胆汁酸中有鹅脱氧胆酸(C11enodeoxy- cholic acid)、3a- 羟基- 6- 氧- 5α-胆烷酸(3α- Hydroxy-6- oxo-5 α-cholanic acid)和石胆酸
汁中主要成分为胆汁酸类、胆色素、粘蛋白、脂类及无机物等。
(Llthocholic acid),它们几乎完全与甘氨酸结合而存在。另含猪胆酸和猪去氧胆酸(Hyodeoxycholic acid)。猪胆汁主要含猪去氧胆酸(hyodesoxycholic acid),尚含去氧胆酸和多种氨基酸。
猪胆汁为猪科动物的胆汁,可作中药,味苦、寒、咸,功效分类为化痰止咳平喘药,化痰药。其功效主治益肺,补脾,润燥。治消渴、便秘、黄疸、百日咳、哮喘、泄泻、痢疾、目赤、喉痹、盯耳、痈肿。
目录 1 拼音 2 英文参考 3 检查名称 4 分类 5 化验取材 6 概述 7 原理 8 试剂 9 操作方法 10 正常值 11 临床意义 12 附注 13 相关疾病 1 拼音
zǒng dǎn zhī suān
2 英文参考TBA
total bile acid
total bile acids
3 检查名称总胆汁酸
4 分类
血液生化检查/脂类测定
5 化验取材血液
6 概述胆汁酸的生成和代谢与肝脏有十分密切的关系,血清胆汁酸水平是反映肝实质损伤的一个重要指标。血清总胆汁酸(Total bile acids,TBA)测定对肝病的诊断有十分重要的价值。
7 原理在3α羟类固醇脱氢酶(3αHSD)作用下,各种胆汁酸C3上α位的羟基(3αOH)脱氢形成羧基(3αO),同时氧化型NAD+还原成NADH。随后,NADH的上氢由黄递酶催化转移给硝基四氮唑蓝(NTB),用磷酸终止反应,生成物的产量与总胆汁酸成正比,在540nm波长比色。与同样处理的标准品比较,计算其含量。反应式如下:
8 试剂
有成套商品试剂盒供应,主要包括以下成分:
(1)02mol/L TrisHCl缓冲液(pH75):称取Tris 243g,用约500ml蒸馏水溶解。加入1mol/L盐酸1612ml,混匀,以蒸馏水稀释至1L,加入非离子表面活性剂Noigen ET180 10mg。
(2)测定试剂:取48ml上述缓冲液,加入663mg(100μmol)NAD+、20mg NTB,溶解,临用前加入50U黄递酶及05U 3αHSD,贮棕色瓶中,置4℃保存。
(3)空白试剂:同测定试剂,但不含3αHSD,贮棕色瓶中,置4℃保存。
(4)丙酮酸钠(200mmol/L):称取丙酮酸钠11g,以蒸馏水溶解并稀释至50ml,贮棕色瓶中,置4℃保存。
(5)133mol/L磷酸:取85%磷酸(d=1685)455ml,加入约400ml蒸馏水中稀释至500ml。
(6)混合血清:取无溶血、无黄疸、肝功能试验正常的血清混合。
(7)标准液(50μmol/L甘氨胆酸钠):称取甘氨胆酸钠(MW=4876)244mg,溶入100ml混合血清中,分装后冰冻保存。
9 操作方法严格按试剂盒说明书进行,或参照表1操作。
混匀,540nm波长比色,以相对应的B管调零,分别测定相应各管吸光度。
10 正常值禁食,成人血清1~7μmol/L(35±175)。
11 临床意义(1)急性肝炎:急性肝炎时血清TBA显著增高,可达正常人水平的10~100倍,甚至更高。杨昌国等报道,60名健康对照者空腹TBA(FTBA)含量为49±24μmol/L,中餐后2h血清TBA(PTBA)含量为82±29μmol/L;34例急性肝炎急性期FTBA为1241±740μmol/L,PTBA为1522±730μmol/L,分别是正常上限的13倍和11倍,异常率为100%。急性肝炎初愈患者血清TBA由最初的高值几乎与AST在同一时间降至正常水平,若持续不降或反而升高者则有发展为慢性的可能。有人对21例急性肝炎患者的随访研究发现,凡TBA恢复至10μmol/L以下者,一年后未发现有慢性转归病例,但TBA升高而AST降至正常者5例中有4例转为慢性肝炎。
(2)慢性肝炎:国外研究认为,在慢性肝炎患者中,若TBA水平超过20μmol/L,可考虑慢性活动性肝炎。国内杨昌国等报道,慢性迁延性肝炎pTBA和FTBA分别是236±125μmol/L和77±46μmol/L,而慢性活动性肝炎分别是1113±451μmol/L和787±389μmol/L,慢性活动性肝炎的FTBA和PTBA均显著高于慢性迁延性肝炎。故血清TBA测定对慢性肝炎的鉴别以及监测慢性活动性肝炎的预后和治疗效果有重要意义。
