术的正确把握关系到其发展方向和前景,笔者认为,今后以下几方面的工作有待深入研究。

251中药发酵机理:目前微生物发酵中药的机理已有一些基础和推断,但由于中药化学成分的复杂性和作用机理的不明确性,中药的有效成分、一些非有效成分及特殊的基质环境与微生物的相互作用尚有待研究;针对具体的中药及复方,明确其发酵作用机理,揭示发酵中药的科学内涵,其发酵体系的特点和作用机理仍待进一步研究。

252 中药发酵共性技术:加强对单味中药、中药提取物、中药复方发酵技术、微生物培养的系统研究,并进行成分的分离、鉴定和相关药理试验,明确微生物的性质以及变化过程,建立起统一的能应用于大多数中药发酵的通用方法与共性技术体系,为实现发酵中药的现代化、科学化、国际化提供新的途径和方法。

253 优良菌种选育技术:菌种的选育是中药发酵的关键和基础。因此,应该加大发酵菌种的选育和评价工作,使更多优良的菌种能够最大限度作用于中药,从而为更多有价值的发酵中药产品的研制奠定基础。

254 现代复合微生物发酵技术:多菌种发酵较单一菌种发酵具有更强的生物转化能力,但也是发酵研究的难点。传统中药发酵多是自然界混合菌种天然发酵的结果,因那时人们并不知道微生物和发酵的关系,从而很难人为控制发酵过程。如何应用现代微生物工程的相关技术,进行中药多菌种发酵,提高发酵生产的可控性、稳定性,提高发酵中药的有效性和安全性,是进行现代发酵中药研究的又一关键技术。

255 发酵中药筛选模型和多维评价体系:中药具有品种多样性、化学成分复杂性、药效作用多向性的特点,中药复方具有整体性、系统性、复杂性、非加和性等特点。因此,中药及其复方在发酵过程中如何遵循中医药理论的指导,进行发酵后选用何种评价指标和评价模型,建立发酵中药筛选模型和多维评价体系,是发酵中药研究的又一技术难点[7]。

3 微生物在组培中药材次生代谢产物的形成中的应用

用组织培养方法来生产中药的有效成分是解决中药资源紧张的重要手段,是中药现代化的重要内容之一。在组织培养中用发根农杆菌诱导组培物产生发状根(hairy root),由发状根形成次生代谢产物已成为利用中药组织培养物产生次生代谢产物的常用方法。到目前为止已建立了80多种植物的发状根无性系,其中不少是药用植物。Yosh ikawa等的研究表明,人参的发状根在无外源激素的条件进行培养,人参皂苷,可达干质量的095%,而天然栽培根仅为04%,因此人参发状根完全有可能代替天然人参作药用。黄遵锡从短叶红豆杉诱导出发状根,选育出的5株无性系20 d后生物量增加9倍,紫杉醇的量是愈伤组织的13~80倍。

在植物与微生物的相互作用中,真菌能诱导植物中特定次生产物的积累,使植物产生对这些病原微生物的抗性。丹参是一种重要的药用植物,利用丹参毛状根和丹参转化细胞生产丹参酮等次生代谢物成为研究的热点。大丽轮枝菌激发子V44和酵母提取物分别诱导丹参毛状根和丹参转化细胞后,过氧化物酶活力显著提高,且有利于次生代谢产物的积累[1]。

药用植物内生真菌在中药栽培和中药新资源开发方面的应用

内生菌(endophyte)主要指在其生活史的某一阶段存在于健康植物的组织中、不形成明显侵染的一类微生物。内生菌可以促进宿主的生长、发育,增强对不良环境的抵抗力,甚至会促进宿主植物某些代谢产物的形成。深入研究中药内生菌,对研究中药的活性成分和栽培可能具有重要作用。内生真菌与宿主植物某些活性成分的形成有密切关系,对于不同地方的相同物种来说,其内生真菌类群是不同的,这可能是形成中药道地性的原因之一。

