转化大肠杆菌涂平板,可以用多大速度离心

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大肠埃希氏菌(Escherichia coli)通常被称为大肠杆菌,是Escherich在1885年发现的,在相当长的一段时间内,一直被当作正常肠道菌群的组成部分,认为是非致病菌。直到20世纪中叶,才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性,尤其对婴儿和幼畜(禽),常引起严重腹泻和败血症,它是一种普通的原核生物,根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为6类:肠致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠黏附性大肠杆菌(EAEC)和弥散粘附性大肠杆菌(DAEC)。大肠杆菌属于革兰氏阴性细菌(G-)。

形状特征

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大肠杆菌(Escherichia coli,Ecoli) 革兰氏阴性短杆菌,大小05×1~3微米。周生鞭毛,能运动,无芽孢。能发酵多种糖类产酸、产气,是人和动物肠道中的正常栖居菌,婴儿出生后即随哺乳进入肠道,与人终身相伴,几乎占粪便干重的1/3。国家规定,每升饮用

大肠杆菌

水中大肠杆菌数不应超过3个。大肠杆菌的抗原成分复杂,可分为菌体抗原(O)、鞭毛抗原(H)和表面抗原(K),后者有抗机体吞噬和抗补体的能力。根据菌体抗原的不同,可将大肠杆菌分为150多型,其中有16个血清型为致病性大肠杆菌,常引起流行性婴儿腹泻和成人肋膜炎。大肠杆菌是研究微生物遗传的重要材料,如局限性转导就是1954年在大肠杆菌K12菌株中发现的。莱德伯格(Lederberg)采用两株大肠杆菌的营养缺陷型进行实验,奠定了研究细菌接合方法学上的基础,以及基因工程的研究。

大肠杆菌(E coli)为埃希氏菌属(Escherichia)代表菌。一般多不致病,为人和动物肠道中的常居菌,在一定条件下可引起肠道外感染。某些血清型菌株的致病性强,引起腹泻,统称致病性大肠杆菌。

该菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强,55℃经60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。在自然界的水中可存活数周至数月,在温度较低的粪便中存活更久。胆盐、煌绿等对大肠杆菌有抑制作用。对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感,但易耐药,是由带有R因子的质粒转移而获得的。

主要特点

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大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌,周身鞭毛,能运动,无芽孢。主要生活在大肠内。

1、大肠杆菌是细菌,属于原核生物;具有由肽聚糖组成的细胞壁,只含有核糖体简单的细胞器,没有细胞核有拟核;细胞质中的质粒常用作基因工程中的运载体。

2.大肠杆菌的代谢类型是异养兼性厌氧型。

3.人体与大肠杆菌的关系:在不致病的情况下(正常状况下),可认为是互利共生(一般高中阶段认为是这种关系);在致病的情况下,可认为是寄生。

4.在培养基培养时无需添加生长因子,向培养基中加入伊红美蓝遇大肠杆菌,菌落呈深紫色,并有金属光泽,可鉴别大肠杆菌是否存在。

5.大肠杆菌在生物技术中的应用:大肠杆菌作为外源基因表达的宿主,遗传背景清楚,技术操作简单,培养条件简单,大规模发酵经济,倍受遗传工程专家的重视。目前大肠杆菌是应用最广泛,最成功的表达体系,常做高效表达的首选体系。

6.大肠杆菌在生态系统中的地位:假如它生活在大肠内,属于消费者,假如生活在体外则属于分解者。

7.它的基因组DNA为拟核中的一个环状分子,同时可以有多个环状质粒DNA。

8.大肠杆菌细胞的拟核有1个DNA分子,长度约为4 700 000个碱基对,在DNA分子上分布着大约4 400个基因,每个基因的平均长度约为1 000个碱基对。

基因型

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大肠杆菌基因型的基本概念

野生大肠杆菌(Ecoli)的基因组DNA中有470万个碱基对(bp),内含4288个基因。Ecoli基因组中还包含有许多插入序列,如λ-噬菌体片段和一些其他特殊组分的片段,这些插入的片段都是由基因的水平转移和基因重组而形成的,由此表明了基因组具有可塑性。利用大肠杆菌基因组的这种特性对其进行改造,使其中的某些基因发生突变或者缺失,从而给大肠杆菌带来可以观察到的变化,这种观察到的特征叫做大肠杆菌的表现型(Phenotype),把引起这种变化的基因构成叫做大肠杆菌的基因型(Genotype)。具有不同基因型的菌株表现出不同的特性。这些不同基因型特性的菌株在基因工程的研究和生产中具有广泛的应用价值。

大肠杆菌的主要基因型

大肠杆菌的主要基因型包括:与基因重组相关的基因型(如recA、recB和recC等)、与甲基化相关的基因型(如dam、dcm、mcrA、mcrB和C、mrr和hsdM等)、与点突变相关的基因型(如mutS、mutT、dut、ung和uvrB等)、与核酸内切酶相关的基因型(如hsdR、hsdS和endA等)、与终止密码子相关的基因型(如supE和supF)、与抗药性相关的基因型(gyrA、rpsl和Tn5等)及其他与能量代谢、氨基酸代谢、维生素代谢等相关的基因型。基因工程中,经常使用的大肠杆菌几乎都来自于K-12菌株,也使用由B株和C株来源的大肠杆菌。

