常用细胞培养基成分

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动物细胞培养必需的溶液

平衡盐水（BSS）：Hanks 液和Earle液是常用的BSS基础溶液。PH调整液：37%、56%、74%的NaHCO3溶液、HEPES溶液（二羟乙基哌嗪乙烷磺酸）

细胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、胶原酶溶液。

抗生素溶液：

1)青、链霉素，每毫升培养液含100U青霉素和100ug链霉素。

2)卡那霉素：终浓度为50ug/ml培养液。

3）制霉菌素：浓度25U/ml，小瓶分装，每瓶一次用完。

常用的动物血清主要有牛血清和马血清。牛血清分为胎牛血清和犊牛血清，前者来源少，价格高；后者要求刚产下尚未哺乳的小牛，因为哺乳后的小牛血清中可能含有更复杂的成分。血清中已知的成分主要有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等。蛋白质主要是白蛋白和球蛋白。

氨基酸是细胞合成蛋白质的基本成分，氨基酸中有12种是细胞本身不合成的，必须由培养液提供。激素有胰岛素、生长激素和多种生长因子如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、增殖刺激因子(MSA)、类胰岛素生长因子(IGFl、IGF2)等。

水解乳蛋白、胶原是另外两种较好的天然培养基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解产物，呈蛋**粉末状，富含氨基酸。一般配制成0．5%溶液，微酸性。胶原是从动物真皮中提取的，具改善细胞表面特性促使其附着生长的作用。

合成培养基

1951年厄尔开发了供动物细胞体外生长的人工合成培养基(MEM)。合成培养基的种类相当多。合成培养基成分已知，便于对实验条件的控制。但与天然培养基相比，有些天然的未知成分尚无法用已知的化学成分所替代，因此，细胞培养中使用的基础合成培养基还必须加入一定量的天然培养基成分，以克服合成培养基的不足。最普遍的作法是加入小牛血清。

动物血清成分复杂，各种生物大小分子混合在一起，有些成分至今尚未搞清楚。血清对细胞生长很有效，但后期对培养产物的分离、提纯以及检测造会成一定困难。另外高质量的动物血清来源有限，成本高，限制了它的大量使用。

无血清培养基不加动物血清，在基础培养基中加入细胞生长有效因子，激素等。

1 无机营养物

无机营养物即无机盐是植物生长发育所必需的，根据植物对无机盐需要的多少，将其分为大量元素和微量元素。

11 大量元素

大量元素在植物体内含量占干物重的01-10%，其浓度一般大于05mmol/L，包括氮（N）、磷（P）、钾（K）、钙（Ca）、镁（Mg）、硫（S），若加上碳（C）、氢（H）、氧（O），则有9种元素。

在离体培养中，其C、H、O三元素是从人工加入的糖类获得的，H、O元素也可以从培养基所含的水分中获得，而其余6种矿质元素要从加入的适量的无机盐类来获取。

无机氮常以硝态氮（如KNO3）和铵态氮（如NH4NO3）两种形式供应，多数培养基都是二者兼而有之。

12 微量元素

植物所需的微量元素包括铁（Fe）、硼（B）、锰（Mn）、铜（Cu）、锌（Zn）、钼（Mo）、氯（Cl）等。

植物对其需要量极微，在植物体内含量占干物重的001%以下，起生长发育所需的浓度一般小于05mmol/L，稍多则产生毒害。

碘（I）虽不是植物生长的必需元素，但几乎在所有的培养基中都含有碘元素，有些培养基还加入了钴（Co）、镍（Ni）、钛（Ti）、铍（Be），甚至铝（Al）等元素。

13 铁盐

铁是用量较多的一种微量元素，是许多重要氧化还原酶的组成成分，在植物叶绿素的合成过程中起到重要的作用。

若以硫酸铁和氯化铁为供铁源，培养基的pH值会达到52以上，形成氢氧化铁沉淀，使培养物无法吸收而出现缺铁症，故在培养基配制时，常用硫酸亚铁和EDTA二钠配成螯合态铁，成为有机态铁方被培养物吸收和利用；也可用EDTA铁盐，作为铁的供应源。

这些元素参与培养物机体的建造，构成植物细胞中的核酸、蛋白质、叶绿体、酶系统和生物膜所必需的元素。

2 有机营养成分

在配制培养基时，不仅要加入无机营养成分，还要加入一定量的有机营养物质，以利于培养物的生长和分化。

21 糖类

在组织快繁中，被培养的培养物大多不能进行光合作用，能进行的也不能满足其对糖类的需求，因此必须在培养基中添加糖作为碳源和能源，同时对维持培养基一定的渗透压也有重要作用。