开唇兰小菇、石斛小菇、兰小菇等3 种小菇属内生真菌对兰科濒危药用植物铁皮石斛、金线莲的生长有促进作用。接种3 种内生真菌后,铁皮石斛苗的生长量高于对照3~5倍,石斛小菇、兰小菇对铁皮石斛原球茎增殖也有明显促进作用;接种3种真菌的金线莲苗,侧芽及侧根数均显著高于对照。在植物试管苗培养基中分别加入20%真菌菌丝及10 mg/L发酵液的醋酸乙酯提取物,结果发现3种菌的菌丝体及兰小菇的醋酸乙酯提取物能显著提高铁皮石斛原球茎的增殖率;石斛小菇的菌丝体对金线莲的生长和侧芽增殖有显著促进作用;开唇兰小菇和兰小菇的醋酸乙酯提取物分别对金线莲侧芽发生数及生长有显著促进作用,说明3 种内生真菌对铁皮斛、金线莲的促生长作用与菌丝内及分泌到菌丝外的代谢产物有关。

菌根是植物和真菌的共生体,是植物普遍存在的现象,菌根菌能促进菌根植物吸收矿质营养和水分,通过刺激或增加寄主植物产生次生代谢物,如抗生素、植保素、酚类化合物、苯丙烷类代谢酶系、木质素、过氧化物酶、水解酶等,提高寄主植物的抗病和抗逆能力。用VA菌根真菌Glomusm osseae 接种韭菜进行试验, 结果接种株比未接种株的株高、鲜质量、干质量、叶绿素质量分数都增加,抗冻性增强。但在中药栽培研究中应用菌根技术尚未引起人们足够的重视,报道的文献比较少[1]。

展望

我国有悠久的重要使用史,微生物应用于中药业有悠久的历史,中药炮制采用微生物发酵法具有一般方法所无法比拟的优势,可以为开发新药、提高药物疗效、降低药物毒副作用的研究提供新的手段,为中药的发展开辟新的研究空间。进行中药发酵研究也具有成熟的现实条件,应当成为我国中药现代化研究的内容之一,从而更好的为人类服务。发酵中药所包含的成分极其复杂,对其成分分离纯化有较大的难度,今后应加强纯化条件的研究,并科学地优化,提高纯化水平。同时,应加强新剂型的研究开发,针对不同的适应症开发出相适应的剂型。

发酵中药是现代生物技术和中药研究的完美结合,必将为中药新药研究开发开辟新的道路,拓展更广阔的发展空间,并在中药新药研究开发中占有越来越重要的地位。发酵中药还有利于推进中药现代化和国际化进程,提高我国中药行业的国际竞争力,为中药走向世界、造福全人类做出新的贡献。

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阮晓东, 张惠文, 蔡颖慧, 王艺纯, 孙冬雪, 黄 婷 微生物在中药生物转化中的应用[J] 中草药,2009,40(1):149~152

傅超美, 冷静 中药发酵的概况与关键技术[J] 药学专论,2008,17(15): 1~2

不属于中草药的是:辣木籽不属于药材,是一种天然的植物种子,益贝舒宁不属于中药, 诺农芷酸不属于中药。

这是一款降尿酸的膳食营养剂,这款产品的主要成分是是茯苓、玉米须、菊苣、海洋鱼低聚肽粉、针叶樱桃、栀子粉、维生素C等,其中菊苣含有腊醇、胆碱、酒石酸、苦味素等成分,可以起到清热解毒、利尿消肿、帮助促进尿酸代谢、抑制酸值的增长的作用,长期服用可以缓解痛风、修复关节、缓解关节疼痛,特别适合患有高尿酸症、痛风以及关节疼痛的朋友适当补充来调节身体健康。

益贝舒宁不属于中药,益贝舒宁是一款能够改善睡眠、提升睡眠质量的膳食补充剂,只能起到调理改善的效果并不具备治疗的功效。益贝苏宁的主要成分有山梨糖醇、酸枣仁、茯苓、百合、甘草、山药、y-氨基丁酸等,其中酸枣仁具有益气、养心、安神的作用,而y-氨基丁酸能够抑制中枢神经,能够起到安眠、镇静的作用。

 诺农芷酸不属于中药,它是一款膳食补充剂,建议大家要选择在正规的地方购买,而且还要注意具体的使用方法,正确的使用可以让皮肤变得更好。

中年人的身体比较脆弱。特别是到了一定年龄,身体容易出现各种问题。在中医中,当身体有问题时,中医药可以提供很大的帮助。相信很多人听说过天马这种中药。对中老年人来说,天麻是一种功效很强的中药。那么具体有什么功效呢?