耐酸机制

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研究人员在新研究中证实,L-谷氨酰胺通过酶促反应释放氨,使得大肠杆菌获得了耐酸性。

在三种已知的ARs中,AR1的功能机制仍然不清楚。相比之下,AR2和AR3的分子机制得到了更深入地解析。AR2包含有一个氨基酸反向转运蛋白GadC,负责细胞外L-谷氨酸(Glu)与细胞内γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid ,GABA)的交换。两个Glu脱羧酶GadA和GadB将Glu转变为GABA。与AR2相似,AR3也具有两个组件:反向转运蛋白AdiC和精氨酸脱酸酶AdiA。AR2或AR3一次完整的循环可将细胞质中的质子排出至细胞外环境中,由此提高细胞内pH,促进细菌在酸性环境下存活。

全面了解细菌AR对于有效的临床预防及治疗均有重要的意义。因为所有的食物传播性致病菌都必须通过极酸性胃,了解细菌在pH值为2-3的环境下的生存机制极其重要。当前,研究人员对于这些机制的了解还远远不够。

在这项研究中,研究人员鉴别了一个新型大肠杆菌耐酸性系统,证实其依赖于谷氨酰胺酶YbaS和氨基酸反向转运蛋白GadC。这种YbaS和GadC可被酸性pH激活,且只在pH值小于等于60时才能适当发挥功能。通过吸收L-谷氨酰胺(Gln),大肠杆菌利用YbaS将之转化为L-谷氨酸(Glu),伴随释放气态氨。游离氨中和质子,导致酸性环境下细胞内pH增高。GadC则负责细胞外Gln 与细胞内Glu 交换。通过这一耐酸系统,确保了大肠杆菌在极酸性环境下生存。

人体关系

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大肠杆菌是与我们日常生活关系非常密切的一类细菌,学名称作“大肠埃希菌”,属于肠道杆菌大类中的一种。它是寄生在人体大肠和小肠里对人体无害的一种单细胞生物,结构简单,繁殖迅速,培养容易,它是生物学上重要的实验材料。在婴儿刚出生的几小时内,大肠杆菌就经过吞咽在肠道内定居了。正常情况下,大多数大肠杆菌是非常安分守己的,他们不但不会给我们的身体健康带来任何危害,反而还能竞争性抵御致病菌的进攻,同时还能帮助合成维生素K2,与人体是互利共生的关系。只有在机体免疫力降低、肠道长期缺乏刺激等特殊情况下,这些平日里的良民才会兴风作浪,移居到肠道以外的地方,例如胆囊、尿道、膀胱、阑尾等地,造成相应部位的感染或全身播散性感染。因此,大部分大肠杆菌通常被看作机会致病菌。

致病物质

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1、定居因子(Colonizationfactor,CF):也称粘附素(Adhesin),即大肠杆菌的菌毛。致病大肠杆菌须先粘附于宿主肠壁,以免被肠蠕动和肠分泌液清除。使人类致泻的定居因子为CFAⅠ、CTAⅡ(ColonizationfactorantigenⅠ、Ⅱ),定居因子具有较强的免疫原性,能刺激机体产生特异性抗体。

大肠杆菌具有很多毒力因子,包括内毒素,荚膜,〣型分泌系统,黏附素和外毒素等。(〣型分泌系统是指能向真核靶细胞内输送毒性基因产物的细菌效应系统。约由20余种蛋白质组成。)

2、黏附素能使细菌紧密黏着在泌尿道和肠道的细胞上,避免因排尿时尿液的冲刷和肠道的蠕动作用而被排除。大肠杆菌黏附素的特点是具有高特异性。包括:定植因子抗原〡,〢,〣;集聚黏附菌毛〡和〣;束形成菌毛;紧密黏附素;P菌毛;侵袭质粒抗原蛋白和Dr菌毛等。

3、外毒素大肠杆菌能产多种的外毒素,包括:志贺毒素〡和〢;耐热肠毒素〡和〢;不耐热肠毒素〡和〢。此外,溶血素A在尿路致病性大肠杆菌所致疾病中有重要作用。

4、肠毒素:是肠产毒性大肠杆菌在生长繁殖过程中释放的外毒素,分为耐 热和不耐热两种。

不耐热肠毒素(Heatlabileenterotoxin,LT):对热不稳定,65℃经30分钟即失活。为蛋白质,分子量大,有免疫原性。由A、B两个亚单位组成,A又分成A1和A2,其中A1是毒素的活性部分。B亚单位与小肠粘膜上皮细胞膜表面的GM1神经节苷脂受体结合后,A亚单位穿过细胞膜与腺苷酸环化酶作用,使胞内ATP转化cAMP。当cAMP增加后,导致小肠液体过度分泌,超过肠道的吸收能力而出现腹泻。LT的免疫原性与霍乱弧菌肠毒素相似,两者的抗血清交叉中和作用。

耐热肠毒素(Heatstableenterotoxin,ST):对热稳定,100℃经20分钟仍不被破坏,分子量小,免疫原性弱。ST可激活小肠上皮细胞的鸟苷酸环化酶,使胞内cGMP增加,在空肠部分改变液体的运转,使肠腔积液而引起腹泻。ST与霍乱毒素无共同的抗原关系。

