为什么微生物需要牛肉膏

微生物生长繁殖所需的营养物质主要有水、碳源、氮源、无机盐和生长因子等。

碳源是合成菌体成分的原料，也是微生物获取能量的主要来源。整体上看来，微生物可以利用的碳源范围极广，从大类上说，可以分为有机碳源和无机碳源两大类，凡必须利用有机碳源的微生物就是异养微生物，凡能利用无机碳源的微生物就是自养微生物。糖类是最广泛利用的碳源。

氮源主要是供给合成菌体结构的原料，很少作为能源利用。与碳源相似，微生物作为一个整体来说，能利用的碳源种类十分广泛。某些微生物（如固氮菌）能利用空气中分子态的氮或利用无机氮化物如铵盐、硝酸盐合成有机氮化物。多数致病菌则必须供给蛋白胨、氨基酸等有机氮化物才能生长。

无机盐主要可为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素。微生物需要的无机盐类很多，主要有P、S、K、Na、Ca、Mg、Fe等，其主要功能为构成菌体成分；调节渗透压；作为某些酶的成分，并能激活酶的活性等。

而牛肉膏富含碳源、氮源、无机盐等各种微生物成长必须的营养物质，当然，类似其他的富含营养物质的亦是微生物需要。如各类成品培养基：营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、改良马丁培养基等等。

（1）黑色小颗粒的防止 实际生产中成品经常带有黑色小颗粒，大大影响了产品的感观。其原因一方面由于部分辅料预处理不好，如淀粉应提前经温水融化后才能放入反应釜，倘若淀粉直接加入后，经过高温反应就会结为小黑块；另一方面由于实际生产中对于美拉德反应的时间和温度有时控制不好，造成产品反应过度，产生黑色小颗粒。因此，在生产中应提前对部分辅料进行预处理；在进行美拉德反应时，严格按照要求控制反应温度与时间；同时在灌装管道口设置60目筛网，对成品进行过滤，可改善产品感观。

（2）酶的选择与应用 酶解是牛肉浸膏生产关键环节，酶的选择及酶解时间、温度直接影响到产品的质构、风味等。因此，生产中应选用具有较高热稳定性的木瓜蛋白酶。木瓜蛋白酶是番木瓜乳液中的一种巯基蛋白酶，在PH值为5时稳定性最好。一般来说调节PH值为5～7，与其他蛋白酶相比，具有较高的热稳定性。在实际生产中，酶解前一定要对物料调节PH值，同时控制温度为50℃～55℃。

（3）微生物指标的控制 在生产过程中，只要严格控制各个生产环节，成品的微生物指标可以达到要求。但牛肉浸膏在常温下运输与销售，同时产品含水量相对较高，这就容易形成微生物超标的隐患，因此选择合适剂量对产品进行辐照，可以在低温下灭菌，从而延长产品的保质期。

（1）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，表格中能充当碳源的成分是牛肉膏．

（2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是平板划线法和稀释平板涂布法，在接种过程中，接种针或涂布器的灭菌方法是 灼烧灭菌．

（3）如果培养基上细菌数目过多连成一片，可能的原因是菌液浓度过高或操作过程不是无菌操作，还可能是接种时没有把细菌分散开，采取的措施有 可以通过增大稀释倍数解决 （或培养过程中被杂菌污染；严格无菌操作程序．或利用接种针划线时，划下一个区域前没有对接种针灭菌处理；每划一个新的区域都要对接种针进行灭菌处理）

（4）对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养，则大肠杆菌的增长呈现S 型曲线增长．

（5）筛选土壤中的纤维素分解菌的培养基应以纤维素为唯一碳源，本培养基配方中，牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源，属于通用培养基，所以不能用来分离分解纤维素的菌；在筛选纤维素分解菌时，常加入的一种染料是刚果红，该染料可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，所以可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌．

故答案应为：

（1）氮源      牛肉膏   （2）平板划线法        稀释平板涂布法       灼烧灭菌

（3）菌液浓度过高     可以通过增大稀释倍数解决 （或培养过程中被杂菌污染；严格无菌操作程序．或利用接种针划线时，划下一个区域前没有对接种针灭菌处理；每划一个新的区域都要对接种针进行灭菌处理）