一、天麻的主要功效

第一,天马含有非常丰富的碳水化合物和各种糖类,吃天马可以为身体提供能量。

第二,天麻在预防和治疗各种心血管疾病中起着重要作用。天麻可以增加脑血流量,降低脑血管阻力,轻轻收缩脑血管,增加冠状血管的流动,因此可以预防心血管疾病,另外天麻还可以降低血压,对预防心肌缺血有重要作用。

第三,天麻对人体的大脑神经系统也有明显的保护作用,女性吃天麻可以大大提高记忆力,提高视神经的效果。

第四,很多人知道天马也有一定的镇静效果。治疗神经衰弱患者的药物中含有天麻素,这种物质能抑制咖啡因引起的中枢兴奋作用,镇静效果非常好。

可以看出天马的用途真的很多,很受女性欢迎。但是天马的作用这么多,吃的时候也要注意很多,有哪些事项需要注意呢?

二、天马注意事项

天马有很多功效,但吃天马后会出现头晕、恶心等不良反应,甚至身体会出现水肿症状,吃天马后会出现脱发症状,因此服用天马前必须做好准备,咨询相关医护人员。

天马不适合炸太久。天马的主要成分天马粒受热后很容易挥发,炸太久容易挥发,失去效果,所以最好把天马切成薄片或磨成粉,炒出其他汤药后放入天马中。这样才能发挥天马的功效。

天马最好和其他药物或食材一起吃。单独使用天麻的效果不太好,单独服用天麻也要注意剂量,所以最好在医生的指导下服用。以上是天马行空的功效和使用的禁忌。对女性来说,天马是经常接触的中药,所以要慎重对待。

两者之间为共生关系。

天麻不能进行光合作用,其自身没有制造养料的能力,必须依靠密环菌作为其生长的营养来源,而天麻中所含物质也可促进密环菌丝的生长。

两者的共生关系有一个重要的基础,那就是绿色植物。密环菌依靠分解活着或已死去的绿色植物中的纤维素、木质素获得营养。所以在三者之间形成了一个天麻--密环菌--树木绿色植物之间构成了一个“食物链”。

天麻的栽培需要用树干培养菌材,所以栽培的场地应选择森林资源丰富的区域。

扩展资料:

天麻的栽培

1、栽培时间分为冬栽与春栽。冬栽为10月下旬到第二年的4月期间;春栽为3月至4月份,在高海拔地区可延期至5月份。

2、对栽培场地与土壤选择没有严格的要求,以透气渗水性强的沙质壤土为最佳。土壤pH值为5-6之间。

3、温度控制。天麻生长的适宜温度为土表下10cm达到13-25摄氏度为最好。

4、水分控制。冬季至清明前的土壤湿度控制在10%-20%,至4-6月份提高至60%左右,至7、8月份,应保水降温。

--天麻

--密环菌

种东北乌天麻还是可以种植一些湖北宜昌蜜环菌种,东北乌天麻的生长环境最好在1500-2000米的地方,海拔1200米以下的地方引种栽培,长势很差。因此,在高山冷凉的地方种植乌天麻,就能优质高产。而湖北宜昌蜜环菌生长需要较重的水分,但又不能长期渍水,蜜环菌材一年四季都可培养。所以种东北乌天麻还是可以种植一些湖北宜昌蜜环菌种。

乌天麻(学名:Gastrodia elata fglauca )亦称铁干天麻。植株高大,最高可达150~200厘米,茎秆灰褐色,有白色条斑。花黄绿色,花期6-7月。果实有棱形、倒楔形。块茎大的可达800克。根状茎椭圆形至卵状椭圆形,节较密,最长可达15厘米以上,单个最大重量达800克,含水量常在70%以内,有时仅为60%。主产中国贵州西部、云南,在云南栽培的天麻多为此变型种。乌天麻是名贵中药,用以治疗头晕目眩、肢体麻木、小儿惊风等症。

东北地区坐拥中国最大的平原,是资源丰富、文化繁荣、经济实力雄厚、以汉族为主多民族文化深度融合的区域,在全国占有重要地位。

湖北宜昌,古称夷陵,位于长江上中游节点处。建制历史在2000年以上。“宜昌”之名始于东晋,市的建制始于解放初,后历宜昌专员公署、宜昌地区等行政建制,于1992年形成辖县的市(地级市)体制的宜昌市,隶属于中国湖北省。到2001年辖三市(宜都市、当阳市、枝江市)、五县(远安县、兴山县、秭归县、长阳土家族自治县、五峰土家族自治县)、五区(夷陵区、西陵区、伍家岗区、点军区、猇亭区),总人口415万人,国土面积21万平方公里,市区面积4249平方公里,截止2013年年底,建成区面积达150平方公里,市区户籍人口120万人。