(3)肝硬化:肝硬化时,肝脏对胆汁酸的代谢能力减低,血清TBA在肝硬化的不同阶段均增高,增高幅度一般高于慢性活动性肝炎,即使在肝硬化的晚期亦如此。当肝病活动降至最低时,胆红素、转氨酶及堿性磷酸酶等指标转为正常,但血清TBA仍维持在较高水平上。
(4)乙醇性肝病:乙醇性肝病血清TBA可增高。当乙醇性肝病(包括肝硬化)发生严重的肝损伤时,血清TBA明显增高,而轻、中度损伤增高不明显。也有人报道,血清TBA测定对乙醇性肝病肝细胞损伤诊断的可信度和灵敏度远远优于各种酶学检查和半乳糖耐量试验等指标,甚至建议将血清TBA再加上β氨基己糖苷酶作为乙醇性肝病的诊断指标。Sumino等报道,乙醇性肝病病人食入蛋黄后60min,血清TBA明显升高,并认为餐后60minTBA测定对乙醇性肝病诊断更有意义。
(5)中毒性肝病:血清TBA测定对中毒性肝病的诊断优于常规肝功能试验。有报道表明,在23例接触苯乙烯的工人中,11人血清TBA增高,而其他指标仅有3例异常。对临床服用某些治疗药物而致肝中毒引起的急性肝损伤也有诊断意义。
(6)胆汁淤积:血清TBA测定对胆汁淤积的诊断有较高灵敏度和特异性。肝外胆管阻塞及肝内胆汁淤积包括急性肝炎、初期胆管性肝硬化、新生儿胆汁淤积、妊娠性胆汁淤积等均可引起TBA增高。在胆管阻塞的初期,胆汁分泌减少,使血清中的TBA显著增高,且在阻塞的不同阶段几乎保持不变;而血清胆红素水平则随着不同阶段而变化。胆汁淤积患者肝组织中的胆汁酸含量明显高于正常人,CA增高8倍,CDCA增高4倍,DCA仅增加15%。肝外阻塞经过引流缓解后,血清TBA水平迅速下降,而其他指标则缓慢恢复正常。
在所有肝病中,餐后血清TBA水平及异常率均比空腹时高,故对肝病的诊断餐后TBA测定比空腹时测定更灵敏。有人报道,餐后测定TBA对各种肝病的诊断灵敏度和特异性高达100%,而同时测定空腹血清TBA有40%的患者在正常范围。急性肝炎是否转为慢性,连续监测餐后TBA水平可以观察慢性过程。慢性活动性肝炎是否发生肝纤维化改变,餐后连续监测也可以了解纤维化过程,不做肝活检即可获得肝损伤的程度。
12 附注(1)血清中LD在其底物存在下(血清中含有一定量的乳酸)也可还原NAD+为NADH,产生高空白值。本法中加入丙酮酸钠,抑制LD活性,可有效地降低空白吸光度。
(2)反应混合物中各成分浓度为:
3αHSD 5U/L
黄递酶 500U/L
NAD+ 1mmol/L
NTB 02g/L
pH 750
(3)反应混合物的吸光度受蛋白质影响,故甘氨胆酸钠标准液配制于混合血清中。混合血清中原有胆汁酸及其他可能参与反应的物质需设P管消去。
(4)3αHSD制品中含有二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT),酶制剂用量过多时可影响NTB的还原。
(5)本法线性达250μmol/L。如血清胆汁酸超过此值应作适当稀释。
(6)Noigen ET180是一种非离子表面活性剂,化学名为聚氧乙烯油醚(polyoxyethyleneolylether),为日本京都Daiichi Kogyo Seiyaku公司产,加入反应混合物中可防止沉淀,不影响3αHSD及黄递酶活性,不影响本测定系统的敏感性。
(7)血清中的TBA含量较低,标本中含大量的干扰物质,其中最主要的是乳酸脱氢酶(LDH)。LDH能影响NAD+的还原反应,由LDH生成的NADH往往比由3αHSD催化TBA参与的反应生成的NADH量要大的多。由于各类肝炎均可引起血清LDH升高,因此测定中必须消除LDH的影响,方法有:血清67℃加温30min、加草酸作为LDH的封闭剂、堿或酸处理、或用丙酮酸钠抑制LDH活性等,其中以丙酮酸钠法最好。其它还原性物质的干扰通过设立双试剂,样品先和不加3αHSD的体系孵育,使样品中的干扰物质反应,然后加入3αHSD,使TBA反应,可排除干扰。
13 相关疾病黄疸
肝硬化
熊去氧胆酸,主要成分是3a,7β- 二羟基-5β- 胆甾烷-24-酸,为有机化合物,无臭,味苦。本品在乙醇中易溶,在氯仿中不溶;在冰醋酸中易溶,在氢氧化钠试液中溶解。医学上用于增加胆汁酸分泌,并使胆汁成分改变,降低胆汁中胆固醇及胆固醇脂,有利于胆结石中的胆固醇逐渐溶解。
胆汁酸是胆汁的主要活性成分,是动物体内胆固醇代谢过程中所产生的一系列固醇类物质,是动物机体中脂肪代谢不可缺少的物质。
胆汁酸是动物机体完成脂肪代谢和胆固醇代谢必不可少的物质。
饲料级胆汁酸用在畜禽和水产养殖中可以起到提高饲料中的油脂和蛋白的消化吸收率的作用,同时还具有保肝护胆的功效。
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