最重要的碳源是蔗糖，其浓度一般为2%-3%。葡萄糖和果糖也是较好的碳源。在大规模工厂化生产中，为了降低生产成本，可用市售的白砂糖代替蔗糖，也有同样的效果。

22 维生素

维生素常以辅酶形式参与生物催化剂——酶系的活动，以及参与细胞的蛋白质代谢、脂肪代谢、糖代谢等重要生命活动。

在组培中以B族维生素为主，常使用盐酸硫胺素（维生素B1）、盐酸吡哆醇（维生素B6）、烟酸（维生素B3）、钴胺素（维生素B12）、叶酸（维生素Bc）、生物素（维生素H）、抗坏血酸（维生素C）等，一般使用浓度为01-10mg/L。

23 肌醇（环己六醇）

在组培中，肌醇本身不直接促进培养物的生长，可有助于活性物质作用的发挥，提高维生素B1的效果，参与碳水化合物代谢、磷脂代谢和离子平衡作用，从而促进培养物的生长和胚状体及芽的形成。在配制培养基时，肌醇通常使用浓度为50-100mg/L。

24 氨基酸

在培养基中要加入一种或数种氨基酸，最常使用的是甘氨酸（Gly），有时用到丝氨酸（Ser）、酪氨酸（Tyr）、谷氨酰胺（Gln）、天冬酰胺（Asn）等，作为重要的有机氮源。

甘氨酸能促进离体根的生长，对其培养物的生长有良好的促进作用，通常用量为2-3mg/L。

有时也采用水解乳蛋白（LH）或水解络蛋白（CH），它们是牛乳用酶法等加工而成的水解产物，是含有约20种氨基酸的混合物，通常用量为500mg/L。

25 有机附加物

在组培中，人们发现在培养基中添加一些天然的有机物或提取物对培养物的增殖和分化有明显的促进作用。

例如椰乳（CM），一般用量为10%-20%（或100-150mg/L）；酵母提取物为05%；番茄汁为5%-10%；香蕉泥为100-200mg/L；马铃薯用量为150-200g/L，去皮和去芽后，煮30分钟，再过滤，即可加入培养基中。

马铃薯、香蕉泥具有较大的pH缓冲作用。这些天然有机物的作用是为培养物提供一些必要的营养成分、生理活性物质和生长激素等。但由于这些天然有机物成分较复杂，且难确定，含量又不稳定，所以应尽量避免使用。

3 植物生长调节物质

在组培中，为了促进培养物生长和器官分化，其培养基除加入营养物质外，还必须加入一种或多种植物生长调节物质、生长调节物质（植物激素）是培养基中的关键物质，在组培中起着决定的作用。一般常用生长素和细胞分裂素类。

我们将在后期专门安排一期介绍植物生长调节物质的在组培中的作用。

31 生长素类

组培中，生长素类的作用是诱导愈伤组织的形成，胚状体的产生以及试管苗的生根，更重要的是细胞分裂素配成一定的比例诱导腋芽及不定芽的产生。

生长素类常用的有吲哚乙酸（IAA）、吲哚丁酸（IBA）、萘乙酸（NAA）、2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）。2,4-D一般用于初代培养，启动细胞脱分化，而再分化阶段往往不用2,4-D，而用NAA、IBA、IAA；在生根诱导中一般多用IBA。

32 细胞分裂素类

在进行组培中，常将细胞分裂素和生长素配合使用，即细胞分裂素与生长素的比例大时，促进芽的形成，这时细胞分裂素起到主导作用；比例小时，则有利于根的形成，这时生长素起主导作用。培养基中的细胞分裂素与生长素之间的比例是决定器官分化的关键。

细胞分裂素类常用的有：激动素（KT）、6-苄氨基嘌呤（6-BA/BA/BAP）、玉米素（ZT）、2-异戊烯腺嘌呤（2-ip）、吡效隆（CPPU）和噻重氮苯基脲（TDZ）。但在组培中通常使用人工合成的6-BA和KT，因他们性能稳定且价格适中。

4 琼脂

依据态相不同，培养基分为固体培养基和液体培养基，其区别在于加入琼脂与否，若加入琼脂便形成胶体状态的固体培养基，而不加则为液体培养基。

琼脂是最好的固化剂，他是一种由海藻中提取的高分子碳水化合物，在培养基中本身不具营养，它的主要作用是使培养基在常温下凝固，一般使用量为06-10%。

培养基的pH值偏酸，高压灭菌时间过长，温度过高均会影响其凝固力。琼脂一般以色浅、透明、洁净为好，新买来的琼脂要先试验一下它的凝固能力，以便确定其适宜的用量。

5 活性炭

在培养基中加入活性炭（AC），其目的主要是利用其吸附能力，减少一些有害物质的不利影响，同时也创造暗环境，对某些植物诱导生根有利。

一般认为活性炭之所以有强大的吸附能力，主要是通过氢键、范德华力等作用力，把有毒物质从外植体周围吸附掉。

活性炭除了有吸附作用外，在一定程度上还降低光照强度，从而减轻褐变。

但是，活性炭对物质的吸附无选择性，既吸附有毒酚类的同时，又吸附培养基中的有利物质，如生长调节物质、维生素B6、叶酸、烟酸等，并且在不同植物的组培中有效程度不一。因此，在决定使用活性炭时应先试验再确定是否采用，通常使用浓度01%-05%。