栽培技术

比起红天麻和黄天麻,乌天麻形态更好,折干率更高(3斤鲜品干一斤干品),而且质量好,价格也高出好几倍几倍。乌天麻之所以价格高,除了质量好外,一个主要因素就是因为野生分布的乌天麻很少,人工栽培的也不多。因此乌天麻有很高的种植价值,在种植乌天麻时,需要注意以下几点:

种植区域

最好在1500-2000米的地方,海拔1200米以下的地方引种栽培,长势很差。因此,在高山冷凉的地方种植乌天麻,就能优质高产。

种麻选择

乌天麻箭麻含水量较少,数量相同,形态大小一样的天麻,通常一斤红天麻是40-50个,而乌天麻只有30-40个。这样在引乌天麻种时既要称取重量,又要计算出种麻数量。种植一平方米红天麻需种麻是1斤,种植一平方米乌天麻,则要用种麻12斤。

培养蜜环菌材

在栓皮栎,麻栎,槲栎,樱桃树,花楸树,牛奶子,化香树等,这类树木质坚实耐腐,且树皮粗,不易脱落。这类树木栽培乌天麻最好。树木直径以5-12厘米粗,断筒时以50厘米长为宜。直径5厘米以下的树枝,可砍成5-10厘米长的短枝,均匀摆放在粗菌材的周围。菌材用量,按每平方米(或一窖)8-10根,重量25-30公斤,短枝8-10公斤计算准备。菌材培养时间春季3-4月,一窖用菌种二瓶,秋季8-9月,一窖用菌枝15斤。

栽培方法

播种时,种麻靠近菌材摆放,一根菌材上摆放6个种麻,菌材中间4个,两头各放一个。穴栽、行栽均可。栽培深度15厘米左右。栽培穴覆土时,用细土覆盖,须填实。做到种麻与土之间,菌材、菌枝与土之间无缝隙。栽培穴上面用阔叶树落叶、茅草、稻草,玉米秸等物覆盖,覆盖厚度2-3厘米。然后开好排水沟。

田间管理

(1)冬季和初春要用覆盖物保温,穴内10厘米以下土层温度维持在0-5℃七、八、九三个月一定要覆盖物或搭荫棚来调节温度,将温度控制在26℃以内。

(2)水分管理12-3月控湿防冻,土壤含水量30%,见墒即可。4-6月增水促长,土壤含水量60-70%,手握成团,落土能散。7-8月降湿降温,土壤含水量60%左右。9-10月控水抑菌,土壤含水量50%左右,手握稍成团,再轻捏能散。11月,土壤含水量30%左右,干爽松散。同时在生长季节注意清除杂草和防治病虫害。

收获

在霜降以后采挖,采挖时,应在天晴土爽之时,忌在雨天或雨天过后1-2天内采挖,采挖时,需准备两类筐、箱,一类专装种麻,一类专装商品麻。其中种麻及时播种或按要求运输贮藏。商品麻也要及时加工干制。

蜜环菌(学名:Armillaria mellea (Vahl) P Kumm):属于伞菌目、蜜环菌属,子实体一般中等大。菌盖直径4-14厘米,淡土**、蜂蜜色至浅黄褐色。老后棕褐色,中部有平伏或直立的小鳞片,有时近光滑,边缘具条纹。菌肉白色。菌褶白色或稍带肉粉色,老后常出现暗褐色斑点。菌柄细长,圆柱形,稍弯曲,同菌盖色,纤维质,内部松软变至空心,基部稍膨大。菌环白色,生柄的上部,幼时常呈双层,松软,后期带奶油色。