肠产毒性大肠杆菌的有些菌株只产生一种肠毒素,即LT或ST;有些则两种均可可产生。有些致病大肠杆菌还可产生vero毒素。

5、其他:脂胞壁多糖的类脂A具有毒性,O特异多糖有抵抗宿主防御屏障的作用。大肠杆菌的K抗原有吞噬作用。

病原体

大肠杆菌O157:H7是大肠杆菌的其中一个类型,该种病菌常见于牛只等温血动物的肠内。这一型的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素,并可能导致肠管出现严重症状,如带血腹泻。

大肠杆菌

大肠杆菌血清学分型基础(即其抗原) 大肠埃希菌主要有三种抗原:O抗原,为细胞壁脂多糖最外层的特异性多糖,由重复的多糖单位所组成。该抗原刺激机体主要产生IgM类抗体(出现早,消失快)。K抗原,位于O抗原外层,为多糖,与细菌的侵袭力有关。K抗原分为A,B,L三型。H抗原,位于鞭毛上,加热和用酒精处理,可使H抗原变性或丧失。H抗原主要刺激机体产生IgG类抗体,与其他肠道菌基本无交叉反应。

表示大肠杆菌血清型的方式是按O:K:H排列,例如:O111:K58(B4):H2

杆菌危害

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认知:

大肠杆菌是原核生物,构造相对简单,遗传背景清晰,培养操作容易,因此也常常被作为基因工程的对象加以利用:研究者常常将外源基因导入质粒,将质粒整合入大肠杆菌基因,这样,大肠杆菌就能够表达基因重组后的蛋白(例如胰岛素,某些疫苗等)了。此外,大肠杆菌还常常作为模型生物参与细胞学实验。

虽然绝大多数大肠杆菌与人类有着良好合作,但是仍有少部分特殊类型的大肠杆菌具有相当强的毒力,一旦感染,将造成严重疫情。其中最具代表性的就是代号为O157:H7的大肠杆菌,它是EHEC(肠出血性大肠杆菌)家族中的一员。提起O157:H7,可谓劣迹斑斑:美国在1982、1984、1993年曾三次发生O157:H7的爆发性流行;日本曾在1996年爆发过一次波及9000多人的大流行。O157:H7感染后的主要症状正是出血性腹泻,严重者可伴发溶血尿毒综合征(HUS),危及生命。由于O157:H7危害较大,且可经食物和饮用水在人群中广泛传播,因此食品卫生主管部门已将O157:H7列为常规检测项目。此次在德国肆虐的O104也是一种EHEC,感染症状类似O157:H7,且毒力更为猛烈。

症状:

人体感染EHEC后,会发生严重的痉挛性腹痛和反复发作的出血性腹泻,同时伴有发热、呕吐等表现,多为EHEC产生的毒素所致。某些严重感染者毒素随血行播散造成溶血性贫血,红细胞、血小板减少;肾脏受到波及时还会发生急性肾功能衰竭甚至死亡。通常情况下大肠杆菌对多种抗生素敏感,但耐药的菌株也不少见。此次爆发于德国的O104由于可产生分解抗生素的酶,故治疗更为棘手——一旦采取抗生素治疗,反倒会引起细菌产生更多的志贺样毒素(SLT),加重病情。因此对于我们普通人而言,对付此类病菌感染的最佳手段还是预防:不吃不熟的肉类食品如生鱼,生牛肉(O157因对牛低毒而很容易被牛携带,因此食用未熟的牛肉易导致O157感染)等,食用生鲜瓜果前要彻底清洗,遇有腹泻尽早上。

潜伏期

通常为3至4日,但亦会长达9日。

导致疾病

1、肠道外感染

多为内源性感染,以泌尿系感染为主,如尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎。也

大肠杆菌显色培养基

可引起腹膜炎、胆囊炎、阑尾炎等。婴儿、年老体弱、慢性消耗性疾病、大面积烧伤患者,大肠杆菌可侵入血流,引起败血症。早产儿,尤其是生后30天内的新生儿,易患大肠杆菌性脑膜炎。

2、急性腹泻

某些血清型大肠杆菌能引起人类腹泻。其中肠产毒性大肠杆菌会引起婴幼儿和旅游者腹泻,出现轻度水泻,也可呈严重的霍乱样症状。腹泻常为自限性,一般2~3天即愈,营养不良者可达数周,也可反复发作。肠致病性大肠杆菌是婴儿腹泻的主要病原菌,有高度传染性,严重者可致死。细菌侵入肠道后,主要在十二指肠、空肠和回肠上段大量繁殖。此外,肠出血性大肠杆菌会引起散发性或暴发性出血性结肠炎,可产生志贺氏毒素样细胞毒素。

根据其致病机理不同,分为以下几种类型。

肠产毒性大肠杆菌(EnterotoxigenicEcoli,ETEC):引起婴幼儿和旅游者腹泻,出现轻度水泻,也可呈严重的霍乱样症状。腹泻常为自限性,一般2~3天即愈。营养不良者可达数周,也可反复发作。致病因素是LT或ST,或两者同时致病。有些菌株具有定居因子,常见者为O6:K15:H16、O25:K7:H42。鉴定ETEC主要测定大肠杆菌肠毒素,血清型有一定参考意义。

