LB培养基保存

胰化蛋白胨的品质更好，价格贵点。

牛肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基。

而lb培养基则是一种近年来用于培养基因工程受体菌（大肠杆菌）的常用培养基。

两者都属于半合成培养基。肉膏蛋白胨培养基的主要成分是牛肉膏、蛋白胨和nacl。而lb培养基的主要成分是胰化蛋白胨、酵母提取物和nacl。

1、成分的不同：

LA是LB培养基里加入了氨苄青霉素，所以LA培养基比LB培养基多了一种氨苄青霉素原料。

2、应用的对象不同：

由于LB多了一种原料，其中氨苄青霉素的浓度根据的质粒是松弛型还是严谨型来加的。

培养基供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有水、氮源、无机盐、碳源、生长因子（维生素、氨基酸、碱基、抗菌素、色素、激素和血清等）等。

扩展资料：

1、液体培养基：80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。

2、固体培养基：一类配制成的固体状态的基质。根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。

3、半固体培养基：在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。

4、脱水培养基：又称预制干燥培养基，指含有除水分外的一切成分的商品培养基。

5、选择性培养基：一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。

6、鉴别培养基：一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。

-培养基

培养基（Medium）是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。那么LB培养基是什么培养基？LB一般被解释为Luria-Bertani，然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法，这个名字来源于英语lysogeny broth，即溶菌肉汤。LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基之一。

LB培养基是一种培养基的名称，是微生物学实验中最常用的培养基，生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求可分为液体培养基和固体培养基。

LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称普通培养基，含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。

酵母提取物：酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡**粉末，其中氨基酸含量30%以上，总蛋白50%以上，核苷酸10%以上，广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。

胰化蛋白胨：一种优质蛋白胨，是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化，浓缩干燥而成的白色粉末，含有丰富的氮源、氨基酸等。

酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压)，其次是提供无机盐。

在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。

由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。

LB培养基用途

用于一般细菌培养，特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。

LB培养基使用原理：

蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。

LB培养基配制方法

配制每升培养基，应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入：胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解。用5mol/LNaOH调pH至70。用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。

LB固体培养基1L和液体一样，加15g琼脂粉，一定要在温度降下之前加好抗固态LB培养基生素，并且倒好板。

LB固体培养基倒板

1配制：100ml LB培养基加入15g琼脂粉。

2抗生素的加入：高压灭菌后，将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中，待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素，以免温度过高导致抗生素失效，并充分摇匀。

3倒板：一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后，打开盖子，在紫外下照10-15分钟。

4保存：用封口胶封边，并倒置放于4℃保存，一个月内使用。 配400ml的话成分按比例减少就行了，pH还是要按规定的。

LB培养基设计不同的离子对大肠杆菌生长状况的影响

以下方法仅供参考：

1首先养几个平板固体培养基培养的大肠杆菌，保证这些细菌来自于同一个克隆;

2采用液体培养并用分光光度计测定浊度来评价大肠杆菌生长。

3盐可选择氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化锌、铵盐、磷酸盐等;

4浓度差别可做，可不做;

5因为分光光度计的准确性有一定要求，培养时间就不能太长，最多8小时;

根据这些条件设计实验就容易了。大体上是，先配制好各种液体培养基;然后从1中挑一个菌落放到一个起始的基本LB液体培养基，培养到稍微有点浑时，就可以向各种培养基中加同样体积的细菌;最后就是测定OD值了。记得每个培养基做3个重复管。

以配制一升培养基为例：

应该在950 ml去离子水中加入:

胰蛋白胨10g

酵母提取物5g

NaCl 10g

摇动容器直至溶质溶解。用5mol/LNaOH调pH至70，用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌21min。

扩展资料：

配置原则：

1、选择适宜的营养物质

就微生物主要类型而言，有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、原生动物、藻类及病毒之分，培养它们所需的培养基各不相同。

在实验室中常用牛肉膏蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基)培养细菌，用高氏I号合成培养基培养放线菌，培养酵母菌一般用麦芽汁培养基，培养霉菌则一般用查氏合成培养基。

2、营养物质浓度及配比合适

培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好，营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需，浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用。

另外，培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累，其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲，碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值，有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。

3、控制pH条件

培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的最适pH条件各不相同，一般来讲，细菌与放线菌适于在pH7-75范围内生长，酵母菌和霉菌通常在pH45-6范围内生长。

值得注意的是，在微生物生长繁殖和代谢过程中，由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累，会导致培养基pH发生变化，若不对培养基pH条件进行控制，往往导致微生物生长速度下降或(和)代谢产物产量下降。

