那么难,怎么回答呢
黄曲霉毒素是一种肝脏毒素,对人和许多动物都有极强的致癌性,其中黄曲霉毒素B1毒性最大,致癌性最强。因此,食品中黄曲霉毒素B1的检测是非常重要的。下面介绍的分离及测定黄曲霉毒素的方法——薄层色谱法(TLC)是常规分析中常用的一种重要方法。
一、 原理
样品中黄曲霉毒素B1经提取、浓缩、薄层分离后,在波长365nm紫外光下产生蓝紫色荧光,根据其在薄层上显示荧光的最低检出量来测定含量。
二、 试剂
(一) 三氯甲烷。
(二) 石油醚(沸程30℃~60℃或60℃~90℃)。
(三) 甲醇。
(四) 苯。
(五) 乙腈。
(六) 无水乙醚或乙醚经无水硫酸钠脱水。
(七) 丙酮。
以上试剂在试验时先进行1次试剂空白试验,如不干扰测定即可使用,否则逐一检查进行重蒸。
(八) 苯-乙腈混合液:量取98mL苯,加2mL乙腈,混匀。
(九) 硅胶G:薄层色谱用。
(十) 三氟乙酸。
(十一) 无水硫酸钠。
(十二) 黄曲霉毒素B1标准溶液。
1. 贮备液的制备:精密称取1mg~12mg的黄曲霉毒素B1标准品,先加入2mL乙腈溶解后,再用苯稀释至100mL,避光,置于4℃冰箱保存。该标准溶液约为10μg/mL。用紫外分光光度计测此标准溶液的最大吸收峰的波长及该波长的吸光度值,并按下式计算此标准溶液的浓度。 式中:X1黄曲霉毒素B1标准溶液的浓度,μg/mL;A——测得的吸光度值;312——黄曲霉毒素B1的分子量;19800——黄曲霉毒素B1在苯-乙腈混合液中的摩尔消光系统;f——使用仪器校正因素;用c(K2Cr2O7)=00004mol/L,c(K2Cr2O7)=0002mol/L,c(K2Cr2O7)=00001mol/L三种溶液,以1cm石英杯,在最大吸收峰的波长(接近350mm)处用硫酸溶液(05mL硫酸+1000mL水)作空白,测以上三种溶液的吸光度(A),并按式E=A/c计算平均摩尔消光系数,再按式f=3160/E求出使用仪器的校正因素。若f大于095或小于105,则使用仪器的校正因素可略而不计。
根据计算,用苯-乙腈(98+2)混合液调到标准溶液浓度恰为10μg/mL,并用分光光度计核对其浓度。
2. 纯度的测定:取5μL(10μg/mL)黄曲霉毒素B1标准溶液,滴加于薄层板上,用甲醇-三氯甲烷(4+96)与丙酮-三氯甲烷(8+92)展开剂展开,在紫外灯下观察荧光的产生:只有单一的荧光点,无其他杂质荧光点,原点上没有任何残留的荧光物质。
(十三) 黄曲霉毒素B1标准使用液:用苯-乙腈混合液准确稀释标准溶液至每毫升相当于02μg及004μg黄曲霉毒素B1。
三、 仪器
(一) 分光光度计。
(二) 烘箱。
(三) 索氏抽提器。
(四) 电热恒温水浴。
(五) 电动振荡器。
(六) 玻璃板:5cm×20cm
(七) 薄层板涂布器。
(八) 展开槽:内长25cm宽6cm、高4cm。
(九) 紫外光灯:100W~125W,带有波长365nm滤光片。
(十) 微量注射器。
四、 操作步骤
由于月饼类糕点中含有大量油脂,为了使测定结果更准确,必须先除去油脂后再进行测定。因黄曲霉毒素易溶解在油脂中,为了达到既要除去油脂便于测定,又要保证样品中含有的黄曲霉毒素不被油脂带走而造成测定结果偏差。因此,应先将黄曲霉毒素从油脂中“赶”出来,然后再除去油脂。根据黄曲霉毒素不溶在乙醚或石油醚中,而油脂易溶于其中的特性,用乙醚或石油醚除去油脂就可达到目的。
(一) 去油脂
称取20g样品,放入滤纸筒内,筒两端塞以少许脱脂棉,置于索氏抽提器内,在250mL油脂瓶内加入180mL-200mL石油醚,于70℃~80℃水浴上加热回流提取油脂,抽提6h以上。除油脂完毕后,将滤纸筒取出放在瓷盘中避光自燃挥干备用,回收石油醚。
(二) 提取
将滤纸筒内除去油脂后的样品转入250mL
有效祛痘5种方法
1红蓝光
红蓝光属于照一照就能变美的光疗美肤项目。顾名思义,它分为红光和蓝光两种。
蓝光能杀菌,控油,调节角化,作用于皮肤表层。
红光能抗炎,促进修复,作用于瘢痕组织。
红蓝光联合使用可以治疗痘痘,痤疮,痘印,激素依赖性皮炎,脂溢性皮炎,敏感肌肤等皮肤问题。
欢迎分享,转载请注明来源:品搜搜测评网