肠致病性大肠杆菌(EnteropathogenicEcoli,EPEC):是婴儿腹泻的主要病原菌,有高度传染性,严重者可致死;成人少见。细菌侵入肠道后,主要在十二指肠、空肠和回肠上段大量繁殖。切片标本中可见细菌粘附于绒毛,导致刷状缘破坏、绒毛萎缩、上皮细胞排列紊乱和功能受损,造成严重腹泻。EPEC不产生LT或ST。有人报道,EPEC可产生一种由噬菌体编码的肠毒素,因对Vero细胞(绿猴肾传代细胞)有毒性,故称VT毒素。VT毒素的结构、作用与志贺氏毒素相似,具有神经毒素、细胞毒素和肠毒素性。鉴定EPEC可根据临床表现与血清型。

EIEC的多数菌株无动力,生化反应和抗原结构均近似痢疾杆菌,应予注意。EIEC可引起豚鼠角结合膜炎,临床上可借此协助鉴定EIEC。

举例

病原体:大肠杆菌O157 : H7是大肠杆菌的其中一个类型,该种病菌常见于牛只等温血动物的肠内。这一型的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素,并可能导致肠管出现严重症状,如带血腹泻。

病征:患者可能出现各种症状,包括严重的水泻、带血腹泻、发烧、腹绞痛及呕吐。情况严重时,更可能并发急性肾病。5岁以下的儿童出现该等并发症的风险较高。若治疗不当,可能会致命。

传播途径

肠出血性大肠杆菌感染是一种人畜共患病。凡是体内有肠出血性大肠杆菌感染的病人、带菌者和家畜、家禽等都可传播本病。动物作为传染源的作用尤其重要,较常见的可传播本病的动物有牛、鸡、羊、狗、猪等,也有从鹅、马、鹿、白鸽的粪便中分离出O157H7大肠杆菌的报道。其中以牛的带菌率最高,可达16%,而且牛一旦感染这种细菌,排菌时间至少为一年。

可通过饮用受污染的水或进食未熟透的食物(特别是免治牛肉、汉堡扒及烤牛肉)而感染。饮用或进食未经消毒的奶类、芝士、蔬菜、果汁及乳酪而染病的个案亦有发现。此外,若个人卫生欠佳,亦可能会通过人传人的途径,或经进食受粪便污染的食物而感染该种病菌。

患病或带菌动物往往是动物来源食品污染的根源。如牛肉、奶制品的污染大多来自带菌牛。带菌鸡所产的鸡蛋、鸡肉制品也可造成传播。带菌动物在其活动范围内也可通过排泄的粪便污染当地的食物、草场、水源或其他水体及场所,造成交叉污染和感染,危害极大。

1. 通过食物传播

O157H7大肠杆菌主要是通过污染食物而引起人的感染,O157H7大肠杆菌的致病能力和对胃酸的抵抗力均较强,对细胞的破坏性大。因此很多国家将O157H7大肠杆菌引起的感染性腹泻归为食源性疾病。在世界各地报告的爆发中,约有70%以上与进食可疑食物有关。

动物来源的食物,如牛肉、鸡肉、牛奶、奶制品等是O157H7大肠杆菌经食物传播的主要因素,尤其是在动物屠宰过程中这些食物更易受到寄生在动物肠道中的细菌污染。另外蔬菜、水果等被O157H7大肠杆菌污染也可造成大肠杆菌感染爆发。

1982年和1993年在美国发生的O157H7大肠杆菌感染性腹泻的爆发,就是由于食用了某快餐连锁店的汉堡包引起的。研究证明,汉堡包的牛肉馅被O157H7大肠杆菌污染。据专家估计100个菌就可使人发病,而1个汉堡包的牛肉馅里可含有1000个细菌,足以使人得病。

英国曾发生一起与食用蔬菜有关的O157H7感染爆发。

1996年5-8月份在日本发生的世界上最大的一起由O157H7大肠杆菌引起的爆发流行,可疑食物是牛肉和工业化生产的蔬菜。

1991、1993、1996年在美国发生的O157H7感染爆发被证明了食用被污染的苹果汁和苹果酒。

1998年,中国黑龙江省卫生防疫站首次从市售的熟猪头肉中分离出EHEC,表明中国也存在由该菌引起食物中毒的危险。

2. 通过水传播

1989年,在美国密苏里州发生的一起O157H7大肠杆菌感染爆发,共发病240多人。调查表明,该起爆发可能为水源性,是由于饮用水被污染所致。加强饮用水源的消毒管理后,疫情得到了控制。

1989年12月-1990年1月在加拿大某镇也发生了一起O157H7大肠杆菌感染爆发。在2000多名居民中,发病243人,发病率116%。经证实也为水源性爆发。原因为天气寒冷,供水管道堵塞,导致市政供水系统受污染。

除了饮用水受到污染可造成感染外,其他被污染的水体如游泳池、湖水及其他地表水等都可造成传播。这也进一步说明了O157H7在外环境中的生存能力较强,引起人类感染可能并不需要在外环境中进行增菌。