夏秋季在很多种针叶或阔叶树树干基部、根部或倒木上丛生。可食用,干后气味芳香,但略带苦味,食前须经处理,在针叶林中产量大。广泛分布于北半球的温带地区。

蜜环菌生长需要较重的水分,但又不能长期渍水。故场地应选在离水源较近、霉雨季节又不渍水的地方。

蜜环菌材一年四季都可培养。但由于是野外进行培养,既要考虑蜜环菌生长所需的适宜温度,又要考虑与天麻收获播种期相吻合,同时要考虑尽量不与农活争劳,不与粮、油、茶、桑等作物争地,还要考虑菌材埋于土中其营养损耗后的补充问题,故天麻仿野生栽培所需的蜜环菌材培养季节,一般选择早春3-4月、夏6-7月、秋末10-11月。

种东北乌天麻还是可以种植一些湖北宜昌蜜环菌种,东北乌天麻的生长环境最好在1500-2000米的地方,海拔1200米以下的地方引种栽培,长势很差。因此,在高山冷凉的地方种植乌天麻,就能优质高产。而湖北宜昌蜜环菌生长需要较重的水分,但又不能长期渍水,蜜环菌材一年四季都可培养。所以种东北乌天麻还是可以种植一些湖北宜昌蜜环菌种。这种种植一定要符合植物本身适应的环境,这样才能最大效果的发挥它的作用和价值。

1、蜜环菌的作用:蜜环菌对高血压、椎基底供血不足、美尼尔氏综合症、植物神经功能紊乱等疾病引起眩晕的病人效果较好;对肢体麻木、失眠、耳鸣、中风后遗症等也有疗效。

2、是什么:蜜环菌(学名:Armillaria mellea (Vahl) P Kumm):属于伞菌目、蜜环菌属,子实体一般中等大。菌盖直径4-14厘米,淡土**、蜂蜜色至浅黄褐色。老后棕褐色,中部有平伏或直立的小鳞片,有时近光滑,边缘具条纹。菌肉白色。菌褶白色或稍带肉粉色,老后常出现暗褐色斑点。菌柄细长,圆柱形,稍弯曲,同菌盖色,纤维质,内部松软变至空心,基部稍膨大。菌环白色,生柄的上部,幼时常呈双层,松软,后期带奶油色。 夏秋季在很多种针叶或阔叶树树干基部、根部或倒木上丛生。可食用,干后气味芳香,但略带苦味,食前须经处理,在针叶林中产量大。广泛分布于北半球的温带地区。 

3、人群:相应疾病人群。

4、培养方式:

蜜环菌菌丝体的培养有液体深层发酵和固体发酵两种方法。

深层发酵

工艺流程如下:试管斜面菌种培养(25℃下培养15天)→500毫升摇瓶种子培养(24-26℃下振荡培养15天)→500毫升摇瓶种子培养(24-26℃下振荡培养5-6天)→5000毫升摇瓶种子培养(24-28℃下振荡培养3-4天)→种子罐种子培养(24-28℃下通气培养4-5天)→发酵培养(24-28℃下通气培养7-8天)→发酵液过滤,烘干菌丝体,压片,或将发酵液浓缩制成糖浆。

固体发酵

斜面菌种培养、一二级摇瓶种子的培养法与深层发酵的基本相同。二级种子培养后,接入用玉米粉、 麦麸等配制的固体发酵料中,适温下培养30天,将菌丝体洗净、烘干、压片。 子实体的培育

可用段木栽培。将栎属树木锯成07-1米的 段木,在树皮上砍口至木质部。将人工培养的菌种或长有蜜环菌的朽木(菌材)碎片接入砍口内。挖30厘米深的坑作为菌床。将段木铺入床底,用腐殖土和锯木屑填满空隙,然后撒-层菌种。如此层层铺放三四层,最后覆土7-10厘米,经常保持湿润。长江中下游地区3-4月播种,10月收获。

不用段木,采用栽培过天麻的腐老菌材也可栽培蜜环菌。栽培过天麻一年以上的菌材逐层铺于培养床内约三四层,层间覆以疏松土壤或木屑,床面用草或土覆盖,经常保湿。春季建床,秋季可收菇。

5、培养技术:

季节

蜜环菌材一年 四季都可培养。但由于是野外进行培养,既要考虑蜜环菌生长所需的适宜温度,又要考虑与天麻收获播种期相吻合,同时要考虑尽量不与农活争劳,不与粮、油、茶、桑等作物争地,还要考虑菌材埋于土中其营养损耗后的补充问题,故天麻 仿野生栽培所需的蜜环菌材培养季节,一般选择早春3-4月、夏6-7月、秋末10-11月。