4、控制氧化还原电位(redox potential)

不同类型微生物生长对氧化还原电位(F)的要求不一样，一般好氧性微生物在F值为+01V以上时可正常生长，一般以+03一+04V为宜，厌氧性微生物只能在F值低于+01V条件下生长，兼性厌氧微生物在F值为+01V以上时进行好氧呼吸，在+01V以下时进行发酵。

5、原料来源的选择

在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分，特别是在发酵工业中，培养基用量很大，利用低成本的原料更体现出其经济价值。

6、灭菌处理

要获得微生物纯培养，必须避免杂菌污染，因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言，更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌，一般培养基用105kg/cm2，1213℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。

在配制培养基过程中，泡沫的存在对灭菌处理极不利，因为泡沫中的空气形成隔热层，使泡沫中微生物难以被杀死。因而有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生，或适当提高灭菌温度。

参考资料：

LB培养基中用的是琼脂

琼脂，在固体培养时琼脂是最好的固体剂，琼脂本身并不提供任何营养，它是一种高分子的碳水化合物，从红藻等海藻中提取，仅溶解于热水，成为溶胶，冷后（40°C以下）即凝固为固体状成凝胶。通常所说的“煮”培养基，就是使琼脂溶解于热水（90°C以上）中。

琼脂的用量一般在4—10/1之间。新买来的琼脂要先试一下它的凝固能力，一般只要它能稳定地凝固住就不要多加。通常培养室温度较低时可适当少放一点，温度高时要多放一点。琼脂以颜色浅，透明度好，洁净的为上品。近来有些厂家生产琼脂粉，它比条状的使用更方便。同一厂家的产品，往往粉状的比条状的用量要少。在避免“玻璃化现象”（vitrification）时，常增加琼脂用量。

加入琼脂所做成的固体培养基有不少优点，如操作简便，对培养物的支持、通气较易解决。便于经常观察研究等。但也有其缺点，如培养物于培养基的接触（即吸收）面积小，各中养分与激素在琼脂中扩散较慢，并且各自扩散速度不同，使养分的补充慢，成分比例上有变化，同时培养物排出的一些代谢废物，聚集在吸收表面上，浓度高，抑制组织的代谢活性，加之琼脂不可避免含有杂质，这样就使培养物在固体培养基上的生长速度显著低于在液体培养基中的速度。

琼脂糖 从琼脂中提取的、由不同类型吡喃半乳糖聚合而成的多糖。在生物化学和分子生物学研究中用于凝胶过滤、凝胶电泳和凝胶扩散实验。

为什么大肠杆菌在lb培养基上无法形成很大的菌落

可能原因有很多，需要现场具体情况具体分析。例如，菌液中的细菌已经死亡，操作不当，培养条件不对，培养基质量问题等等。大肠杆菌的营养要求实际上并不高，使用普通营养条件的培养基，就可以比较容易地将其培养出来。

一般大肠杆菌都使用LB 培养基，

其成分如下：

胰化蛋白胨 10g/L

酵母提取物 5g/L

NaCl 10g/L

如果是固体的培养基，就需要再加入15克琼脂粉

pH 74~76

实验室里，配好之后就去灭菌锅里灭菌就好了。

看看另外一个网友的相似的答案，希望对你有启发:)

LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。其中酵母提取物为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源，而NaCl提供无机盐。

在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。

1．称量：准确称取各成分。蛋白胨05g，酵母提取物025g，氯化钠05g，加水50ml。配置LB固体培养基时还需加1g琼脂。

2．溶化：加热熔化，用蒸馏水定容到50mL。配置LB固体培养基时还需加琼脂，整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。

3．调pH：将pH调至61。

4．灭菌：在两个250ml的三角瓶中分别装入50ml LB液体培养基和50ml LB固体培养基，加上棉塞。将培养皿用牛皮纸包好，放入灭菌锅内，1kg压力灭菌15min。

5．倒平板：灭菌后，待固体培养基冷却至60℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是：

①将灭过菌的培养皿放在火焰旁，右手拿装有培养基的三角瓶，左手拔出棉塞；

②右手拿三角瓶，使三角瓶的瓶口迅速通过火焰；

③用左手将培养皿打开一条稍大于三角瓶口的缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖；

④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。

倒过来放置的目的是防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。向培养皿中转移已灭菌的培养基时，也不要把培养基沾在皿壁上。否则，空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内培养基。