1991年在美国的俄勒冈州发生的一起O157H7大肠杆菌感染爆发,怀疑是湖水被粪便污染,感染者在湖水里游泳时不慎喝了湖水而被感染。

对1992年在苏格兰发生的一起O157H7大肠杆菌感染的调查发现,一个患病儿童在一个家庭用的大水盆里玩耍,污染了盆里的水,结果用过同一盆水的儿童都先后发病。

1996年在日本大阪发生O157H7大肠杆菌感染爆发后,鉴于O157H7大肠杆菌可经水传播,有关当局关闭了大阪市的23个公共游泳池和515所学校的游泳池。

3.密切接触传播

人与人之间的密切接触也可引起O157H7大肠杆菌的传播。

一个人感染了O157H7大肠杆菌后,常通过密切接触的方式把细菌传染给其父母、子女、兄弟姐妹或其他与之密切接触的人如老师、朋友、亲戚等。

在里,也发生了多起由于护士照料病人而感染了O157H7大肠杆菌的报告,并且得到了病原学上的支持。

值得指出的是:在人与人之间的传播过程中,二代病人症状往往较轻,很少出现出血性肠炎。可能是由于接触传播时感染剂量小或经人传代后细菌毒力减弱。

在上述三条传播途径中,以食物传播为主。有人对美国自1982年起发生的100多起 O157H7爆发流行的感染途径进行统计,发现食源性的占71%(52%为牛肉制品,大部分与快餐店中的汉堡包有关;14%为水果、蔬菜;5%来源于未知食品)、16%为人与人接触感染、12%为水源性感染。

防治方法

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预防方法

1.保持地方及厨房器皿清洁,应该经常使用消毒柜消毒餐具器皿(最好做到“餐具要消毒”),并把垃圾妥为弃置。

2.保持双手清洁,经常修剪指甲。

大肠杆菌平板培养基

3、进食或处理食物前,应用肥皂及清水洗净双手,如厕或更换尿片后亦应洗手。

4.食水应采用自来水,并最好煮沸后才饮用。

5.应从可靠的地方购买新鲜食物,不要光顾无牌小贩。不要吃不干净的东西

6.避免进食高危食物,例如未经低温消毒法处理的牛奶,以及未熟透的汉堡扒、碎牛肉和其它肉类食品。

7.烹调食物时,应穿清洁、可洗涤的围裙,并戴上帽子。

8.食物应彻底清洗。

9.易腐坏食物应用盖盖好,存放于雪柜中。

10.生的食物及熟食,尤其是牛肉及牛的内脏,应分开处理和存放(雪柜上层存放熟食,下层存放生的食物),避免交叉污染。

11.雪柜应定期清洁和融雪,温度应保持于摄氏4度或以下。

12.若食物的所有部分均加热至摄氏75度,便可消灭大肠杆菌O157 : H7;因此,碎牛肉及汉堡扒应彻底煮至摄氏75度达2至3分钟,直至煮熟的肉完全转为褐色,而肉汁亦变得清澈。

13.不要徒手处理熟食;如有需要,应戴上手套。

14.食物煮熟后应尽快食用。

15.如有需要保留吃剩的熟食,应该加以冷藏,并尽快食用。食用前应彻底翻热。变质的食物应该弃掉。

16 体质弱、衰老、出差、旅游等应激状态下,可以补食乳酸菌,预防大肠杆菌的发病。

治疗方法

感染大肠杆菌O157 :H7的临床治理方法主要属支持性治疗。若患者出现腹泻,补充失去的水分及电解质十分重要。约50%有肾并发症的患者在出现急性症状时需要特别治疗或输血。可使用抗革兰氏阴性菌细菌药物,但部分药物无效

研究进展

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2014年5月,研究人员发现,大肠杆菌和耐甲氧西林金**葡萄球菌等致病菌能够在机舱中生存数日。在飞机上,人们时常触摸的表面——例如扶手、塑料折叠餐桌和遮光帘—— 十分危险,这里的病菌最为繁盛。耐甲氧西林金**葡萄球菌能在椅背后的口袋布上生存1周,大肠杆菌在扶手上能待4天。相关研究结果发表于美国微生物学协会 会议[1] 。

应用影响

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在生物技术中的应用

在这里必须指出的是,出于生物安全考虑,生物工程用的菌株是在不断筛选后被挑选出的菌株。这些菌株由于失去了细胞壁等重要组分,所以在自然条件下已无法生长。甚至普通的清洁剂都可以轻易地杀灭这类菌株。这样,即便由于操作不慎导致活菌从实验室流出,也不易导致生化危机。此外,生物工程用的菌株基因组都被优化过,使之带有不同基因型(例如β半乳糖苷酶缺陷型),可以更好的用于分子克隆实验

真核基因在大肠杆菌中表达,必须有合适的表达载体(Vector),常用载体:pBV220,pET系统

目的基因在大肠杆菌中表达的情况:

大肠杆菌更适合原核基因的表达,外源基因表达产量与单位体积产量是正相相关的,而单位体积产量与细胞浓度和每个细胞平均表达产量呈正相相关细胞浓度与生长速率,外源基因拷贝数和表达 产物产量之间存在动态平衡,单个细胞的产量又与外源基因拷贝数,基因表达效率,表达产物的稳定性和细胞代谢负荷等因素有关。

例如,科学家们把人的胰岛素基因送到大肠杆菌的细胞里,让胰岛素基因和大肠杆菌的遗传物质相结合。人的胰岛素基因在大肠杆菌的细胞里指挥着大肠杆菌生产出了人的胰岛素。并随着它的繁殖,胰岛素基因也一代代的传了下去,后代的大肠杆菌也能生产胰岛素了。这种带上了人工给予的新的遗传性状的细菌,被称为基因工程菌。