光照

蜜环菌丝(索)生长不需要直射阳光,但需要适宜的温度(过低休眠,过高生长缓慢甚至停止生长),该温度只有通过散射光照强弱来调控。一般选择荫蔽度较好的地方(以三阳七阴为好)。如果其它条件都较为合适,只是光照过强的话,则可人为创造条件,比如套栽玉米、 红苕等作物,利用其秆、蔓、茎、叶为其遮阳。

透气

场地四周不要郁蔽度太大。如在阔叶林中培养, 应选林边地带;如在种植高秆作物的行间套培,则应选较通风透气的田块,同时适当疏散高秆作物的脚叶和杂草等。

水分

蜜环菌生长需要较重的水分,但又不能长期渍水。故场地应选在离水源较近、霉雨季节又不渍水的地方。

土壤

应选择疏松、深厚、利水、偏酸、未施过化肥或人粪尿的土壤。实践证明,杂灌林间腐殖叶、土或砂质生荒土最好,种过玉米、红苕、 小麦、油菜等作物的土壤为次,田园土为差。

环境

要求无杂菌、无污染、无践踏。如松杉树林中,或堆积过松杉树干、树皮,以及生有 杂菌的菇筒,或蚁、鼠类危害严重,或近期施用过 化肥、人粪尿,或兽禽容易践踏等地方,都不适宜。

材料

树种要求除松、杉、柏、 樟等有油脂芳香气味和木质太硬的树,-般树如杨、柳、 桐、 桃、 梨、 竹、桑的主干和枝条均可用,但以白花栎、桦果、 板栗、 野樱桃树为好。

尺寸规格按栽培1平方米(窖)天麻计算,直径6-10厘米、长30厘米段材32筒,拇指粗、6-10厘米长枝条15-20kg。一般菌材两头蜜环菌生长茂密,菌棒适当短,在每1平方米栽培面积中,可增加长大天麻的穴位;添加枝条,可提高天麻种的成活率,同时起到增加营养、疏松土壤、调剂土壤酸碱度的作用。

坑窖

1、坑窖深浅根据场地土壤利用水性和光照强弱决定。如土壤粘重、板结、荫蔽度大、地下水位高,则应浅培,实行半坑培或地面堆培。如果砂性质地,地下水位低,光照较强,则要深培,但又不能太深,-般摆放3层段材(枝条),2层在地面以下,-层在地面以上为宜,如果段材较细,则3层段材可在地面以下。

2、坑窖宽窄根据栽培模式和套栽作物决定。例如,在16米宽的玉米地里或在16-20米宽的桑园里培材,培材坑宽约80厘米,段材摆成双排式;如在1米宽的梯屯或作物地里培材,培材坑宽50厘米,段材摆成单排式。

方法

1、一步培材法:即3-5月(或6-7月)用菌种培材,到秋季起控天麻时,用培养好的菌材(菌棒、菌枝)直接伴栽天麻。此法可采用活动菌床和固定菌床+活动菌床两种形式。活动菌床培材方法:①先用01-02%多菌灵或3%石灰水溶液浸泡段材、枝条(30分钟左右),进行杀菌。待材料表面水干,即砍鱼鳞口。每筒段材砍二面口,每面砍口1-2个。②点播菌种时,先用小刀或起子将鱼鳞口掰开,然后将菌种分成手指头大的块状颗粒放入鱼鳞口中,菌种不能弄得太烂,也不可用力将菌种往鱼鳞口内按压。③摆放菌材时,按 鱼鳞口的方向,正一节,倒一节,再正一节……往坑中平行单排或双排摆入-层已点菌种的段材,每节间隔2-3指宽。摆好第-层后,往每节间隔和坑内空隙处撒放一半枝条,然后在每节段材两头和枝条上面点播适量菌种,并盖-薄层栽培土,将段材和枝条刚好掩住。最后浇洒适量水,使段材、枝条和薄土均匀打湿。照此方法,往坑中摆放第二层菌材、枝条、菌种后,覆3厘米左右栽培土,再浇洒少量水。最后盖15-18厘米栽培土,做成龟背形。