血琼脂培养基是一种用于培养和识别细菌的营养琼脂培养基。它是一种广泛使用的培养基，常用于临床诊断和病原菌鉴定等领域。血琼脂培养基能够促进多种细菌的生长，以及快速检测好氧和厌氧菌的生长。那么，血琼脂培养基可以用来分离什么菌呢？

血琼脂培养基可以用来分离许多不同种类的菌。其中包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，如链球菌、肺炎球菌、金**葡萄球菌、肠球菌等。此外，通常使用的血琼脂培养基还可以分离厌氧菌，如产气荚膜梭菌和厌氧菌属等。其中，产气荚膜梭菌和厌氧菌属是常见的造成肠胃感染的细菌，因此相应的检测方法也显得尤为重要。

血琼脂培养基是一种富含营养成分的琼脂培养基。它包含了多种维生素、氨基酸和其他重要的生长因子，以支持各种不同类型的菌的生长。此外，血琼脂培养基还含有红细胞或血浆，可以提供细菌生长所需的各种营养物质，进一步促进了各种不同类型的菌的生长。

除其广泛的应用领域外，血琼脂培养基还具有一定的局限性。例如，该培养基不能有效处理被抗生素所抑制的菌种和非常规细菌等。此外，如果培养基中所含的红细胞或血浆过多，也会对细胞的生长产生不良影响。因此，在实际应用中，我们需要根据具体情况进行适当的调整，以获得较为准确的测试结果。

总之，血琼脂培养基是一种常用的细菌培养基。它广泛应用于临床诊断和病原菌鉴定等领域。该培养基可以分离多种不同类型的菌，包括维持人体健康的一些细菌，以及某些病原菌。当然，血琼脂培养基在使用时也存在一定的局限性。因此，我们需要相应地进行合理的调整，以获得更为准确和可靠的测试结果。

培养基的成分是营养物质、水、凝固物质、抑制剂、指示剂。营养物质，营养物质提供细菌生长繁殖所需的能量、合成菌体的原料以及激活细菌酶的活性和调节渗透压等作用，细菌需要的营养物质主要有氮源、碳源、无机盐及生长因子，例如，蛋白胨、肉浸液、血液、生长因子。

培养基的主要成分特点

水是良好的溶剂，细菌所需要的营养物质必须先溶于水，营养的吸收与代谢均需有水才能进行，制备培养基常用不含杂质的蒸馏水或离子交换水，凝固物质，即赋形剂，制备固体培养基时，必须加入凝固物质，如琼脂、明胶、卵白蛋白及血清等。

理想的凝固物质应具有以下特性，本身不被细菌利用，在微生物生长温度范围内保持固体状态，凝固点的温度对微生物无害，不因消毒灭菌而破坏，透明度好，黏着力强，目前认为最合适的凝固物质是琼脂。

这个我只知道

3动物细胞培养的培养基

糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血浆、血清

还有哺乳动物胚胎培养液

无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清

植物组织培养的培养基中肯定要有植物激素、微量元素

至于其他的不要求掌握额

1、采用全自动血液培养仪(BacT/ALERT 3D)进行需氧和厌氧培养并分离菌株。

2、看瓶身标注的字体，含量蓝绿色盖子为需氧瓶，而红紫色盖子为厌氧瓶。

血培养的临床意义：血培养是采集患者血液标本并接种到培养瓶中，用以发现、识别引起菌血症或真菌血症的病原微生物，是诊断菌血症和真菌血症的基本而重要的方法。血培养结果对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义。

扩展资料：

作用：

了解引起菌血症的不同途径有助于诊断和解释血培养结果。菌血症通常来源于以下部位的感染，其中泌尿生殖道为25%，呼吸道为20%，脓肿为10%，外科伤口为5%，胆道感染为5%，其他已知部位的感染为10%，未知部位的感染为25%。

采血量和血培养的数量

采血量：对从菌血症或真菌菌血症病人血培养中获得的微生物，每个培养瓶抽取的血量是唯一重要的变量。对婴幼儿和儿童，一般采血1~5ml用于血培养。成人血培养的标本量为10ml，血液和肉汤比一般推荐为1:5~10。

血培养的数量：血培养的数量和采血时间关系到菌血症的病理生理学，一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养。一般而言，采集血培养都应该在使用抗生素之前进行，推荐同时采集2~3份血。

-血培养

-血培养基