对养殖业的影响

当前大肠杆菌病给养禽业带来的损失越来越大,其难于治愈、死亡率高、极易复发等临床特点,正困扰着基层广大养殖户和兽医工作者。那么大肠杆菌病为何如此难于根治呢?通常多考虑的是抗菌素耐药、继发或并发感染、药物靶部位等因素,其实还忽视了一个引起包心包肝、气囊炎、败血症、肠炎及发热等常见临床病症的另一个重要元凶——大肠杆菌死亡溶解释放的内毒素。

内毒素是由革兰氏阴性菌(大肠杆菌、沙门氏菌、鸭疫里默氏杆菌等)细胞壁的成分,是一种脂多糖。内毒素对机体有很强的毒性,可引起宿主发热、毒血症、败血症、心包炎、肝周炎、气囊炎、输卵管炎、肾炎,甚至休克死亡。由于内毒素只有菌体死亡溶解后才能被释放,因此在治疗革兰氏阴性菌感染的疾病时,如果单纯大量应用抗菌素,会使细菌死亡并释放更多的内毒素,使上述症状得不到缓解,甚至出现内毒素性休克,而使死亡增加。因此当前控制细菌病尤其是大肠杆菌病,不但要抑杀细菌,更要清除内毒素,使用清除毒素抑杀细菌的方式有以下几种:使用乳酸菌等生物制剂,抑制大肠杆菌繁殖,消除毒素;投饮中药方剂,抑菌加强肝脏肾脏代谢;抗生素加VB、VC等抑菌和加强代谢。