（4）S      （5）不能   刚果红   透明圈

PDA主要培养真菌；牛肉膏-蛋白胨主要培养细菌；高氏1号主要培养放线菌

成分的话。从碳源。氮源。能源 。生长因子 ，ph等方面来分析了。

各个成分肯定是针对要培养出的微生物而设置的。

要培养细菌就要有适合细菌生长的ph、细菌需要的营养类型。

市面上的假牛肉是用其他的肉来代替牛肉。

我们大家都知道像鸡肉鸭肉或者是猪肉的价格都是比较低的，所以说他们就会用这样的肉。

然后再加上牛肉味的香料来腌制，做出来的这种肉色泽和口感都跟牛肉差不多，所以说我们普通的消费者一般是很难分辨出来的。

半固体：主要用于观察微生物的运动，操作简单方便快捷

半固体培养基，如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中，就制成了半固体培养基。以琼脂为例，它的用量在02~07%之间。这种培养基有时可用来观察微生物的动力，有时用来保藏菌种。

区别

固体培养基是在培养液中加了琼脂（琼脂，一种凝固剂，在44度以下都呈凝固状）。这种培养基常用于鉴定菌种和计数。

半固体培养基是在培养液中加入少量的凝固剂（如02%～05%的琼脂）。这种培养基常用于观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定等。

配方

牛肉膏蛋白胨半固体琼脂

(用于培养细菌,肠道致病菌检验)

成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂3~5g,蒸馏水1000mL,pH74±02。

制法:将各成分溶解于蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，于20 -25℃条件下以1mol/LNaOH溶液用pH计校正pH 74±02,分装小试管中，分装至试管高度1/4左右为宜,于01MPa灭菌15~20min,直立凝固备用。

醋酸铅半固体培养基

(用于硫化氢试验)

成分:pH74的牛肉膏蛋白胨半固体琼脂100mL,硫代硫酸钠025g,10%醋酸铅水溶液lmL。

制法:将牛肉膏蛋白胨半固体琼脂培养基100mL加热溶化，待冷至60℃时加人硫代硫酸钠025g,调pH72,分装于三角瓶中,007MPa灭菌20min后，待冷至55~60°C,加入1mL无菌的10%醋酸铅水溶液，混匀后，倒入灭菌试管中。

硫酸亚铁半固体培养基

(用于硫化氢试验)

成分:牛肉膏3g、酵母浸膏3g、蛋白胨10g、硫酸亚铁0 2g、硫代硫酸钠03g、氯化钠5g、琼脂12g,蒸馏水1000mL, pH74。

制法:将各成分加热溶解，校正pH,分装试管,007MPa高压灭菌20min,取出直立,待其凝固。

（1）计算 根据配方计算出实验中各种药品所需要的量，然后再分别称量。

（2）称量 准确称取各种成分。一些不易称量的成分如牛肉膏，可用玻璃棒取出放硫酸纸上称量，然后连同硫酸纸一起放入烧杯中。

（3）溶解 向烧杯内加入所需的水量，将牛肉膏用水洗下后，取出硫酸纸弃去。加热搅拌全溶后稍放冷。

（4）调pH值 用酸度计或精密pH试纸测定其pH值，并用10%NaOH调至所需pH值，必要时用滤纸或脱脂棉过滤。一般比要求的pH高出02，因为高压蒸汽灭菌后，pH常降低。

（5）分装 根据不同需要，可将配好的培养基分装入配有棉塞的试管或三角瓶内（附图1-1）。注意分装时避免培养基挂在瓶口或管口上引起杂菌污染。如液体培养基，应装试管高度的1/4左右；固体培养基装试管高度的1/5左右；装入三角瓶的量以三角瓶容量的一半为限。

（6）包扎 试管扎成捆。试管和三角瓶的棉塞外用硫酸纸和牛皮纸包扎，纸上表明培养基的名称、配制日期等。

（7）灭菌 培养基用01Mpa（15lb/in）高压蒸汽灭菌15~20min，