固定菌床+活动菌床形式培材,即底层采用固定菌床,上层采用活动菌床,培材方法:①将段材砍小鱼鳞口,每筒砍两面,每面砍3-4个口;②按固定+活动菌床菌材排式摆放底层段材、枝条和菌种;③向坑窖内填充培养土,稍微盖过段材、枝条,然后浇洒清洁水,将段材、枝条、土壤打湿;④再按活动菌床方法,在其上摆入(上层)段材、枝条,点放菌种、浇水、盖土、遮物(盖土15-20厘米)。此法培材时间较长,发菌充分,但部分菌材、菌枝腐烂,菌索老化,并且伴栽天麻时,部分菌索因菌材翻动而损坏。

2、两步培材法:即3-5月(或6-7月),先采用-步培材法,用 菌种培材,到7-9月将已培养好的菌材(菌枝)作母枝,再加进-半新鲜段材、枝条,进行扩大培材。此时采用固定菌床法(只是不再点入菌种),将菌床建成播种天麻的固定播床。此法的优点:①先按前面要求的尺寸规格,将材料断筒、剁枝,并放入天麻蜜环菌生长素溶液中浸泡4小时以上,让其充分吸收水分和补充营养后,捞起沥干水滴,砍鱼鳞口,并往鱼鳞口内点放菌种。②然后按固定+活动菌床菌材排式摆放底层段材、枝条,点放菌种,填充栽培土(以盖过段材、枝条为度),度浇洒适量清洁水。③再与底层段材对齐,摆放上层段材、枝条,并按图3菌种穴处点放菌种块和天麻尾部紧靠菌种块,以使枝条、麻种及早接菌。④在其上填充6-10厘米厚的栽培土,铺盖-层农用地膜,以便保温和防冬季雨雪水入坑烂麻。⑤最后,在地膜上面覆10-15厘米厚盖土(成龟背形)。⑥如冬季持续高温(10厘米以下土温超过10℃),则应扒去盖土,揭开地膜,让其透气、降温,下雨前,再重新覆盖。如菌材、土壤严重干枯,则需浇洒适量水,使其保持轻微湿度。

管理

保湿不管采用哪种培材方法,都必须浇足定植水、发菌水、 催索水。所谓定植水,就是摆放段材、枝条前向坑窖内灌水,以窖内水分不能再渗为度。摆放段材、枝条时,每摆-层材料、掩- 薄层土后,浇适量的清洁水,把材料和掩土浇湿,保证菌种块尽快定植成活。管理期间,务必适时浇足 发菌水和催索水。①菌材入窖培养-段时间(冬春1个月左右,夏秋10-15天),菌种已经定植,开始发菌,此时需要扒去表层盖土,检查段材、枝条的水分情况。如果只是土壤有-定湿度,而段材、枝条表皮及两头干燥,或菌种变黑、松散,甚至干枯,菌丝萌发稀少,说明缺水严重,需要将整个窖面表土扒去微见材料,向窖内材料重浇水,再重新覆好。②过一段时间,一般点菌种处已部分长出菌索,此时需和前-样操作,重浇一次水。特别是夏季高温期,后“二道水”切切不可少,否则会出现“烧菌”或严重感染(主要是白癍病),直接影响菌材培养效果。

防害主要防白蚁危害。菌材培养后需经常查窖,如培材时间不长,白蚁刚刚进入窖内,危害较轻,可用50克敌敌畏,兑水25-50千克,配成药液,结合浇“ 发菌水”进行灌杀。培材时间较长,材料上已大部分布满菌丝,长出菌索,此时可将菌材(菌枝)翻出来,直接用敌敌畏喷杀,或入水池中闷杀后,移地再培。

纯化

在平面培养基上初分离出的菌种,经选择后再进行纯化培养以得到质量优趋的纯菌种,称作纯化(也叫提纯)。由于受分离方法、培养基质及菌株自身生活力、生长势、发育程度等因素的影响,往往不同菌株的生态特性、品质优劣上有-些变异,因而需要再次纯化培养。

菌种的纯化工作同样需在无菌条件下进行,当平面培养基上接种点处刚产生菌索分枝时,立即用接种铲选择其中生长势旺盛而幼嫩的菌索部分,截取3-4毫米小段,尽量少带培养基,尤其是培养基变红色时,应挑取升出培养基表面的菌索段,移入PDA斜面培养基试管中央,置于25℃条件下恒温培养,经几次提纯转接,菌种无杂,生长正常,即为纯化的蜜环菌母种。

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