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郡氏水溶性涂料---Hobby Color Aqueous Paint 编号Index 汉语色彩名 H1 白 H2 黑 H3 红 H4 黄 H5 蓝 H6 绿 H7 棕 H8 银 H9 金 H10 铜 H11 哑白 H12 哑黑 H13 哑红 H14 橙 H15 亮蓝 H16 黄绿 H17 Cocoa棕 H18 钢/黑铁 H19 粉 H20 消光漆/哑色 H21 降白 H22 灰 H23 明红 H24 橙黄 H25 天蓝 H26 亮绿 H27 革 H28 金属黑/青铁 H29 鲑粉 H30 罩光漆/透明色 H31 白绿 H32 田野灰1 H33 苹果褐 H34 奶黄 H35 钴蓝 H36 暗绿 H37 木棕 H38 铁红/赤铁 H39 紫 H40 消光剂/哑色添加剂 H41 苍绿 H42 蓝灰 H43 葡萄酒红/栗色 H44 肉 H45 淡蓝 H46 翠绿 H47 红棕 H48 田野灰2 H49 紫罗兰 H50 莱姆绿 H51 淡海鸥灰/浅海灰 H52 橄榄褐1 H53 中灰 H54 海军蓝 H55 午夜蓝 H56 中蓝 H57 飞机灰 H58 内部绿 H59 IJN绿/浓绿1 H60 IJA绿/浓绿2 H61 IJN灰/明灰白1 H62 IJA灰/明灰白2 H63 金属蓝绿/青竹 H64 RLM71暗绿 H65 RLM70黑绿 H66 RLM79沙褐 H67 RLM65淡蓝 H68 RLM74暗灰 H69 RLM75灰 H70 RLM02灰 H71 中石(RAF) H72 暗土(RAF) H73 暗绿(RN/RAF) H74 天/鸭蛋绿(RN/RAF) H75 暗海灰(RAF) H76 烧铁 H77 胎黑 H78 橄榄褐2 H79 沙黄 H80 卡其绿 H81 卡其 H82 军舰暗灰1 H83 军舰暗灰2 H84 红木 H85 帆布 H86 洋红 H87 金属红 H88 金属蓝 H89 金属绿 H90 透明红 H91 透明黄 H92 透明橙 H93 透明蓝 H94 透明绿 H95 烟灰 H96 烟蓝 H97 荧光黄 H98 荧光橙 H99 荧光粉 H100 荧光绿 H301 灰FS36081 H302 绿FS34092 H303 绿FS34102 H304 橄榄褐FS34087 H305 灰FS36118 H306 灰FS36270 H307 灰FS36320 H308 淡鬼灰FS36375 H309 暗绿FS34079 H310 暗革FS30219 H311 伪装灰FS36622 H312 苍绿FS34227 H313 沙FS33531 H314 鸭蛋蓝FS35622 H315 灰FS16440 H316 光泽白FS17875 H317 暗海鸥灰FS36231 H318 雷达罩 H319 淡绿/淡松叶 H320 暗绿/浓松叶 H321 淡棕/黄土 H322 氰蓝 H323 淡蓝 H324 淡灰 H325 灰FS26440 H326 蓝FS15044 H327 红FS11136 H328 蓝FS15050 H329 黄FS13538 H330 暗绿BS381C/641 H331 暗海灰BS381C/638 H332 飞机灰BS381C/627 H333 暗海灰BS381C/640 H334 麦灰BS4800/18B21 H335 中海灰BS381C/637 H336 麻BS4800/10B21 H337 灰蓝FS35237 H338 淡灰FS36495 H339 引擎灰FS16081 H340 田野绿FS34097 H341 黄沙 H342 油污 H343 煤灰 H344 锈红 H345 颗粒蓝 H346 颗粒沙 郡氏硝基涂料---MrColor Oil-based Paint 1 光泽白 2 光泽黑 3 光泽红 4 光泽黄 5 光泽蓝 6 光泽绿 7棕 8银 9金 10 铜 11 淡海鸥灰 12 橄榄褐1 13 半光中灰 14 半光海军蓝 15 半光IJN中岛绿 16 半光IJA绿 17 RLM71暗绿 18 半光RLM70黑绿 19 半光沙褐 20 半光淡蓝 21 半光中石 22 半光暗土 23 暗绿2 24 天 25 暗海灰 26 鸭蛋绿 27 内部绿 28 钢/黑铁 29 半光舰底红 30 消光剂/哑色添加剂 31 暗灰1 32 战舰暗灰2 33 哑黑 34 光泽天蓝 35 三菱IJN灰 36 半光RLM74灰绿 37 RLM75紫灰 38 橄榄褐2 39 暗黄/沙黄 40 德国灰 41 红褐 42 红木 43 木棕 44 甲板革 45 帆布 46 罩光漆/透明色 47 光泽透明红 48 透明黄 49 光泽透明橙 50 透明蓝 51 半光肉 52 田野灰2 54 哑卡其绿 55 卡其 56 IJA灰/明灰白2 57 金属蓝绿/青竹 58 半光橙黄 59 光泽橙 60 半光RLM02灰 61 烧铁 62 哑白 63 光泽粉 64 光泽黄绿 65 光泽亮蓝 66 光泽亮绿 67 光泽紫 68 光泽洋红 69 光泽降白 70 暗绿 71 午夜蓝 72 半光中蓝 73 光泽飞机灰 74 空军蓝 75 金属红 76 金属蓝 77 金属绿 78 金属黑 79 光泽明红 80 半光钴蓝 81 苹果褐 90 明银 92 半光黑 100 葡萄酒红/栗色 101 烟灰 102 烟蓝 107 人型白 108 人型红 109 人型黄 110 人型蓝 111 人型肉1 112 人型肉2 113 RLM04黄 114 RLM23红 115 RLM65淡蓝 116 RLM66黑灰 117 RLM76淡蓝 118 RLM78淡蓝 119 RLM79沙黄 120 RLM80橄榄绿 121 RLM81紫褐 122 RLM82淡绿 123 RLM83暗绿 124 三菱暗绿 125 引擎罩 126 三菱仪表板 127 中岛仪表板 128 灰绿 129 中岛暗绿 130 川崎暗绿 131 螺旋桨 132 土绿 133 土 134 草绿 135 俄国绿 136 俄国绿2 151 珠光白 152 珠光绿 153 珠光红 154 珠光蓝 155 特级罩光漆/透明色 156 特级白4 157 特级黑 158 特级意大利灰 159 特级银 160 珠光橙红 201 荧光红 202 荧光黄 203 荧光橙 204 荧光粉 207 荧光绿 301 灰FS36081 302 绿FS34092 303 绿FS34102 304 橄榄褐FS34087 305 灰FS36118 306 灰FS36270 307 灰FS36320 308 灰FS36375 309 绿FS34079 310 棕FS30219 311 灰FS36622 312 绿FS34227 313 黄FS33531 314 蓝FS35622 315 灰FS16440 316 光泽白FS17875 317 灰FS36231 318 雷达罩 319 淡绿 320 暗绿 321 淡褐 322 氰蓝 323 淡蓝 324 淡灰 325 灰FS26440 326 蓝FS15044 327 红FS11136 328 蓝FS15050 329 黄FS13538 330 暗绿BS381C/641 331 暗海灰BS381C/638 332 淡飞机灰BS381C/627 333 暗海灰BS381C/640 334 麦灰BS4800/18B21 335 中海灰BS381C/637 336 麻BS4800/10B21 337 灰蓝FS35237 338 淡灰FS36495 339 引擎灰FS16081 340 田野绿FS34097 郡氏硝基金属漆---MrMetal Color Mr Metal Color 211 铬银 212 生铁 213 不锈钢 214 熟铁 215 铜 216 青铜 217 金 219 黄铜 追问: 有图吗为什么H开头的101到300之间的是没有的 高达模型 专用色的色表有吗 回答: http://blogsinacomcn/s/blog_49c0c9540100a3f7html 去这里看 比较详细了 补充: http://bbscnmslnet/thread-1130-1-1html 在给你个地址 高达配色的

首先说说神州

这个品牌总是人们针对的焦点,不管做工好不好,这些多带有点个人主观的看法,还是要自己使用过才能谈出感受,我的三个朋友买的都是神舟的笔记本,一个买了大概有2年多3年了,是早期神州带X600独立显卡的那款,机器现在为止基本上运行正常,换过一个键盘,客服保修换的。另外一台是07年买的,没记错的话应该是承运F205的,带X1600的独立显卡,机器除了发热大之外没有其他重大问题,机主本人基本上是一天724小时挂机+wow的,前段时间过热经常死机,拿去客服清洗了笔记本,问题解决,声音也小了很多。最后一位比较倒霉,买的是神州3999某款热卖双核本,买来不到2个月,重装系统怎么也装不上去,怀疑有坏道,拿去客服,一堆(眼睛一瞄至少有4,5台)同样型号的笔记本等着维修,解决不了,后来送厂,现在暂无下文。

个人评价:买神舟的本,还是买高端的比较好,低端机的确有偷工减料或者说设计上有缺陷。

hp惠普

第一次接触到惠普的笔记本是跟一个亲戚去买笔记本,她叫了他一个已经毕业的学生帮他作参考(那个家伙自己是做惠普经销的)结果可想而知,那家伙一个劲的推荐自己卖的如何如何好,而且如何如何保证自己的价格低到如何的惊天地泣鬼神,当听说我们想买三星的Q45的时候有一个劲的说三星的机器如何如何垃圾,返修率高什么的,结果pconline一下,发现这个家伙严重不老实(价格严重报高,自己恩师都骗)、后来还是买了Q45,用到现在差不多一年了,前几天上网碰到她问道现在电脑用的如何,回答:一切良好。由此开始对hp感觉不好了。

客观来说,在2000年左右的时候hp的笔记本的确质量很好(从现在二手市场的出售比例就能看出),那个时候hp还没有重组兼并康柏,全国各大机关单位用的都是惠普的电脑,印象最深的就是我家那边的邮电局,用的还是原来PII时代的惠普主机。

但是现在来说就不确定了,虽然惠普的广告广东体育台天天在播,虽然广告很有趣,但首先让我觉得很不方便的就是很多自带vista系统的惠普本居然不带XP的驱动!!而且相当部分的入门款vista机种当中是不能流畅运行vista的,这让人陷入了进退两难境地,一个国际大厂居然连驱动都提供不全,hp是不是该反思下自己了?

有次跟一个老同学(在天河某IT卖场工作的)聊天时得知,现在的hp对经销商抓的很严,每月某冷门或者淘汰机型硬性要求完成的销售指标很高,有的小规模的经销商往往是坑蒙拐骗卖得出一台是一台的态度在做生意,所以导致很多人被js了。(我知道这个论坛上hp的粉丝很多,但是我是按自己的所见所闻写的,如果不对,欢迎指正)

个人评价:买之前最好三思,如果只是冲着品牌去的,你还可以找到更好的,如果一心想买,那么请找间大的经销商,坚定自己想买的型号的信念,不要轻易让js改变你的主意。

asus华硕

华硕本据说是现在市售笔记本品牌当中唯一不用担心买到翻新机的品牌(据说而已,还请专家查证)因为华硕的展示样机都会有详细的回收条例,标贴和序列号都不可以随便更改的,着对于消费者来说无疑多了一层保障。

我用的别人的机器当中 华硕的以A8为主,那就从A8说起吧:整体做工不错,除了键盘手感一般(感觉里面隐约有金属般的异响),在我接触的华硕用户(一共有4个人,三个A8,一个X什么的)当中还没有维修的案例,而且华硕的驱动在官网上非常好找,安装也比较简单。除了有个家伙的硬盘因为更换之后不知何故出现传输缓慢的现象(换上去的是块三星的120G,测不出硬盘温度,使用时间等等)后来只好把原来的80G硬盘再装回去120G当移动硬盘,问客服,解释不清楚,最后还是不了了之。

个人觉得ASUS系列的笔记本都还算可以,当然,也有些顺应市场需求只是纯粹的低价无性能本,从高端到低端都是无孔不入的,本人一度考虑F8系列作为继acer之后的替代机种,原因是小巧,性能强大,加上还可以的电池续航时间,都还是不错的。

但有个小缺点指出的是:华硕的笔记本很大一部分的时候开机显示logo的同时会发出开机音,这点在某些特殊肃静的场合(开会,上课,宿舍睡觉时间)似乎会引来不必要的尴尬,暂时还不知道如何取消,知道的请指教。

个人评价:全国民性质的笔记本品牌,从学生,白领,老板,发烧族都可以找到自己所需型号,另外F8系列真的很好,自己比较推荐的一款。

Dell戴尔

如果不是很懂电脑的话,建议购买他,因为dell独特的直销式销售方式保证了它的质量,不会受到经销商的无故加价或者任何的欺骗行为,而且戴尔出售的笔记本都是带发票的,不必担心保修方面的问题(实际上dell的保修的确不错基本上都是做到有问题就更换的)

但有个地方需要注意的是戴尔的售后在某些偏远的地方是比较慢的,造成了一些不便需要注意。再者就是戴尔本身自带的工具软件比较少而且系统是不分区或者只有两个区的,(在某些低端机种中系统工具软件像类似电源管理的甚至根本没有)或者自带有个半残废的杀毒试用装之类的,使用上可能不回有acer或者asus方便。(当然这些问题都可以自己解决

个人评价:easy price easy buy

设备型号: iPhone 4S

激活状态:已激活

序列号:C39H42U4DTD2

硬件保修到期:已过期

生产日期:2012年1月 (4周)

剩余保修日期:已过期

生产地区:中国

电话客服日期:已过期

保修已过,如果是刚买的则是翻新机

销售地(版本)你看你手机型号的最后两位(查看方法:设置 --> 通用 --> 关于本机)

CH结尾的为中国(国行),ZP结尾的为香港(港行),LL结尾的为美国(水货),B为英国水货,KH为韩版水货

希望可以帮助你

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